周朝东
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 供职机构：天津药品检验所更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 高效液相色谱法测定眼氨肽滴眼液中醋酸氯己定的含量被引量：3
- 2013年
- 目的:建立高效液相色谱法测定眼氨肽滴眼液中防腐剂醋酸氯己定的含量。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为welch materials AQ-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.02 mol/L磷酸二氢钾(磷酸调节pH至2.5)-乙腈(70∶30),流速为1.0 ml/min,柱温为40℃,检测波长为254 nm。结果:醋酸氯己定在0.05～0.15 mg/ml范围内,浓度与其峰面积呈良好线性关系(r=0.9999,n=5),平均回收率为99.84%,RSD=0.42%(n=9)。结论:所用方法简单、快速、专属性强、重现性好,可用于眼氨肽滴眼液中防腐剂醋酸氯己定的测定。
- 周朝东黄哲甦
- 关键词：高效液相色谱法醋酸氯己定
- 荧光定量PCR法测定重组人干扰素α2b原液中宿主DNA的残留被引量：4
- 2016年
- 目的建立重组人干扰素α2b原液中宿主DNA残留量测定的方法并进行验证,用于对该产品的质量控制。方法通过wako DNA提取试剂盒提取干扰素原液中的宿主残留DNA,再利用SYBRGreen染料法对样品和标准DNA进行定量PCR测定,根据标准曲线对样品中的DNA残留量分析。对建立的方法进行引物特异性以及结果准确性和精密性的验证,同时对企业提供的3批干扰素原液中的残留DNA测定。结果该方法检测假单胞菌基因组DNA的最低准确定量浓度可达12 fg/μL,DNA含量在12 fg/μL^120 ng/μL范围内线性良好,标准曲线的相关系数r=0.998;wako DNA提取试剂盒提取不同量的加标样品回收率均在50%~200%范围内;该方法检测3批干扰素原液的DNA残留量均低于标准限度,符合《中国药典》三部2010年版和2015年版中关于假单胞菌产重组人干扰素α2b原液中宿主DNA残留量的要求。结论 wako DNA提取试剂盒能解决干扰素原液中样品前处理的技术难点,与定量PCR法结合能够简便、快速、准确地对干扰素原液中残留的DNA定量测定。
- 苏喆周朝东黄哲甦尉然
- 关键词：荧光定量PCR假单胞菌干扰素
- 荧光定量PCR法测定重组人/门冬胰岛素原料中宿主DNA的残留量被引量：1
- 2017年
- 目的:利用wako DNA提取试剂盒结合荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术,建立重组人/门冬胰岛素原料中宿主DNA残留量测定的方法并进行验证,用于对该产品进行质量控制。方法:通过wako DNA提取试剂盒提取重组人/门冬胰岛素原料中的宿主残留DNA,再利用SYBRGreen染料法对样品和标准DNA进行定量PCR测定,根据标准曲线对样品中的DNA残留量进行分析。对建立的方法进行引物特异性以及结果准确性和精密性验证,同时对本室留样的3批重组人胰岛素原料和3批重组门冬胰岛素原料中的残留DNA进行测定。结果:该方法检测酿酒酵母菌基因组DNA的最低准确定量质量浓度可达0.137 8 ng·mL^(-1),DNA质量浓度在0.137 8~137 800 ng·mL^(-1)范围内,其质量浓度的对数值与Ct值呈良好线性关系,标准曲线的相关系数(r)为0.994;DNA提取试剂盒提取不同量的加标样品回收率均在50%~200%范围内;该方法检测3批重组人胰岛素原料和3批重组门冬胰岛素原料中的DNA残留量均小于10 ng·剂量^(-1),符合进口药品注册标准中关于重组人/门冬胰岛素原料中宿主DNA残留量的要求。结论:wako DNA提取试剂盒能解决重组人/门冬胰岛素原料中样品前处理的技术难点,与定量PCR法结合能够简便、快速、准确地对重组人/门冬胰岛素原料中残留的DNA进行定量测定。
- 周朝东苏喆黄哲甦
- 关键词：荧光定量PCR酿酒酵母
- 肝素样品前处理方法比较及荧光定量PCR法鉴定肝素原料种属来源被引量：2
- 2016年
- 目的比较肝素原料的3种前处理方法,即磁珠吸附法、琼脂糖凝胶回收法和肝素酶降解法的优劣,并对肝素原料的种属来源进行鉴别。方法分别用磁珠提取试剂盒、琼脂糖凝胶回收试剂盒和肝素酶对肝素原料进行前处理,用商业化的猪、牛、羊种属鉴别试剂盒进行检测。采用荧光定量PCR法对3批肝素原料进行种属来源的鉴别,同时对猪源肝素中掺入的不同比例羊源肝素进行检出限的检测。结果 3种不同的前处理方法以肝素酶降解法最快捷、最省时和最经济;种属来源鉴别结果准确。荧光定量PCR法检测猪源肝素中掺入羊源肝素的检出限是0.01%。结论肝素酶降解法能简捷、快速、经济的解决肝素原料中样品前处理的技术难点,结合商业化的猪、牛、羊鉴别试剂盒与荧光定量PCR仪能够简便、快速、准确的对肝素原料种属来源进行鉴别。
- 周朝东白海娇黄哲甦
- 关键词：琼脂糖凝胶电泳肝素酶荧光定量PCR
