刘海莉
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 供职机构：山东大学基础医学院更多>>
- 发文基金：山东省科技发展计划项目山东省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
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- MiR-133b/ERK反馈环路在甲基苯丙胺神经毒性中的作用及机制研究
- 甲基苯丙胺(methamphetamine，METH)是一种苯丙胺类的中枢神经兴奋剂，对动物及人类多个脑区的神经元均具有神经毒性作用。最近的研究表明，METH的神经毒性涉及多种机制，如兴奋性毒性损伤，氧化应激反应，神经细...
- 刘海莉
- 关键词：甲基苯丙胺神经毒性细胞外调节蛋白激酶蛋白调控
- 文献传递
- 甲基苯丙胺对中脑边缘投射多巴胺神经元自发动作电位频率和I_h电流的影响被引量：2
- 2014年
- 目的检测高浓度甲基苯丙胺(MA)对中脑边缘多巴胺神经元自发动作电位频率和超极化激活阳离子电流(Ih)的影响。方法应用立体定位仪将逆行示踪剂注入伏隔核区(NAc),标记投射到该区域的中脑边缘多巴胺神经元,并进行酪氨酸羟化酶(TH)染色鉴定;制备中脑脑片,应用膜片钳技术在全细胞模式下检测MA(10μmol/L)对标记神经元自发动作电位频率及Ih的作用。结果中脑边缘投射多巴胺神经元可被准确示踪标记,呈TH阳性,位于腹侧被盖区(VTA);MA可明显降低其自发动作电位频率(P<0.05),并抑制Ih电流(P<0.05)。结论甲基苯丙胺可抑制中脑边缘多巴胺神经元的自发动作电位频率和Ih电流。
- 岳庆伟朱德晓吴金涛刘海莉张静李贵宝丁兆习孙晋浩
- 关键词：甲基苯丙胺多巴胺神经元
- 6-OHDA损伤神经细胞CXCR4/CXCL12表达变化的实验研究被引量：1
- 2014年
- 目的研究6-OHDA损伤PC12细胞CXCR4/12表达的变化。方法以梯度浓度的6-OHDA处理PC12细胞,光镜观察各组PC12细胞的形态学变化;MTT法检测6-OHDA对PC12细胞的损伤;间接免疫荧光染色法检测6-OHDA不同浓度下PC12细胞CXCR4/CXCL12表达的变化。结果随6-OHDA浓度的增加,PC12细胞的存活率呈梯度降低;光镜下观察发现PC12细胞数减少,轴突变短甚至消失;间接免疫荧光染色则显示CXCL12及其受体CXCR4在神经细胞的表达增加。结论 6-OHDA浓度的增加可导致PC12细胞凋亡,同时伴有CXCL12及其受体CXCR4表达增加。
- 王辉暴丽华李涛李贵宝吴琦朱德晓吴金涛刘海莉张静孙晋浩
- 关键词：6-OHDAPC12细胞形态学变化
- 帕金森病肠功能分析及CXCR4在肠神经系统中的表达被引量：1
- 2014年
- 目的研究帕金森病(PD)大鼠肠功能的改变,探讨趋化因子CXCL12受体CXCR4在肠神经系统中的功能及作用机制。方法将20只SD大鼠随机分为6-OHDA组和对照组。6-OHDA组经6-OHDA脑内定点注射建立PD动物模型,建模4周后收集两组大鼠1 h粪便排出量,计算粪便含水量。利用免疫荧光染色法检测胃肠神经细胞CXCR4表达的变化。结果与对照组相比,6-OHDA组大鼠1 h粪便排出量及含水量明显降低(P<0.01),而且胃肠神经组织中CXCR4阳性细胞数量明显减少,但荧光强度显著增强(P<0.01)。结论 PD大鼠胃肠神经系统中CXCR4表达水平降低与其胃肠功能障碍密切相关。
- 张静暴丽华吴金涛李贵宝刘海莉岳庆伟朱德晓孙东宋守阳丁兆习孙晋浩
- 关键词：帕金森病肠神经系统6-OHDACXCR4
- 细胞外信号调节激酶/miR-133b在甲基苯丙胺致PC12细胞神经毒性的作用及机制被引量：4
- 2014年
