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刘晨: 作品数：15 被引量：27H指数：4; 供职机构：中山大学附属第三医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>; 相关领域：医药卫生环境科学与工程化学工程更多>>

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MAPK信号通路调控长波紫外线诱导的皮肤成纤维细胞组织蛋白酶K表达被引量：5: 2014年; 目的研究MAPK信号通路调控长波紫外线（UVA）诱导皮肤成纤维细胞组织蛋白酶K（CatK）的表达.方法原代培养的皮肤成纤维细胞取自儿童包皮.Western印迹检测10 J/cm^2 UVA照射前及照射后0.75、1.5、3和6h皮肤成纤维细胞中磷酸化JNK（p-JNK）、JNK、磷酸化P38（p-P38）、P38蛋白的表达.800 nmol/L SP600125（SP）、10 μmol/L SB203580（SB）分别孵育皮肤成纤维细胞,实验分为无UVA照射的对照组、SP组、SB组及10 J/cm^2 UVA照射的对照（UVA）组、UVA-SP组、UVA-SB组.先以Western印迹检测各组UVA照射后1.5 h磷酸化c-Jun （p-c-Jun）和磷酸化MAPKAPK2 （p-MAPKAPK2）表达,再以RT-PCR和Western印迹检测各组照射后48 h CatK mRNA、蛋白的表达.结果皮肤成纤维细胞在UVA照射后0.75、1.5 h,p-JNK表达的灰度值分别为4.77±0.19和4.68土0.09,p-P38分别为2.44±0.13、2.30±0.04,均较照射前（p-JNK为3.2±0.27,p-P38为1.61±0.08）显著升高（均P＜0.05）;而在照射后3、6h的表达与照射前相比差异无统计学意义（P＞0.05）.p-c-Jun在UVA-SP组表达（2.55±0.48）、p-MAPKAPK2在UVA-SB组表达（1.16±0.12）均显著低于UVA组（分别为4.85±0.96和2.46±0.09）,均P＜0.05.UVA-SP组、UVA-SB组CatK mRNA、蛋白的表达分别降为UVA组的38.9％、28.7％和55.7％、49.6％（P＜0.05）,UVA-SP组CatKmRNA、蛋白的表达也均显著低于UVA-SB组（P＜0.05）.结论 JNK和P38信号通路在调控UVA上调的皮肤成纤维细胞CatK表达中起重要作用.; 许庆芳侯巍郑跃刘晨龚子鉴陆春赖维; 关键词：成纤维细胞组织蛋白酶类 MAP激酶信号系统紫外线

四种中药提取物的动物光毒实验被引量：2: 2011年; 目的：对筛选的黄连、黄柏、姜黄素、紫草素四种中药提取物进行豚鼠皮肤光毒性试验,预测这几种物质在UVA波长范围是否有潜在的皮肤光毒性。方法：动物选择普通级别白化豚鼠30只,光源规格为PHILIPS公司生产TL60W/10R,UVA波长320~400 nm,波长峰值365 nm。UVB〈0.1 J/cm2,按照07年卫生部化妆品规范中的动物皮肤光毒性试验进行。结果：这四种物质在UVA波长范围的动物光毒性试验中均未显示有光毒性。结论：按照化妆品安全性检测,这四种中药提取物可以添加于化妆品中应用。; 潘南楠赖维龚子鉴谢小元朱柯赵越刘晨易金玲叶聪秀; 关键词：中药光毒性

长波紫外线对皮肤成纤维细胞表达和分泌组织蛋白酶G的影响被引量：1: 2014年; 目的研究长波紫外线（UVA）照射对皮肤成纤维细胞组织蛋白酶G（CatG）表达和分泌的影响.方法原代培养的皮肤成纤维细胞来自儿童包皮,10代以内的细胞行后续实验.①以10 J/cm2 UVA照射皮肤成纤维细胞,24、48、72 h后提取照射组和对照组细胞蛋白和mRNA,并收集细胞上清液;②分别以10、20、30 J/cm2UVA照射皮肤成纤维细胞,24 h后收集细胞和上清液.用RT-PCR和Western印迹分别检测各组细胞CatGmRNA及蛋白的表达,ELISA检测细胞上清液CatG的含量.结果 10 J/cm2 UVA照射后24、48、72 h,照射组细胞CatG mRNA表达分别为0.376±0.014、0.308±0.022和0.296±0.032,对照组分别为0.183±0.003、0.185±0.005、0.182±0.004;照射组细胞CatG蛋白灰度值分别为1.80±0.12、1.41±0.17和1.27±0.09,对照组分别为0.96±0.06、0.95±0.22、1.00±0.14;照射组细胞CatG mRNA、蛋白表达及细胞上清液CatG含量较相应的对照组升高（均P＜ 0.05）,且以照射后24h表达最高.10、20、30 J/cm2 UVA照射后24 h,皮肤成纤维细胞CatG mRNA表达分别为对照组的1.90、2.51、3.04倍,细胞CatG蛋白表达分别为对照组的1.88、3.97、4.72倍,细胞上清液CatG含量分别为对照组的1.36、1.50、1.66倍,均随UVA剂量的升高而增加,其差异有统计学意义（均P＜ 0.01）.结论急性UVA照射促进皮肤成纤维细胞表达和分泌CatG.; 许庆芳侯巍赖维郑跃刘晨陆春; 关键词：成纤维细胞组织蛋白酶类紫外线细胞衰老

