周娟 作品数:17 被引量:145 H指数:8 供职机构: 上海中医药大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市教育委员会重点学科基金 上海市高等学校科学技术发展基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
丹参酚酸b盐及骨形成蛋白-7抑制小管上皮-肌纤维母细胞转分化的实验研究 目的:成熟的肾小管上皮能够经历上皮-肌纤维母细胞转分化,这种细胞表型的变化成为肾间质纤维化的病理基础。本研究通过体内、体外实验观察,从转分化角度研究中药单体丹参酚酸b盐对肾脏纤维化的防治作用,为促进丹参酚酸b盐的临床应用... 周娟关键词:丹参酚酸B盐 骨形成蛋白-7 肾纤维化 文献传递 网络资源链接 中药抗纤灵抗肾纤维化信号传递机制的研究 张悦 刘煜敏 刘克剑 李靖 周娟 陆海英 陆敏 何立群 韩志芬 庞惠芳 肾纤维化是肾脏疾病进展到终末期肾衰的共同病理基础。西医缺乏有效的治疗方法,深入探讨中医药抗纤维化作用的分子机制,将有助于阐明中医药抗纤维化的现代科学理论基础。抗纤灵是曙光医院临床长期使用的经验方。本文采用体内和体外实验相...关键词:关键词:肾纤维化 抗纤灵 中药 信号传递 晚期糖基化终产物在糖尿病肾病中的病理作用 被引量:9 2009年 高糖环境下体内积聚的晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)是糖尿病慢性并发症的主要致病因素。AGEs可通过对蛋白的修饰直接作用于机体或通过受体介导的作用影响机体。本文就AGEs的来源、病理生理作用,尤其是在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)发生发展中的作用及治疗干预作一综述。 周娟 张悦 陆海英 刘煜敏关键词:晚期糖基化终产物 糖尿病肾病 羰基化合物 丹参酚酸B盐对TGF-β1诱导的HK-2上皮-间充质转分化的影响 被引量:8 2010年 目的:研究丹参酚酸B盐(salvianolic-acid B,SA-B)对转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞HK2(human human renal proximal tubular cells)转分化的影响。方法:复苏并传代培养HK2细胞,应用不同剂量的TGF-β1或同一剂量作用不同时间诱导HK2细胞发生上皮-间充质转分化(epithelia-mesenchymal transition,EMT),同时给予骨形成蛋白7(BMP-7,阳性对照)(50μg.L-1)和SA-B(1×10-5mol.L-1)干预观察二者对EMT的影响。应用Western印迹法和免疫荧光法检测HK2细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin),α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达。结果:BMP-7显著抑制了TGF-β1诱导的E-cadherin下调(P<0.05)和α-SMA上调(P<0.05);而SA-B显著抑制TGF-β1诱导的α-SMA表达增加(P<0.05),未见其抑制TGF-β1诱导的E-钙黏蛋白下调。结论:SA-B和BMP-7能够抑制TGF-β1诱导的HK2上皮-间充质转分化,其共同的作用是抑制了TGF-β1诱导的α-SMA上调,而SA-B对E-钙黏蛋白的调控作用有待进一步的研究。 周娟 王飞 陆海英 张悦关键词:上皮-间充质转分化 丹参酚酸B盐 骨形成蛋白7 人肾小管上皮细胞 丹参酚酸B对实验性肾间质纤维化大鼠的保护作用及其机制 被引量:14 2010年 目的:探讨丹参酚酸B(Salvianolic-acid B,SA-B)对单侧输尿管结扎(Unilateral Ureteral Obstruction,UUO)所致的肾纤维化大鼠的作用和机制。方法:雄性SD大鼠18只,随机分成3组,每组6只。单侧输尿管结扎建立肾间质纤维化动物模型。