孙耀峰
- 作品数：17 被引量：92H指数：7
- 供职机构：威海市立医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划美国国立卫生研究院基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 威海市区CTX-M型具有头孢他啶水解活性的ESBLs基因型调查被引量：5
- 2013年
- 目的 调查威海市区具有头孢他啶（ceftazidime,CAZ）水解活性的头孢噻肟（cefotaxime,CTX）M型产超光谱β-内酰胺酶（extended-spectrum β-lactamases,ESBLs）基因型,了解其种类、比例、传播机制以及对CAZ的耐药特点,评估目前CAZ药敏折点对产CTX-M型ESBLs菌株的影响.方法 对威海市区3家医院2012年临床分离的产ESBLs的120株大肠埃希菌（Escherichia coli,E.coli进行研究,采用特异性引物扩增TEM、SHV、CTX-M系列基因,测序后进行序列分析；挑选产生单一ESBLs基因型的菌株,采用琼脂稀释法测定其对CTX、CAZ的最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）值；接合实验了解具有CAZ活性的CTX-M型ESBLs编码基因所在质粒是否为接合性质粒,以及接合子的MIC范围.结果 120株ESBLs E.coli中检出产生blaCTX-M-55的E.coli共40株（33.3％）,产生blaCTX-M-15型者26株（21.7％）,产生blaCTX-M-101及blaCTX-M-123型分别为2株（1.7％）和3株（2.5％）,这四种基因型共占71株（59.2％）.基因序列分析表明,这四种基因在725位有1个碱基的差异（GAC→GGC）,导致240位氨基酸由天冬氨酸变为甘氨酸.产单一基因型blaCTX-M-15、55、101和123的菌株共55株.药敏试验结果显示,上述55株ESBLs大肠埃希菌对CTX均耐药,对CAZ的MIC值范围为8～128 μg/mL,耐药率为74.5％（41/55）.接合实验发现,上述4种基因可以通过接合而传递耐药性.其接合子对CAZ、CTX的MIC值较亲本降低1～8倍,接合子对CTX均耐药,对CAZ的MIC值范围为4～128 μg/mL,耐药率为22.8％（8/35）.结论 威海市区大肠埃希菌产生的具有CAZ水解活性的ESBLs基因型主要为blaCTX-M-55,其次为blaCTX-M-15,blaCTX-M-101和blaCTX-M-123较少.耐药基因所在的质粒为可接合性质粒.blaCTX-M-15、55、101、123型ESBLs基本适合目前的CLSI CAZ折点,可直接向临床报告药敏结果.鉴于可水解CAZ的CTX-M型ESBLs在临床菌株中检出率较高,对于治疗表型敏感的ESBLs�
- 王喜仁赵淑堂孙耀峰
- 关键词：头孢他啶CTX-M-15大肠埃希菌
- T、B淋巴细胞及细胞因子在三氯乙烯诱发过敏反应中的作用被引量：14
- 2006年
- 目的利用三氯乙烯(TCE)染毒的小鼠模型,研究T、B淋巴细胞及细胞因子在TCE诱发过敏反应中的作用。方法以皮肤接触同时结合吸入对12只小鼠进行致敏处理,6周后耳部涂抹TCE进行激发。以耳肿胀系数作为评价小鼠过敏反应的指标;分离脾细胞体外培养,采用噻唑蓝(MTT)法测定脾淋巴细胞抗原特异性增殖反应;酶联免疫吸附测定(ELISA)方法测定细胞培养上清液中IgG和白介素-4(IL-4)、γ型干扰素(IFN-γ)水平;应用流式细胞技术进行淋巴细胞亚群分析。