UVA致人皮肤成纤维细胞急性和慢性光损伤模型的建立被引量：5: 2014年; 目的:探讨人皮肤成纤维细胞(human dermal fibroblasts,HDFs)急性和慢性光损伤模型建立的方法。方法:体外培养原代人皮肤成纤维细胞,选取第4~8代的细胞进行实验。用长波紫外线(UVA)单次照射建立HDFs急性光损伤模型,荧光倒置显微镜观察不同剂量UVA照射后第1、2、3天HDFs的形态变化;CCK-8法检测照射后HDFs的增殖活性。慢性光损伤HDFs模型采用8-甲氧沙林(8-MOP)避光孵育细胞24h,随后以含8-MOP的磷酸盐缓冲液(PBS)置换培养基,行9J/cm^2 UVA照射,照射完成后换Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM)(含10%胎牛血清)避光传代培养,21d后显微镜下观察HDFs形态;衰老相关-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色法计算衰老细胞率。结果:单次UVA照射导致HDFs增殖率下降,与UVA剂量呈正相关。UVA在剂量为≤10J/cm^2时,细胞存活率保持在>85%;而UVA剂量≥15J/cm^2时细胞存活率明显降低;≥20 J/cm^2时存活率为50%左右,至25 J/cm^2时仅为约25%。慢性光损伤HDFs诱导组(即UVA+MOP组)几乎所有细胞均出现体积变大、细胞颗粒增加等细胞老化的特征性改变;SA-β-Gal染色细胞的阳性率>95%。结论:UVA单次照射可成功建立HDFs急性光损伤模型,UVA联合8-MOP构建HDFs慢性光损伤模型。; 侯巍郑跃许庆芳刘晨陆春赖维; 关键词：光老化皮肤成纤维细胞

UVA对皮肤成纤维细胞表达和分泌组织蛋白酶G的影响: 目的：研究皮肤成纤维细胞组织蛋白酶G (Cathepsin G,CatG)的表达和分泌随UVA辐照后时间及其剂量的变化。方法：原代培养的皮肤成纤维细胞来自儿童包皮,10代以内的细胞行后续实验。先以10J/cm2 UVA辐...; 许庆芳侯巍赖维郑跃刘晨陆春; 关键词：UVA 皮肤成纤维细胞光老化

连续长波紫外线照射对人皮肤成纤维细胞胞吞、降解弹性蛋白的影响被引量：1: 2015年; 目的：研究连续长波紫外线（UVA）照射对人皮肤成纤维细胞胞吞和胞内降解细胞外弹性蛋白能力的影响，探讨光老化皮肤弹性蛋白堆积的机制。方法将人皮肤成纤维细胞分为空白对照组和连续 UVA照射组，连续 UVA 照射组予连续7 d 每天9.9 J/cm^2 UVA 照射以构建人皮肤成纤维细胞慢性光损伤模型。用流式细胞仪和衰老相关β半乳糖苷酶染色法分别检测细胞周期和细胞老化程度以验证模型。用荧光示踪技术和共轭淬灭技术，比较两组细胞对培养基中弹性蛋白的胞吞情况和对胞吞进入细胞的弹性蛋白的降解情况差异。结果与空白对照组相比，连续 UVA 照射组 G1期细胞比例和衰老细胞比例明显增高，人皮肤成纤维细胞慢性光损伤模型构建成功。空白对照组人皮肤成纤维细胞在与弹性蛋白共孵育24、48、72 h 后对弹性蛋白的胞吞率依次为（10.0±1.4）%、（27.8±4.2）%、（39.9±4.1）%，连续 UVA 照射组人皮肤成纤维细胞在对应时间点的胞吞率依次为（9.9±1.6）%、（28.3±5.1）%、（42.0±5.7）%，在相同时间点两组细胞对弹性蛋白的胞吞率差异均无统计学意义（均 P 〉0.05）。空白对照组人皮肤成纤维细胞在与弹性蛋白共孵育24、48、72 h 后，胞内降解内吞入胞的弹性蛋白的细胞百分率依次为（7.7±0.9）%、（22.8±1.8）%、（33.9±3.1）%，而连续 UVA 照射组人皮肤成纤维细胞在对应时间点依次为（4.2±1.1）%、（16.5±2.4）%、（26.7±2.6）%，均较对照组显著降低（均 P 〈0.05）。结论连续7 d 每日9.9 J/cm^2 UVA 照射对人皮肤成纤维细胞胞吞弹性蛋白的能力没有明显影响，却使细胞对胞吞的弹性蛋白的胞内降解能力下降。; 刘晨赖维许庆芳侯巍郑跃吴琳王宇键; 关键词：成纤维细胞皮肤衰老紫外线弹性蛋白蛋白水解

