吴琛
- 作品数：36 被引量：105H指数：5
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- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- SLC38A3抗体的制备及细胞内定位
- 2012年
- 从人胎肝cDNA文库中钓取得到SLC38A3全长cDNA序列.利用生物信息学方法对SLC38A3蛋白序列进行分析,根据亲水性、抗原性、柔韧性及表面性等指标选择一段多肽序列作为抗原用于抗体制备.将该片段克隆到pET-DsbA融合蛋白表达载体上,在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下产生SLC38A3抗原肽.纯化目的蛋白并制备兔抗SLC38A3蛋白的多克隆抗体.利用Western blot鉴定抗体特异性,并初步分析该蛋白在人肺癌细胞A549内的定位.结果显示,成功构建了SLC38A3片段的原核表达载体,在大肠杆菌中实现可溶性表达,制备了特异性较高的人SLC38A3蛋白多克隆抗体,并证实该蛋白表达于细胞质内.为进一步研究SLC38A3的生物学功能奠定了基础.
- 吴琛郭亚伟王媛媛田焕娜刘晓波
- 关键词：多克隆抗体基因定位
- 应用蛋白质组学筛选宫颈癌患者尿液中的肿瘤标志物被引量：4
- 2016年
- 通过比较健康女性和宫颈癌患者的尿蛋白质组,发现并分析差异表达蛋白,从中筛选潜在的宫颈癌的标志物。研究对象由43名宫颈癌患者(CC)和47名健康女性(HW)组成。用超速离心法沉淀尿蛋白,再用一维凝胶电泳(SDS-PAGE)与液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS)鉴定尿液中的蛋白质,蛋白质定量采用无标定量。比较患者尿蛋白质组、健康对照的尿蛋白质组和宫颈癌组织蛋白质组,有1910个蛋白质是患者和健康对照共有的尿蛋白,这其中有746个蛋白质也存在于宫颈癌组织蛋白质组。在这746个蛋白质中找到84个上调蛋白和82下调蛋白。通过生物信息学分析发现牛皮癣素(S100A7)和癌胚抗原相关细胞黏附分子8(CEACAM8)是宫颈癌尿液样本独有蛋白质。在验证组的70例样本中,双盲法测试S100A7、CEACAM8以及两者联合诊断宫颈癌的敏感性能达到73%、87%、93%。结果提示,宫颈癌患者的尿蛋白质组与健康女性的尿蛋白质组不同,并且S100A7和CEACAM8可以作为宫颈癌潜在的肿瘤标志物。
- 安龙飞金龙孙凤亮李凯闫成智秦钧张普民吴琛陈欢
- 关键词：宫颈癌生物标志物
- OGA抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用
- 本发明提供了一种OGA抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用，所述抗肿瘤药物为治疗携带DNA损伤修复因子缺陷的肿瘤细胞的药物。所述OGA抑制剂为Thiamet G(TMG)和/或(Z)‑PUGNAC。所述的携带DNA损伤修复因子...
- 吴琛刘秀华陈华闫珍珍杨肖云崔亚琦谢蓉
- 成熟中国对虾(Penaeus chinensis)卵巢中卵黄蛋白的纯化被引量：25
- 2001年
- 用层析 (SephadexG - 15 0 ,DEAE -Cellulose- 5 2 )和电泳洗脱 2种方法分别从成熟中国对虾卵巢中纯化得到了一种卵黄蛋白 ,聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)检测表明 ,卵黄蛋白出现在SephadexG - 15 0的第 1个洗脱峰和DEAE -Cellulose - 5 2的 0 .4mol/L和 0 .5mol/LNaCl洗脱峰处 .比较了这 2种方法的优缺点 :层析法可用于蛋白的大量制备 ,电泳洗脱能够得到高纯度的蛋白 .
- 柳峰松武金霞谢松房宝玲黄增瑞吴琛
- 关键词：中国对虾卵黄蛋白纯化层析
- IGFBP-3在真核细胞中的分泌表达及功能分析被引量：3
- 2008年
- 将人胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)的cDNA片段亚克隆入pSectagA载体,构建真核分泌型表达载体pSectag-IGFBP3。采用脂质体转染的方法将真核表达载体转染人肾癌786-O细胞,转染48 h后用免疫印迹法检测IGFBP-3的表达状况;同时以Annexin V-EGFP/PI染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率,观察分泌表达的IGFBP-3对宿主细胞的促凋亡作用。转染48h后,经Western blotting检测,在细胞培养上清中有分泌表达的IGFBP-3蛋白。流式细胞技术检测结果表明,表达产物可直接作用于宿主细胞,发挥促肿瘤细胞凋亡的作用。由此表明所构建的重组表达质粒pSectag-IGFBP3能在真核细胞水平正常表达并发挥生物学功能,为进一步探索IGFBP-3的作用机制奠定了基础。
- 吴琛单耀军邹民吉王嘉玺徐东刚
- 关键词：胰岛素样生长因子结合蛋白3诱导凋亡
- 枯草芽孢益生菌对鸡免疫功能影响的研究
- 刘秀华吴琛郝延刚朱宝成杨曦倪志华王亚光张伟涛蔡正霍萍丽孙杰王成宁学师焦玉芳
- 2019年7月，农业农村部发布了第194号公告，自2020年7月1日起，促生长类药物饲料添加剂全面退出饲料添加剂市场。饲料端“禁抗”，养殖端“减抗、限抗”已成为绿色生态健康养殖的必然趋势。针对“禁抗、限抗”之后的家禽健康...