结果TCE致敏组小鼠脾淋巴细胞加入TCE体外培养后,细胞存活率明显高于溶剂对照组[(79±10)%vs(63±11)%,P<0·05];细胞培养上清液中IgG水平(与二甲基亚砜对照孔比较的相对值)在两组间比较差异有显著性[(70±5%)vs(53±6)%,P<0·01]。流式细胞分析结果显示,TCE致敏组脾淋巴细胞与TCE共培养后,CD3+T细胞占总淋巴细胞的比例[(41·6±4·4)%]及CD4+/CD8+(2·1±0·6)与对照组比较[分别为(39·4±4·0)%和(2·3±0·9)],差异无显著性(P>0·05)。TCE致敏组小鼠激发时未见耳肿胀,然而TCE致敏组小鼠IFN-γ/IL-4比值(0·54±0·12)明显低于溶剂对照组(0·90±0·22,P<0·01)。结论TCE能够诱导T淋巴细胞的增殖活化,分泌Th2型细胞因子,并刺激B淋巴细胞分泌抗原特异性的IgG抗体。
- 戴宇飞李海山谢劲心冷曙光王军彩冯志明程娟牛勇孙耀峰郑玉新
- 关键词：三氯乙烯过敏细胞因子体液免疫细胞免疫
- 人类白细胞抗原DRB1基因多态性与三氯乙烯药疹样皮炎易感性的关系被引量：6
- 2006年
- 目的研究人类白细胞抗原DRB1(HLA-DRB1)基因多态性与三氯乙烯药疹样皮炎易感性的关系。方法应用聚合酶链反应产物直接测序方法,比较112例三氯乙烯药疹样皮炎病例和142例健康三氯乙烯接触工人HLA-DRB1基因第2外显子氨基酸密码子多态性及等位基因频率分布,并计算相对危险度(OR)及其95%可信区间(95%CI)。结果病例组与接触对照组HLA-DRB1等位基因频率差异有显著性,病例组DRB1*1501、*1202和*04等位基因频率显著高于对照组(分别为18.8%vs7.7%,OR=2.748,95%CI=1.587～4.761;12.5%vs6.0%,OR=2.244,95%CI=1.195～4.214;17.4%vs11.3%,OR=1.660,95%CI=1.002～2.750),而DRB1*0301、*0901、*13和*1502等位基因频率显著低于对照组(分别为0.4%vs4.6%,OR=0.093,95%CI0.012～0.720;7.6%vs13.7%,OR=0.516,95%CI=0.283～0.939;1.3%vs6.7%,OR=0.189,95%CI=0.055～0.648;2.7%vs8.5%,OR=0.298,95%CI=0.120～0.743);病例组与接触对照组间12个位点(密码子9、11、12、13、26、28、30、33、37、70、71、74)氨基酸密码子多态性分布频率差异有显著性。结论HLA-DRB1基因多态性可能是导致三氯乙烯药疹样皮炎个体易感性差异的原因之一。
- 李海山戴宇飞黄汉林冯秀丽程娟牛勇孙耀峰张林媛李来玉陈彪郑玉新
- 关键词：三氯乙烯人类白细胞抗原DRB1基因多态性药疹样皮炎
- 焦炉工XRCC1基因多态性与淋巴细胞染色体损伤易感性的关系被引量：6
- 2005年
- 目的研究焦炉工XRCC1基因多态性与外周血淋巴细胞染色体损伤易感性的关系。方法选取141名焦炉工和66名医护人员作为研究对象。以尿中1羟基芘浓度评价多环芳烃暴露内剂量,采用双核淋巴细胞微核的方法评价个体染色体损伤水平,聚合酶链反应限制性片段长度多态性的方法分析XRCC1基因4个单体型标签单核苷酸多态性位点(C26304T、G27466A、G28152A和G36189A),Clark运算法则确定个体XRCC1基因的单体型等位基因和单体型对,协方差分析校正年龄、性别、环氧化物水化酶基因型组合和尿1羟基芘水平,比较具有不同XRCC1基因型或单体型对个体外周血淋巴细胞微核率的差异。结果焦炉工尿1羟基芘为12.0μmol/mol肌酐(95%CI值为10.4～13.9μmol/mol肌酐),微核率为(0.95±0.66)%;对照组的尿1羟基芘为0.7μmol/mol肌酐(95%CI值为0.6～1.3μmol/mol肌酐),微核率为(0.40±0.36)%,差异有统计学意义,P<0.01。焦炉工的XRCC1基因CGGG单体型与外周血淋巴细胞染色体损伤水平降低有关联,TGGG和CGAG单体型与染色体损伤水平显著性增加有关联。结论焦炉工XRCC1基因多态性可影响其染色体损伤的易感性,基于XRCC1单体型的关联研究比基于单个单核苷酸多态性的研究更为敏感。
