夏天奇
- 作品数：12 被引量：15H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 表达猪瘟病毒E2蛋白重组PRRS病毒基因工程疫苗的构建方法和应用
- 本发明提供了一种表达猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组质粒的构建方法，以及根据该重组质粒构建的基因工程疫苗。基于反向遗传操作平台，根据猪瘟石门株和猪瘟兔化弱毒株C株的E2基因，以及高致病...
- 童光志高飞姜一峰曲泽慧周艳君李国新虞凌雪李丽薇杨莘郑浩童武夏天奇
- 日本血吸虫Bantam miRNA靶基因Rho相关GTP结合蛋白对雌虫卵巢发育影响的分析
- 2023年
- 为鉴定Rho相关GTP结合蛋白为日本血吸虫Bantam miRNA的靶基因,并初步研究该基因的功能。利用RNAhybrid软件分析Bantam miRNA的靶基因,用3’RACE技术扩增获得靶基因与Bantammi RNA的互作区域,利用荧光素酶报告基因验证靶基因与miRNA的互作,qPCR分析日本血吸虫Rho相关GTP结合蛋白基因在雌虫不同部位的转录情况,再利用RNAi技术初步研究该基因的功能。结果发现:共转染含有与Bantam miRNA互作区域的Rho相关GTP结合蛋白的重组质粒和Bantam miRNA mimics可显著抑制荧光素酶的表达;qPCR分析表明日本血吸虫Rho相关GTP结合蛋白在雌虫的上部、卵巢、卵黄腺部均有转录,且在卵巢转录最高。RNAi抑制Rho相关GTP结合蛋白的表达时发现,虫体卵巢结构异常,出现裂纹状空泡,并且产卵量下降。Rho相关GTP结合蛋白(TNN14903.1)为血吸虫Bantam mi RNA的靶基因,干扰该基因的表达可导致日本血吸虫卵巢结构异常。
- 李旭欣夏天奇李姗Bikash Ranjan Giri刘静宜李舜李雪李慧民杜鹏飞程国锋
- 关键词：血吸虫卵巢
- 三株与HP-PRRSV疫苗株高度同源的高致病性猪繁殖和呼吸综合征病毒的分离鉴定
- 引言 2012年江苏省某未使用过HP-PRRSV疫苗的猪场保育猪群中出现疑似PRRS症状,导致大部分仔猪死亡。从发病猪血清中分离到三株猪繁殖和呼吸综合征病毒,命名为NT1、NT2和NT3,鉴定分析结果显示三株病毒可能来源...
- 姜一峰童武童光志夏天奇周艳君虞凌雪杨莘黄勤锋李丽薇高飞曲泽慧
- 重组猪瘟病毒C株E2蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒的构建及鉴定被引量：9
- 2015年
- 本研究在猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)弱毒株(Hu N4-F112)感染性克隆的基础上,在其基因组ORF1b和ORF2之间插入(classical swine fever,CSF)疫苗毒C株的E2基因,并在E2基因3'端下游插入PRRSV的转录调控序列6(transcription regulatory sequence 6,TRS6),构建成重组全长感染性克隆(p A-C-E2)。用SwaI线性化该质粒,并体外转录后,将RNA转染MARC-145细胞并传代1次,即可拯救出重组病毒vA-C-E2,在至少20代的传代过程中能够保持遗传稳定性。重组病毒与亲本病毒vHu N4-F112在病毒滴度、空斑形态、蛋白表达等方面没有明显差异;多步生长曲线结果显示,该重组病毒与亲本毒具有相似的生长特性。间接免疫荧光(indirect immunofl uorescence,IFA)结果显示,重组病毒不仅能够表达PRRSV N蛋白,也可以表达猪瘟病毒E2蛋白。本研究结果为研制CSF和PRRS新型基因重组疫苗奠定了坚实物质基础。
- 高飞曲泽慧姜一峰李丽薇虞凌雪周艳君杨莘夏天奇郑海红童光志
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪瘟病毒重组病毒E2蛋白
- PRRSV强弱毒体外诱导IL-10产生差异的分子基础研究被引量：2
- 2017年
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染后能够引发机体产生免疫抑制,IL-10在病毒介导的免疫抑制中起重要作用。PRRSV HuN4株感染PAM细胞后能够诱导IL-10高水平表达,而其传代致弱毒株HuN4-F112感染PAM细胞后IL-10表达水平很低。本研究以PRRSV HuN4株及HuN4-F112株为研究对象,对其感染PAM细胞后IL-10上游关键因子表达差异进行研究,揭示诱导IL-10产生差异的分子基础。结果显示,PRRSV强弱毒感染PAM细胞后,强毒HuN4株诱导TLR2与TLR4转录水平显著高于弱毒HuN4-F112株,TLR3、TLR7和TLR9转录水平则无显著差异;强毒HuN4株感染PAM细胞后,其p38磷酸化水平显著高于弱毒HuN4-F112株,而ERK磷酸化水平差异不具备显著统计学意义。结果提示,PRRSV强弱毒株感染PAM细胞诱导IL-10表达水平的差异推测是由于强弱毒诱导p38 MAPK磷酸化水平差异造成的。
