余东亮
- 作品数:7 被引量:14H指数:3
- 供职机构:西北农林科技大学葡萄酒学院更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目陕西省农业科技攻关项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学更多>>
- 酒酒球菌不同菌株16S rDNA PCR-RFLP分析
- 研究表明,能够适应葡萄酒环境、较专一地进行苹果酸-乳酸发酵并对酒质有增益作用的细菌主要是酒球菌属的细菌。它是目前启动葡萄酒苹果酸-乳酸发酵最重要、应用最广泛的葡萄酒乳酸菌。酒球菌属目前只包括一个种,即酒酒球菌(Oenoc...
- 余东亮
- 关键词:苹果酸-乳酸发酵酒酒球菌特异引物RFLP分析
- 文献传递
- 诱变酒酒球菌中抗酸候选基因ATPase和FtsH的表达差异分析及功能验证被引量:2
- 2021年
- 为研究胁迫条件下具有不同表达趋势的抗酸候选基因ATPase和FtsH是否可以提高菌株的抗酸性,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定诱变酒酒球菌抗酸菌株b1和酸敏菌株b2中ATPase和FtsH在pH 4.8(最适条件)和pH 3.0(胁迫条件)ATB培养基中的相对表达量,分析其表达趋势;从b1中克隆ATPase和FtsH,分别命名为ATPase1和FtsH1,从b2中克隆ATPase和FtsH,分别命名为ATPase2和FtsH2,分析序列差异;将ATPase1,ATPase2,FtsH1和FtsH2分别在植物乳杆菌XJ25中做功能验证,构成重组植物乳杆菌a1,a2,f1和f2。以含空载体的植物乳杆菌con为对照,于pH 3.2的MRS培养基中测定重组植物乳杆菌的生长能力。定量结果表明ATPase在菌株b1和b2中表达量均显著上调;FtsH在b1中不变,在b2中显著上调。ATPase1和ATPase2在功能结构域内有3处非同义突变,FtsH1和FtsH2在跨膜结构域内有1处非同义突变。功能验证结果表明:a1和a2的生长能力均强于con,且a1和a2生长能力无差异;f1生长能力强于con,f2生长能力与con无差异。由此可知ATPase1,ATPase2和FtsH1均可以提高菌株抗酸性。
- 文向圆原雨欣余东亮刘树文
- 关键词:抗酸
- 酒酒球菌不同菌株的16S rDNA PCR-RFLP分析被引量:3
- 2010年
- 以实验室保存23株酒酒球菌为供试材料,运用基于16S rDNA序列的特异引物,建立了特异引物的扩增体系,从而确立了一种快速准确鉴定酒酒球菌的实验室方法。并对扩增的16S rDNA特异条带进行了酶切分析。结果表明,在确立的PCR体系上,均能扩增出一条长约995 bp的特异条带。酶切结果显示,HindⅢ和MseⅠ酶切图谱未显示出菌株间的差别,表明菌株间紧密的亲缘关系。AluⅠ的酶切图谱通过NT-SYSPC2.1软件生成UPGMA聚类图,在0.63水平上可以把23株菌区分为2个大类。
- 刘树文余东亮
- 关键词:酒酒球菌特异引物RFLP分析
- 昌黎产区酒类酒球菌(Oenococcus oeni)的遗传多样性及系统发育分析被引量:2
- 2019年
- 对我国昌黎产区5家具有代表性酒庄进行酒类酒球菌(Oenococcus oeni)菌株的分离,采用Species-specific聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定O. oeni,运用荧光标记扩增片段长度多态性(amplified fragment length polymorphism,AFLP)技术进行分子遗传学研究。结果表明:在分离具有表型差异的226株葡萄酒乳酸菌中,通过Species-specific PCR,鉴定出222株O. oeni。对分离的O. oeni菌株进行荧光标记AFLP分析,结果显示,经筛选的荧光标记选择性扩增引物可将222株O. oeni分为221个AFLP遗传型,其相似性系数在74%~98%。在81.7%的相似性水平上,分离菌株存在2个主要的进化类群。分离自同一酒庄的O. oeni菌株种群形成了独特的簇群结构,呈现出遗传发育和分离起源的典型特异性关系,证实了O. oeni资源是葡萄酒"风土"的重要组成之一。本研究证实了昌黎产区存在丰富的O. oeni资源,且不同酒庄分离的O. oeni菌株种群呈现出遗传特异性,这为开发我国具有地域特色的O. oeni资源提供了技术和理论支持。
- 余东亮石侃孟强孟强刘树文
- 关键词:葡萄酒酒类酒球菌扩增片段长度多态性遗传特异性
- 酒酒球菌(Oenococcus oeni)产胞外聚合物培养基的优化及其抗冷冻干燥性能评价被引量:4
- 2019年
- 为了研究酒酒球菌( Oenococcus oeni )产胞外聚合物(extracellular polymeric substances, EPS)在冷冻干燥过程中的保护性能,通过优化培养基提高EPS产量,并通过EPS对细菌冷冻干燥存活率的影响以及观察冷冻干燥过程中酒酒球菌内部及外表面的变化,评价其抗冷冻干燥的性能。正交试验优化可得,在初始pH值4.8、蛋白胨含量20 g/L、葡萄糖含量15 g/L的条件下,能产119.7 mg/100 mL酒酒球菌EPS。EPS作为冷冻干燥保护剂时细菌冷冻干燥后的存活率为70.97%,高于其他常规保护剂,扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)和透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)的图像表明添加冷冻干燥保护剂的实验组细胞形态更加完整,说明EPS有明显的冷冻干燥保护作用。该研究初步探究了酒酒球菌EPS冷冻干燥保护的机制,并为EPS在冷冻干燥保护剂中的应用提供理论基础。
- 王继锋石侃安玮余东亮刘树文刘树文
- 关键词:酒酒球菌胞外聚合物冷冻干燥
- 昌黎、银川产区酒酒球菌遗传多样性分析及优良菌株筛选
- 酒酒球菌(Oenococcus oeni,O.oeni)是苹果酸-乳酸发酵(malolactic fermentation,MLF)的主导菌,是葡萄酒最终质量风格的塑造者之一。法国、西班牙、意大利、澳大利亚、阿根廷和智利...
- 余东亮
- 关键词:酒酒球菌菌株筛选荧光标记
- 文献传递
- 宁夏酿酒产区酒酒球菌的快速鉴定及其PCR体系的优化
- 2010年
- 运用基于酒酒球菌16SrRNA高度保守序列设计的特异引物,通过对实验室保存优良酒酒球菌菌株的扩增验证,实现了对筛选自宁夏产区的未知苹果酸乳酸细菌的快速、可靠鉴定。通过对影响特异引物PCR反应体系的主要因素进行优化,建立了适合于实验室的特异引物扩增反应体系。结果表明:实验室保存酒酒球菌菌株均能扩增出唯一的、清晰的、大约995bp的条带,未知菌株通过扩增证明均为酒酒球菌;建立的特异引物扩增体系为:50μL的反应总体积,2.5UTaq酶、200μmol/LdNTP、0.2μmol/L上/下游引物、2.0mmol/LMg2+、DNA模板40ng。
- 刘树文余东亮
- 关键词:酒酒球菌特异引物