- 冷曙光程娟张林媛潘祖飞戴宇飞牛勇孙耀峰李斌何凤生郑玉新
- 关键词：焦炉工XRCC1基因基因多态性淋巴细胞染色体损伤
- 热休克蛋白90α在原发性肝癌患者血浆中的表达及意义被引量：6
- 2017年
- 热休克蛋白（HSP）90α可以在多种肿瘤患者的血液中被检测到,而且其表达水平远高于健康对照组,HSP90α在肝癌组织学上研究较多,但HSP90α在肝癌患者血浆中研究较少,本次实验通过检测血浆中HSP90α含量,旨在探讨血浆HSP90α在肝癌诊断中的意义及临床应用价值。
- 孙耀峰籍继颖孙荣同毕红梅苑婷婷孙燕
- 关键词：原发性肝癌肝癌诊断胃癌分化程度血管浸润酶联免疫法
- 焦炉作业工人淋巴细胞诱变剂的敏感性研究被引量：1
- 2008年
- 目的 研究焦炉作业工人外周血淋巴细胞对诱变剂博来霉素（bleomycin，BLM）损伤的敏感性。方法 以94名焦炉作业工人（暴露组）和64名选矿工人（对照组）作为研究对象。收集班后尿，测定尿中1-羟基芘水平反映多环芳烃暴露内剂量。肘静脉血分离淋巴细胞，体外培养20h后，用8μg/ml BLM处理30min，彗星试验评价细胞DNA损伤水平。BLM处理前后DNA损伤的差即为个体对诱变剂的敏感性。结果 两组研究对象在年龄、性别、吸烟饮酒状况等方面差异均无统计学意义。焦炉工尿中1-羟基芘水平（9．0μg／L，95％CI：6．8～11．7）显著高于对照（1．5μg/L，95％CI：1．3～1．7）（t=-9．317，P〈0．01）。对照组诱变剂敏感性为14．9（95％CI：13．7～16．3），焦炉工为17．7（95％CI：16．3～19．3），差异有统计学意义（t=-2．583，P=0．01）。进一步按焦炉工尿1·羟基芘水平几何均数（9．0μg/L）分层，发现高1．羟基芘水平组焦炉工对BLM的敏感性显著高于低1-羟基芘水平组（F=4．001，P=0．05）。对照人群中吸烟者对BLM造成的损伤更为敏感。未发现年龄、饮酒、焦炉作业工龄、外暴露等级等因素对BLM敏感性有显著影响。结论 焦炉逸散物的暴露能够增加外周血淋巴细胞对BLM损伤的敏感程度，可能是焦炉作业工人中肿瘤高发的一个原因。
- 程娟冷曙光李海山牛勇孙耀峰段化伟宾萍张林媛梁学邈林函王忠旭戴宇飞李斌郑玉新
- 关键词：焦炭诱变剂博来霉素彗星试验
- 慢性肾衰竭患者网织红细胞参数的变化及临床意义被引量：7
- 2016年
- 慢性肾衰竭（CRF）是常见的临床综合征。它发生在各种慢性肾病的基础上,缓慢地出现肾功能减退而至衰竭。CRF常引起不同程度的贫血。网织红细胞（reticulocyte,RET）是介于晚幼红细胞与成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞,RET可以作为评价骨髓造血功能和红细胞生成活力的重要指标,随着其计数方法的不断改进,临床应用价值越来越高。本研究探讨红细胞及其参数与CRF的关系。
- 孙耀峰孙大林高胜海刘晓丹
- 关键词：慢性肾衰竭网织红细胞参数慢性肾病骨髓造血功能氮质血症期尿毒症期
- 威海地区成人血清总IgE参考区间的调查
- 2015年