- 夏天奇姜一峰虞凌雪周艳君杨莘高飞李丽薇曲泽慧童光志
- 关键词：PRRSVIL-10P38MAPK
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒基因工程双标记疫苗rHN4-△25+NP49株最小免疫剂量的测定
- 2014年
- 将35头40日龄猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)、猪圆环病毒(Porcine circovirus type 2,PCV2)抗原及抗体均为阴性的健康仔猪,随机分成7组,每组5头,命名为XJ1~XJ7组。XJ1~XJ6组分别免疫PRRSV基因工程双标记疫苗rHN4-△25+NP49株,接种剂量分别为102TCID50/头、103TCID50/头、104TCID50/头、105TCID50/头、106TCID50/头和107TCID50/头,XJ7组为对照组,按1mL/头剂量接种DMEM。各试验组在免疫后28 d,用3×104.0TCID50/头剂量感染HP-PRRSV HuN4第5代强毒,疫苗免疫和攻毒后观察和检测各组试验猪的免疫效果。结果表明:攻毒前XJ2-XJ6组PRRSV ELISA抗体在免疫后14 d全部转为阳性,XJ1组在免疫后21 d转为阳性,但维持在较低水平;XJ2-XJ6组针对标记基因NP49的特异性抗体在免疫后28 d转阳性。攻毒后对照组全部发病,且死亡2头,XJ1有4头发病,XJ2-XJ6组无发病和死亡,本研究结果表明PRRSV基因工程双标记疫苗rHN4-△25+NP49株对仔猪提供免疫保护的最小免疫剂量为103TCID50/头。
- 姜一峰周艳君童武虞凌雪程群杨莘夏天奇李丽薇高飞童光志
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒最小免疫剂量
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒诱导IL-10产生的分子基础研究
- 猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的，以仔猪呼吸困难和母猪繁殖障碍为主要特征的一种传染病。2006年我国爆发了由HP-PRRSV引起的高致病性猪繁殖与呼吸综合征，给养猪业造成巨大经济损失。HP-PRRSV与...
- 夏天奇
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征白细胞介素-10分子机制免疫抑制
- 文献传递
- 日本血吸虫p38MAPK的克隆、表达和功能初步分析
- 2021年
- 丝裂原相关蛋白激酶(MAPK)信号通路在血吸虫的发育和产卵过程中发挥重要的调节作用,已有研究表明p38MAPK可调控曼氏血吸虫的发育,并参与雌性成熟过程。为此,本研究对日本血吸虫p38MAPK(Sjp38MAPK)进行了克隆、表达,并对其功能进行了初步分析。结果表明:Sjp38MAPK长度1038 bp,预测分子量39.58 kDa;生物信息学分析表明Sjp38MAPK与曼氏血吸虫和埃及血吸虫的同源性分别为93%和90%;qRT-PCR分析表明Sjp38MAPK在成虫中的表达量较高于虫卵、尾蚴和童虫时期;进一步利用siRNA抑制Sjp38MAPK表达,发现虫体卵壳蛋白的合成,运动以及细胞活性等方面受到影响。总之,本研究初步表明了Sjp38MAPK在日本血吸虫的发育和产卵过程中可能同样发挥重要的调节作用,值得深入研究。
- 李慧民李雪Bikash R.Giri刘军涛夏天奇王立辉杜鹏飞陈永军Hanif UllahAbdul Qadeer程国锋
- 关键词：日本血吸虫P38MAPK蛋白激酶发育产卵
- 日本血吸虫重组蛋白TMEM66P的表达和多克隆抗体的制备
- 2022年
- 血吸虫病是由血吸虫尾蚴感染引起的一种人畜共患寄生虫病,对宿主造成严重病理性损害,是WHO确定的六大重点热带病之一。血吸虫体被直接与宿主的免疫系统相接触,是宿主与虫体信息交流的重要界面,位于虫体体被跨膜蛋白的功能研究尤显重要。本文对日本血吸虫膜蛋白(TEME66P)的cDNA进行表达和抗血清的制备。首先,利用生物信息学分析TMEM66P跨膜结构,并构建系统进化树,构建重组原核表达质粒并表达纯化重组蛋白,制备抗血清,通过Western blot对抗血清的特异性进行检测。研究表明TMEM66P存在跨膜区,其氨基酸序列与曼氏血吸虫同源性为67.79%,抗血清能够识别出全虫蛋白中TMEM66P,具有良好的特异性。本研究为进一步探索TMEM66P在日本血吸虫中的功能奠定了初步基础。
- 李雪李旭欣GiRi B R刘静宜刘军涛夏天奇杜鹏飞李慧民李舜程国锋
- 关键词：日本血吸虫膜蛋白抗血清
- 日本血吸虫布尼亚病毒样相关RNA片段的鉴定及S1 RNA功能初探
- 血吸虫病是一种由血吸虫引起的急性和慢性破坏性寄生虫病。血吸虫病的主要病理损害为沉积在终末宿主肝脏中的虫卵所引起的机体免疫应答并导致一些患者发生肝肉芽肿和纤维化。前人研究表明寄生虫中存在病毒样颗粒或相关RNA片段，在利什曼...
- 夏天奇
- 关键词：日本血吸虫宏基因组学血吸虫病