SA-B治疗2 w后,光镜、电镜下观察肾组织病理改变;Western blot和免疫组化法检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和E-钙依赖性黏附素(E-cadherin,E-cad)的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠光镜下观察肾间质中大量细胞浸润,部分小管扩张,同时部分小管萎缩;电镜下观察肾小管上皮细胞结构松散,混浊,肾间质显著增宽,间质细胞增多;α-SMA蛋白表达显著增加(P<0.01),E-cad蛋白表达显著下降(P<0.01)。SA-B干预后,上述病理改变显著轻于模型组,α-SMA蛋白表达显著下降(P<0.05),E-cad蛋白表达略有上升(P>0.05)。结论:SA-B通过抑制α-SMA蛋白表达,维持上皮细胞的表型,延缓肾纤维化的发生。 陆海英 周娟 陆敏 刘煜敏 王飞 林敏 张悦关键词:丹参酚酸B 肾间质纤维化 Α-平滑肌肌动蛋白 丹参酚酸B盐对大鼠肾纤维化的影响 被引量:7 2009年 目的:观察丹参酚酸B盐(SA-B)对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术组(12只)、模型组(12只)和治疗组(12只)。模型组大鼠行单侧输尿管结扎(UUO)建立肾小管间质纤维化模型。治疗组在UUO基础上给予SA-B水溶液(12.5 mg.kg-1)灌胃,各组于造模后第14,21天分2批处死。用苏木精-伊红(HE)染色观察肾组织病理学改变,用免疫组织化学方法观察α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测肾组织中角蛋白19 mRNA的表达。结果:SA-B能够显著改善梗阻侧肾脏的病理改变,显著减少肾组织α-SMA的表达,增加角蛋白的表达。结论:SA-B可明显改善UUO所致的大鼠肾间质纤维化,其作用可能是通过阻止小管上皮-成肌纤维细胞转分化和抑制成肌纤维细胞的增生和活化而实现的。 周娟 张悦 陆海英 刘煜敏 林敏关键词:丹参酚酸B盐 肾间质纤维化 丹参酚酸B对肾纤维化大鼠肾组织MMP-2表达的影响 被引量:34 2009年 目的:探讨丹参酚酸B(SA-B)对肾间质纤维化大鼠的作用及机制。方法:36只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和SA-B治疗组。单侧输尿管结扎术(UUO)建立肾间质纤维化模型。造模的同时SA-B治疗组灌喂SA-B水溶液(12.5mg/kg)。第14、21天处死大鼠,观察肾功能的变化,HE和PASM染色光镜下观察肾组织的病理变化,用盐酸水解法检测肾组织中羟脯氨酸的含量,Westernblot法检测肾组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白抑制剂-2(TIMP-2)蛋白表达,明胶酶谱观察MMP-2活性。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血肌酐、尿素氮和羟脯氨酸的含量均有明显上升;肾小球正常,肾间质增宽,间质内有大量的炎性细胞和间质细胞出现,肾小管扩张较明显,后期可见到部分肾小管萎缩,肾小管的基底膜明显增厚;肾组织的MMP-2蛋白、活性和TIMP-2蛋白水平均高于同期假手术组。SA-B干预后,血肌酐、尿素氮和羟脯氨酸的含量明显降低;上述病理改变明显轻于模型组,肾组织的MMP-2蛋白、活性水平和TIMP-2蛋白表达明显减少。结论:SA-B可抑制肾组织MMP-2和TIMP-2的蛋白表达,从而改善UUO大鼠的肾间质纤维化和肾功能。 陆海英 张悦 刘煜敏 陆敏 周娟 刘克剑 李靖关键词:丹参酚酸B 肾间质纤维化 基质金属蛋白酶-2 α-平滑肌肌动蛋白和E-钙依赖性黏附素在肾间质纤维化大鼠肾组织中的表达 被引量:9 2009年 目的:检测单侧输尿管梗阻(UUO)所致大鼠肾间质纤维化模型肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙依赖性黏附素(E-Cad)表达的动态变化,并观察比较在肾小管间质纤维化不同阶段的病理变化。