- 关键词：
- IGFBP-3对肿瘤细胞凋亡及细胞周期的影响及其分子机制研究
- 胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBPs)系能与IGF-I特异性结合的一个蛋白家族。迄今为止已发现6种IGFBPs(IGFBPl-6),其中IGFBP-3在血清中含量最为丰富。IGFBP-3可通过IGt-I依赖及非IGF-...
- 刘晓波田焕娜王媛媛吴琛
- 关键词：IGFBP-3细胞凋亡细胞周期阻滞
- 文献传递
- 中国明对虾抗脂多糖因子基因的体外表达及应用
- 柳峰松谢松李继刚吴琛董赛红杨丽坤唐婷王晓菲
- 抗脂多糖因子(ALF)是对虾体内一种重要抗菌蛋白，在对虾收到细菌侵染时发挥重要防御功能。由于ALF对革兰氏阴性菌具有非常强的杀菌作用，利用常规原核表达系统难以得到表达产物。由于二硫键环在ALF分子行使杀菌功能中起到重要作...
- 关键词：
- 关键词：对虾水产动物养殖饵料添加剂
- GALNT14对人乳腺癌MCF-7细胞迁移的影响被引量：2
- 2012年
- 构建真核表达载体pcDNA 3.1-Flag-T14,重组质粒经酶切分析及测序鉴定后,利用脂质体将重组质粒转染人乳腺癌细胞系MCF-7细胞,经G418筛选并建立稳定转染GALNT14细胞株。应用半定量RT-PCR、Western blot检测稳定细胞株GALNT14 mRNA及蛋白表达水平,细胞划痕修复及穿膜试验检测GALNT14基因对MCF-7迁移能力的影响,同时RT-PCR检测GALNT14对MMP-2,MMP-9,TGF-β1及VEGF等肿瘤浸润转移相关因子表达的影响。结果显示成功构建了真核重组表达载体pcDNA 3.1-Flag-T14,经RT-PCR和Western blot检测显示成功获得了稳定表达GALNT14的MCF-7细胞株;GALNT14能够提高MCF-7细胞株的迁移能力,且能增加侵袭转移相关因子MMP-2,MMP-9,TGF-β1及VEGF的表达。结论:GALNT14可明显促进MCF-7细胞的迁移,可能在肿瘤侵袭转移中起重要作用。
- 吴琛田焕娜王媛媛刘芳铭张晓康李秦剑谢园园
- 关键词：乳腺癌稳定转染细胞迁移
- 新型低抗原性葡激酶的构建、表达及功能分析被引量：4
- 2007年
- 目的：降低野生型葡激酶（wild-type staphylokinase，wt-SAK）的抗原性，获得新型溶栓剂。方法：利用生物信息学分析野生型SAK抗原表位，将其分子内主要的抗原决定簇编码序列定点突变为丙氨酸密码子，将其N端抗原性较强的前10位氨基酸缺失。经过筛选从系列突变体中得到突变体NSAKV。结果：生物信息学分析突变后分子抗原性，结果表明其主要抗原表位消失。该突变体（NSAKV）与原核表达载体pET17b重组后，转化大肠杆菌BL21，经IPTG诱导获得高效表达，NSAKV占全茵总蛋白的40％-50％，以可溶性形式存在。经进一步纯化，纯度达98％以上，分子量与理论值相符。比活性2．616×10^4 AU／mg。经ELISA法和溶圈法测定，NSAKV与wt-SAK制备的兔抗wt-SAK抗血清的免疫反应性显著降低，经抗血清温育后wt-SAK活性下降程度远高于NSAKV。结论：突变体（NSAKV）保持了野生型SAK的活性，同时抗原性下降。
- 王旻王圆圆邹民吉徐涛刘深吴琛王嘉玺徐东刚
- 关键词：葡激酶抗原性突变纯化