头孢曲松次抑菌浓度诱导淋球菌耐药及交叉/多重耐药现象的探讨被引量：4: 2011年; 目的：利用体外次抑菌浓度法诱导耐头孢曲松淋球菌,探讨其交叉耐药与多重耐药现象,为淋球菌耐头孢曲松机制的研究提供菌株和初步的理论基础。方法：将对头孢曲松敏感的标准株WHOA、WHOC、WHOD、WHOE及临床株ZSSY016以头孢曲松次抑菌浓度法连续传代培养,定期监测生物学特性,分析诱导前后菌株RAPD图谱的改变结果,并以琼脂稀释法检测诱导前后及诱导过程中菌株对其他抗生素耐药性的变化。结果：诱导后菌株对头孢曲松的M IC值提高了4~256倍,对青霉素、头孢呋辛的M IC值也发生了不同程度的耐药,对四环素、环丙沙星及大观霉素的耐药性变化未发生显著改变。结论：体外次抑菌浓度法可诱导耐头孢曲松淋球菌,诱导易感性存在菌株间的个体差异,耐头孢曲松机制与交叉耐药/多重耐药机制存在多样性。淋病治疗应合理足量应用抗生素,以防止体内诱导产生耐药菌株。; 刘敏龚子鉴叶张章赵越朱珂刘晨陈荣章李美荣尹颂超陈智睿赖维; 关键词：淋球菌头孢曲松耐药

慢性UVA辐射引起皮肤成纤维细胞组织蛋白酶K活性抑制和细胞内降解弹性蛋白能力下降: 目的比较组织蛋白酶K在培养的人皮肤成纤维细胞和慢性光损伤的人皮肤成纤维细胞中的活性差异;比较上述两种细胞不同时间点对细胞外弹性蛋白胞内降解率的差别.方法体外培养小儿来源的皮肤成纤维细胞.9.9J/cm2 UVA每日辐...; 刘晨赖维谭永芳许庆芳郑跃

积雪草在皮肤美容应用中的研究进展: 探积雪草作为一种我国常用的中药草本植物，在我国应用于临床的历史超过3千年，其有效成分(积雪草酸、羟基积雪草酸、积雪草苷、羟基积雪草苷)具广泛的药理作用，包括促进创伤愈合、抑制瘢痕增生、调节免疫、抗炎、抗菌、抗肿瘤甚至抗抑...; 吴琳赖维刘晨; 关键词：积雪草三萜类皮肤美容创伤修复光老化

组织蛋白酶B在急性光损伤皮肤成纤维细胞中的表达及意义被引量：5: 2014年; 目的探讨组织蛋白酶B（CatB）在急性光损伤人皮肤成纤维细胞（HDF）中的表达变化及意义.方法体外培养原代HDF,选取第4～8代细胞进行实验.实验设长波紫外线（UVA）照射组和不照射的对照组.CCK8法分别检测5、10、15、20和25 J/cm2 UVA照射后HDF的增殖率.用10 J/cm2 UVA单次照射致HDF急性光损伤,Western印迹及实时定量逆转录（RT）-PCR分别检测急性光损伤组HDF及对照组HDF照射后24、48、72 h CatB蛋白及mRNA表达;另外分别用10、15、20、25 J/cm2 UVA照射HDF,Western印迹及实时定量RT-PCR分别检测急性光损伤组及对照组HDF照射后48 h CatB蛋白及基因表达.数据采用SPSS 13.0统计软件行方差分析,两组间比较采用最小显著差异法（LSD）.结果 UVA照射导致HDF增殖率下降;当UVA剂量≤10 J/cm2时,细胞存活率均保持在85％以上,各照光组分别与对照组24、48、72 h时比较,均P＜0.05.Western印迹结果显示,急性光损伤组（10 J/cm2 UVA照射）CatB蛋白灰度值在照射后24 h（0.76±0.14）、48 h（1.34±0.38）、72 h（0.82±0.09）均较对照组（分别为0.35±0.01、0.45±0.12、0.61±0.06）升高（均P＜0.05）.实时定量RT-PCR显示,在急性光损伤组CatB的mRNA表达在照射后24 h（0.149±0.009）、48 h（0.173±0.009）、72 h（0.185±0.158）也较对照组（分别为0.089±0.015、0.091±0.010、0.111±0.017）上调（均P＜0.05）.10、15、20、25 J/cm2 UVA照射HDF后48 h,CatB的蛋白灰度值分别为0.99±0.07、1.49±0.14、1.89±0.08、2.07±0.06,均较对照组（0.60±0.05）升高（均P＜0.05）,CatB的mRNA表达也较对照组升高.结论 UVA致急性光损伤的皮肤成纤维细胞中CatB蛋白及mRNA表达均上调.; 侯巍许庆芳刘晨郑跃赖维; 关键词：成纤维细胞紫外线组织蛋白酶B

刘晨

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