- 随社会的发展,新的食品、药品不断的开发及引进,人们精神压力过大导致免疫功能紊乱,过敏性疾病在过去几十年中发病率显著上升。世界变态反应组织公布了30个国家的流行病学调查由血清免疫球蛋白E（总IgE）介导的过敏性疾病占22%,在过敏性疾病中,血清总IgE水平与机体在过敏原中的暴露强度和过敏症状的严重程度有关,测定IgE水平有助于过敏性疾病的诊断。参考区间受多种因素影响,如：人种、遗传、区域、饮食、性别及年龄等。
- 高胜海孙荣同孙耀峰李彬彬
- 关键词：成人血清过敏性疾病血清免疫球蛋白过敏症状
- 人类白细胞抗原DQ基因多态性与三氯乙烯药疹样皮炎易感性的关系被引量：9
- 2006年
- 目的研究人类白细胞抗原DQ(HLADQ)基因多态性与三氯乙烯药疹样皮炎易感性的关系。方法应用聚合酶链反应产物直接测序方法,比较112例三氯乙烯药疹样皮炎病例和142例健康三氯乙烯接触工人HLADQA1和HLADQB1基因第2外显子氨基酸密码子多态性及等位基因型频率分布。结果病例组DQA1等位基因0201和060101/0602的分布频率[7.6%(17/224)和16.1%(36/224)]显著高于对照组[3.5%(10/284)和7.0%(20/284)],而病例组DQA1等位基因0103和050101/0503/0505的分布频率[5.8%(13/224)和8.9%(20/224)]显著低于对照组[10.9%(31/284)和17.3%(49/284)]。此外,病例组与对照组之间差异有统计学意义的氨基酸密码子多态性位点见于DQA1的5个密码子(25、41、52、54和69)。病例组与对照组HLA-DQB1等位基因的分布频率差异无统计学意义。结论HLADQA1基因多态性可能是导致三氯乙烯药疹样皮炎个体易感性差异的原因之一。
- 李海山戴宇飞黄汉林冯秀丽孙耀峰牛勇程娟张林媛李来玉陈彪郑玉新
- 关键词：三氯乙烯HLA抗原多态现象职业性皮炎药疹样皮炎
- 亚甲基四氢叶酸还原酶基因单体型与焦炉作业工人染色体损伤易感性的关系被引量：3
- 2006年
- 目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性与焦炉作业工人染色体损伤易感性的关系。方法选取140名焦炉工和66名医护人员作为研究对象,采用胞质分裂阻滞微核实验评价个体染色体损伤水平,测定尿中1-羟基芘浓度反映多环芳烃暴露内剂量,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法分析MTHFR基因两个单核苷酸多态性(SNP)位点(C677T、A1298C),利用PHASE2·1软件经Bayesian法计算单体型。校正年龄、性别和尿1-羟基芘水平,用协方差分析比较MTHFR不同基因型或单体型之间外周血淋巴细胞微核率的差异。结果研究对象中MTHFRC677T和A1298C两个变异等位基因频率分别为0·56和0·16,其分布均符合Hardy-Weinberg平衡。本研究中MTHFR基因这两个SNPs存在连锁不平衡关系(D’=0·99),研究对象中有四种单体型677T-1298A、677C-1298A、677C-1298C和677T-1298C,其频率分别为0·555、0·279、0·163和0·003。在焦炉工组,非677C-1298A/677C-1298A单体型对的微核率高于677C-1298A/677C-1298A,差异有显著性(1·00±0·67vs0·60±0·41,P=0·04),其中677T-1298A/677T-1298A单体型对微核率高于677C-1298A/677C-1298A,差异有显著性(1·08±0·71vs0·60±0·41,P=0·04)。在焦炉工组和对照组中,未发现上述两个SNPs与微核率之间显著关联。结论MTHFR基因单体型可能是影响焦炉工染色体损伤的遗传易感性因素之一。
- 孙耀峰戴宇飞程娟冷曙光牛勇潘祖飞郑玉新
- 关键词：亚甲基四氢叶酸还原酶单体型微核率
