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卢景良: 作品数：105 被引量：869H指数：19; 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>; 发文基金：国家攀登计划国家自然科学基金国家科技攻关计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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旋毛虫肌幼虫ES抗原特异性蛋白2个结构基因的分子克隆及其高效表达被引量：25: 1997年; 旋毛虫肌幼虫排泄－分泌（ＥＳ）抗原来源于体外培养的旋毛虫肌幼虫的排泄－分泌物。为研制具有ＥＳ抗原功能的旋毛虫基因重组抗原，首先用ＡＧＰＣ法提取旋毛虫肌幼虫总ＲＮＡ并进行变性琼脂糖凝胶电泳分析，发现它缺少真核生物所具有的２８ＳｒＲＮＡ。根据编码４５０００和４９０００蛋白的基因结构，设计并合成２对ＰＣＲ引物，用ＲＴ－ＰＣＲ方法分别扩增出了２个目的基因（ＴＳＰＧ和ＴＳＰＧⅡ）。序列分析发现，ＴＳＰＧ在第４５８到５０５位之间的核苷酸编码框架与结构基因Ｐ４５的不同，此外，还有多处出现与Ｐ４５不同的碱基。在ＴＳＰＧⅡ核苷酸序列中只有１个碱基与Ｐ４９不同。根据可识别的糖基化位点判定，ＴＳＰＧ和ＴＳＰＧⅡ各含有１个Ｎ－型连接的糖基化位点。将构建的３个重组质粒转化大肠杆菌，通过温度诱导培养，分别在大肠杆菌中表达出３７０００、４６０００和３４０００的重组蛋白，三者的表达水平分别为２２％、１０％和８％；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析和ＥＬＩＳＡ检测表明，它们均可被猪旋毛虫病阳性血清和单克隆抗体识别，但特异性有所不同。将ＴＳＰＧⅡ克隆至Ｅ．ｃｏｌｉ－Ｙｅａｓｔ穿梭载体ｐＨＩＬ－Ｓ１上，经内切酶消化和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交鉴定后，?; 阎玉河童光志卢景良; 关键词：旋毛虫基因克隆

马传染性贫血病病毒核心蛋白基因的克隆和表达被引量：1: 1999年; 根据美国马传染性贫血病病毒（EIAV）Wyoming株基因序列，设计扩增EIAVgag和p26基因的引物，用PCR法能忠实的分别扩增出全长gag和p26基因。经用杆状病毒表达系统对所获gag和p26基因进行克隆和重组，获得了高效稳定表达Gag和p26蛋白的重组杆状病毒（rBVs）。含有gag和p26基因的重组杆状病毒感染昆虫Sf21细胞，经无血清昆虫细胞培养基增殖和纯化，每升培养物能获得2mgCag或12mgp26蛋白。; 孔宪刚孙荣芳刘永刚张宝山刘胜旺卢景良; 关键词：传染性贫血病病毒重组杆状病毒核心蛋白

马传染性贫血病毒弱毒株感染驴胎皮肤细胞(FDD)的前病毒DNA整合动态被引量：6: 1997年; 马传染性贫血病毒（Ｅｑｕｉｎｅｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓａｎｅｍｉａｖｉｒｕｓ，ＥＩＡＶ）弱毒株，经驴胎皮肤（Ｆｅｔａｌｄｏｎｋｅｙｄｅｒｍａｌ，ＦＤＤ）细胞培养、斑点杂交及ＰＣＲ检测，在感染后２－１０天的细胞染色体中均检出前病毒ＤＮＡ，证明ＥＩＡＶ弱毒株对感染细胞具有整合作用。在感染后第６天，整合的前病毒的量达到高峰，其含量与病毒的致细胞病变作用（ＣＰＥ）相对应。前病毒的存在形式为整合形式，未检出非整合形式的前病毒，在健康的ＦＤＤ细胞中未检出前病毒，说明ＥＩＡＶ属于外源性病毒。ＥＩＡＶ弱毒株基因组两端的ＬＴＲ序列之中各存在一个限制酶ＭｌｕⅠ位点，这与美国强毒株相同，但弱毒株基因组的３端ＭｌｕⅠ位点上游２ｋｂ位置可能存在另一个ＭｌｕⅠ位点。; 王柳于力于力童光志荣骏弓张绍杰童光志卢景良; 关键词：马传染性贫血病毒弱毒株细胞

人工感染新城疫病毒对雏鸡淋巴细胞功能的影响被引量：15: 1998年; 确定了ＭＴＴ法测定鸡脾淋巴细胞转化实验的最佳条件，并用此法检测了人工感染新城疫病毒雏鸡和ＬａＳｏｔａ免疫雏鸡受到强毒攻击时脾淋巴细胞的转化率。实验表明，在两种情况下，雏鸡脾淋巴细胞对ＣｏｎＡ和ＰＨＡ的反应性与对照组比较有显著的差异，提示在新城疫感染和免疫中，淋巴细胞具有一定作用。; 刘胜旺陈洪岩曹殿军卢景良; 关键词：新城疫病毒 MTT法淋巴细胞转化率鸡病