- 目的探讨甲基苯丙胺(MA)致神经细胞毒性过程中细胞外信号调节激酶(ERK)和miR-133b的表达变化及调控机制。方法用MA建立PC12神经细胞损伤模型,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞活性及镜下形态观察确定MA最佳损伤浓度;应用流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平;通过Western blotting技术测定总ERK1/2和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)的表达变化;并应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)测定miR-133b的表达变化。为进一步分析ERK/miR133b分子通路的作用关系,经U0126特异阻断ERK通路,检测miR-133b的表达变化。结果给予不同浓度的MA,均可导致PC12细胞损伤,其中800μmol/L MA处理后,大部分胞体变圆,神经突起退缩,神经网络消失。MTT结果显示细胞活性明显下降。进一步的细胞毒性机制分析显示,MA处理后,细胞内ROS水平升高,p-ERK表达增高,miR-133b表达降低;并且给予ERK通路抑制剂U0126(10μmol/L)后,miR-133b表达升高,细胞活性增强,胞内ROS水平降低,镜下细胞损伤改善。结论 MA可通过上调ERK磷酸化抑制miR-133b表达,介导神经元毒性损伤。
- 刘海莉朱德晓吴金涛岳庆伟王辉李泽岩李贵宝刘增训张静孙晋浩
- 关键词：甲基苯丙胺细胞外信号调节激酶神经毒性PC12细胞免疫印迹法实时定量聚合酶链反应
- miR-133b在甲基苯丙胺依赖大鼠脑内表达及对神经元毒性损伤的调控作用被引量：2
- 2017年
- 目的探讨miR-133b在甲基苯丙胺（methamphetamine，MA）依赖大鼠脑内表达情况及其对神经元毒性损伤的调控作用。方法通过腹腔内连续注射MA（10mg／kg），建立条件性位置偏爱（conditionedplacepreference，CPP）大鼠模型，应用实时荧光定量PCR（Real—timePCR，RT—PCR）技术检测模型鼠脑皮层miR-133b的表达变化。体外培养PCI2细胞并给予800μmol／LMA处理，RT—PCR检测miR-133b在培养神经细胞中的表达，并分别转染miR。133b模拟物和抑制物，观察miR-133b干扰后MA对培养神经细胞线粒体膜电位（mitochondfialmembranepotential，MMP）的影响。结果连续14d腹腔内注射MA后，大鼠在伴药箱停留时间[（620．20±44．80）s]明显长于对照组[（341．80±25．12）s，P〈0．01]，表明成功建立了MA依赖鼠模型。RT—PCR检测发现MA模型鼠脑皮层miR-133b表达（0．36±0．05）较对照组（0．99±0．08）明显降低（P〈0．01）。在体外神经元模型中，PCI2细胞经MA处理后，可见大部分神经细胞胞体变圆，神经突起退缩，RT—PCR结果显示miR．133b表达（0．74±0．05）较对照组（1．00±0．02）降低（P〈0．05）。JC-1检测显示MA组[（109．85±7．03）个]MMP较对照组[（36．49±3．89）个]明显下降（P〈0．01），miR-133b模拟物组[（58．97±6．56）个]MMP较模拟物对照组[（135．46±15．04）个]明显增加（P〈0．01），miR-133b抑制物组[（162．84±14．15）个]MMP较抑制物对照组[（139．81±12．26）个]下降（P〈0．05）。结论miR-133b在MA依赖大鼠脑皮层组织和MA损伤体外神经元模型中表达均明显下调，通过调控miR-133b的表达，能够改变MA处理培养神经细胞的MMP损伤，表明miR-133b不仅参与了MA导致的神经损伤，还有望成为-个干预的分子靶点。
- 李涛刘海莉王辉王明非王洪杰刘桂阳张博●-孙晋浩
- 关键词：甲基苯丙胺NMP神经毒性脑皮层