方法:采用54只雄性健康SD大鼠随机分为正常组、假手术组和模型组,模型组行左侧输尿管结扎术,正常组21 d处死6只动物,假手术组和UUO组分别于术后3、7、14、21 d各处死6只动物,共48只,取肾组织常规行HE染色、六胺银染色光镜下观察,取肾皮质电镜下观察病变情况。采用蛋白印迹法检测肾组织α-SMA、E-Cad蛋白表达。结果:(1)随着造模时间的延长,肾小管间质纤维化逐渐加重,UUO术后21 d的肾小管扩张与萎缩均明显,肾间质有大量的纤维化组织出现。(2)与假手术组相比,模型组肾组织α-SMA于术后第3 d即表达增加,并随梗阻时间延长表达逐渐增加,至UUO术后21 d达高峰。21 d模型组与假手术组比较,有显著差异(P<0.01)。(3)而E-Cad蛋白于术后第3 d即表达降低,并随梗阻时间延长逐渐降低。结论:在UUO阻塞性肾病中,α-SMA蛋白表达呈时间依赖性上调,而E-Cad蛋白表达呈时间依赖性下调,提示在阻塞性肾病中,肌纤维母细胞的活化是一个动态的过程,可能与肾小管上皮细胞转分化有关。 陆海英 张悦 刘煜敏 周娟 陆敏 刘克剑 李靖 林敏关键词:Α-平滑肌肌动蛋白 钙粘着糖蛋白类 输尿管梗阻 肾纤维化 庆大霉素诱导大鼠肾小管间质纤维化模型的建立 被引量:11 2008年 目的探讨庆大霉素肾毒性损伤能否诱导一种新的肾间质纤维化模型。方法31只健康雄性Wister大鼠随机分为4组:正常组Ⅰ、模型组Ⅰ(造模后5 d取材)组;正常组Ⅱ、模型组Ⅱ(造模后30 d取材)组。给予庆大霉素造成肾毒性损伤,分别于造模后5 d和造模后30 d处死,光镜和电镜下动态观察肾组织形态学改变,计算肾系数、检测血肌酐、血尿素氮、24小时尿蛋白总量,氧化应激相关指标SOD、MDA、NOS的变化,检测NF-κB蛋白表达水平。结果(1)模型组I大鼠:光镜下可见肾小管上皮细胞以变性为主,部分坏死;有较多的蛋白管型和少量的细胞管型、颗粒管型。电镜下可见肾小管上皮细胞胞浆中有大量脂滴存在,细胞的线粒体肿胀、内质网明显扩张。肾系数常、血肌酐、血尿素氮2、4 h尿蛋白总量,以及MDA、NOS明显高于正常组I(P<0.01),模型组I NF-κB蛋白表达水平明显高于正常组I(P<0.01);SOD明显低于正常组I(P<0.01)。(2)模型组Ⅱ大鼠:肾小管上皮细胞以坏死为主,部分上皮细胞变性,可见肾小管萎缩和扩张,有较多的细胞管型和颗粒管型,间质中有成纤维细胞增生和炎症细胞浸润,间质明显增宽。电镜下可见模型组Ⅱ大鼠肾小管上皮细胞核固缩、碎裂现象;间质中有较多的胶原纤维,成纤维细胞增多。模型组Ⅱ大鼠血肌酐、血尿素氮、24 h尿蛋白总量明显高于正常组Ⅱ(P<0.01)。结论氧化应激引起的脂质过氧化损伤参与了庆大霉素所致的肾小管上皮细胞变性坏死,后者导致了慢性炎症和修复的反复进行,最终导致肾间质纤维化。 王飞 陆海英 张悦 郝艳鹏 周娟 刘煜敏 陆敏关键词:急性肾损伤 间质纤维化 氧化应激 化瘀导滞汤防治庆大霉素所致大鼠肾损伤的实验研究 被引量:1 2009年 目的:探讨化瘀导滞汤防治庆大霉素所致肾毒性损伤的作用和部分机理。方法:18只健康雄性W ister大鼠随机分为3组,每组6只:正常组、模型组、治疗组。给予庆大霉素造成肾毒性损伤,于造模后5天取材,光镜和电镜下观察肾组织形态学改变,计算肾系数、检测血肌酐、血尿素氮、24h尿蛋白总量,氧化应激相关指标SOD、MDA、NOS的变化,检测NF-кB蛋白表达水平。结果:模型组大鼠与正常组比较:光镜下可见肾小管上皮细胞以变性为主,部分坏死;有较多的蛋白管型和少量的细胞管型、颗粒管型。电镜下可见肾小管上皮细胞胞浆中有大量脂滴存在,细胞的线粒体肿胀、内质网明显扩张,治疗组病变轻于模型组。模型组肾系数、血肌酐、血尿素氮、24h尿蛋白总量、NF-кB蛋白表达水平以及MDA、NOS明显高于正常组,SOD明显低于正常组(P<0.01),治疗组除24h尿蛋白总量外,其余指标与模型组相比有明显改善(P<0.01)。结论:化瘀导滞汤有良好的防治庆大霉素所致肾毒性损伤的作用,并提示与早期抗脂质过氧化损伤有关。 王飞 陆海英 张悦 郝艳鹏 周娟 刘煜敏 陆敏关键词:肾损伤 中药疗法 氧化应激