新城疫病毒F48E9株病毒结构蛋白的分析被引量：7: 1997年; 采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、激光扫描技术、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ和糖蛋白染色方法对新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４８Ｅ９株的结构蛋白进行了分析，结果表明，它具有ＮＤＶ的典型结构特征。; 曹殿军刘继红王莉林张莹卢景良; 关键词：新城疫 F48E9 病毒结构蛋白

传染性支气管炎病毒S_1基因DNA免疫质粒的构建及其免疫原性被引量：26: 1998年; 为探讨ＤＮＡ免疫防制传染性支气管炎（ＩＢ）的可能性，以克隆的Ｍａｓｓｃｈｕｓｅｔｅ型类Ｍ４１地方分离ＱＤ株Ｓ１基因为免疫原基因，引入终止密码后插入ＳＶ４０启动子、增强子下游和ＳＶ４０ｐｏｌｙＡ信号上游，构建了Ｓ１基因ＤＮＡ免疫表达质粒ｐＳＶＱＤＳ１。将大量扩增并经聚乙二醇纯化的ｐＳＶＱＤＳ１溶于ＰＢＳ，以３００μｇ／只的剂量肌肉注射免疫小鼠，于４周后采集分离免疫小鼠血清进行鸡胚病毒中和试验。结果表明，ｐＳＶＱＤＳ１能够诱导产生针对传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｍ４１株的中和抗体，具有良好的免疫原性。; 步志高江国托王秀荣康丽娟祁贤陈万芳卢景良; 关键词：传染性支气管炎病毒 S1基因

国外鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展被引量：6: 1995年; 国外鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展江国托，卢景良，康丽娟（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，哈尔滨）鸡传染性支气管炎（ＡｖｉａｎＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓｓｒｏｎｃｈｉｔｉｓ，ＩＢ）是由鸡传染性支气管炎病毒（ＡｖｌａｎＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＢｒｏｎｃｈ...; 江国托卢景良康丽娟; 关键词：传染性支气管炎病毒 IBV 分子生物学

以MTT比色法检测鸡脾淋巴细胞转化效果被引量：68: 1996年; 本研究运用ＭＴＴ比色法以正交试验对鸡脾脏淋巴细胞转化的最佳条件（ｃｏｎＡ量、血清种类和浓度）进行了研究。结果表明，无论血清种类和浓度如何，低剂量ＣｏｎＡ（２．５～１０μｇ／ｍｌ）可以获得较好的转化效果。当ＣｏｎＡ的量确定时，低浓度鸡血清（０．５％～１．２５％）的转化效果优于高浓度（２％～３％）：５％犊牛血清优于任何浓度的鸡血清；无血清培养基优于血清培养基。其最佳组合为无血清ＲＰＭＩ１６４０培养基加ＣｏｎＡ２．５μｇ／ｍｌ。; 李祥瑞金红王秀丽卢景良; 关键词：淋巴细胞转化检测法比色法

新城疫病毒鹌鹑分离株融合蛋白基因的克隆与序列分析被引量：9: 1999年; 本研究以一株从自然发生新城疫病死的鹌鹑中所分离到的新城疫病毒（QNDV／89）为研究对象，用反转录一聚合酶链式反应（RT-PCR）对QNDV／89株的F全基因进行分段扩增、定向克隆到pUC119载体后，采用Sanger’s双脱氧末端终止法测定其核苷酸序列，并推导出相应氨基酸序列。QNDV／89株F基因全长1662bp，单一的开放阅读框编码553个氨基酸的多肽，其裂解位点的氨基酸序列为112R-R-Q-R-R-F117，是NDV强毒株所特有的序列结构，这与其生物学特性及致病性实验结果是相一致的。序列分析结果表明，QNDV／89株与F48E9株的核苷酸同源率高达99.22％，氨基酸的同源率为98.37％;而与弱毒株LaSota的核苷酸同源率为88.93％，氨基酸的同源率为90.42％。本研究首次报道了流行于我国鹌鹑中的新城疫强毒融合蛋白基因序列，并与其它新城疫病毒进行了同源性比较，证明QNDV／89株核苷酸的变异引起了其蛋白质二级结构的部分改变。; 郭鑫曹殿军闵平闫丽辉刘培欣房海卢景良; 关键词：新城疫病毒鹌鹑分离株融合蛋白基因克隆

应用单克隆抗体对马传贫弱毒疫苗接种马血清中相应抗原的检测被引量：1: 1992年; 应用马传贫驴白细胞弱毒株系特异单克隆抗体酶结合物的免疫斑点试验检测证明,自28份马传贫弱毒疫苗免疫马血清中均检出与单抗呈阳性反应的相应抗原,持续期达51个月以上;自19份人工感染传贫马、自然感染传贫马、弱毒疫苗免疫后攻毒马及42盼健康马血清中均未捡出单抗相应抗原。病理学检查表明,弱毒疫苗免疫马无马传贫病理学改变。以弱毒免疫马肝、脾、骨髓材料进行生物学试验表明,弱毒免疫马体内不存在致病性病毒。这为阐明该弱毒疫苗的免疫本质提出一个非常值得今后深入加以探讨的课题。; 孔宪刚刘滨东卢景良; 关键词：马传贫单克隆抗体疫苗抗原

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