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人促血液血管生成素的原核表达、分离纯化及活性分析被引量：1: 2005年; 目的利用基因工程技术获得重组的人促血液血管生成素(HAPO),以探讨其对骨髓细胞的作用。方法提取人胎肝总RNA,利用RT-PCR、克隆HAPO cDNA插入表达载体pET32c,使之在大肠杆菌BL21(DE3)中表达;用DEAESepharose Fast Flow阴离子交换柱、Ni-Chelating Sepharose Fast Flow亲和柱以及SP Sepharose Fast Flow阳离子交换柱分离纯化,肠激酶酶切,液体培养小鼠骨髓细胞。结果经IPTG诱导HAPO实现了在大肠杆菌中的可溶性表达,经一系列层析获得融合的rh-HAPO,肠激酶酶切除去N-端融合部分后,获得高纯度的rh-HAPO。液体培养小鼠骨髓实验发现rh-HAPO可促进CD34+细胞和flk-1细胞的增殖。结论重组蛋白rh-HAPO可促进造血干/祖细胞的增殖。; 刘拥军任倩韩之波杨萍王彤卢士红韩忠朝; 关键词：基因表达分离纯化大肠杆菌

逆转录病毒载体转染的人凝血因子Ⅸ基因在人脐带组织源间充质干细胞中的表达被引量：3: 2009年; 为了研究逆转录病毒(pLEGFP-N1)转染的人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)基因在人脐带间充质干细胞中的表达,应用DNA重组技术将hFⅨcDNA构建入pLEGFP-N1载体,转导入包装细胞系Pheonix细胞,应用病毒上清感染人脐带组织源间充质干细胞(hUCT-MSCs),经G418筛选10天后获得全部的转染阳性细胞,从蛋白质水平和其功能活性上检测hFⅨ的表达。结果显示:配养上清液中可检测到hFⅨ的表达,每24小时分泌量达2.68±0.36μg/106细胞。Western blot检测表明,转导hFⅨ的hUCT-MSCs能分泌预期分子大小的hFⅨ入上清。功能性凝集测定实验表明了转导FⅨ的hUCT-MSCs2天培养上清中hFⅨ的活性为100%-130%。结论:pLEGFP-N1-hFⅨ能有效地转导hUCT-MSCs,并在其子代细胞中表达具有凝血活性的hFⅨ,这为hUCT-MSCs成为血友病B基因治疗的细胞载体研究奠定了基础。; 陈晓梨董春兰冯小明陈振萍周泽平许显辉赵钦军邱志勇任倩张蕾韩忠朝; 关键词：逆转录病毒基因治疗血友病B

HAPO-新型的促进血液和血管增殖的干细胞因子的研究: 刘拥军卢士红徐斌杨仁池任倩刘斌陆敏闫凤英韩之波韩忠朝; HAPO是该实验室新发现的干细胞因子，根据其氨基酸序列，从人胎肝cDNA文库中克隆出其cDNA，在大肠杆菌系统中成功表达并纯化制备出重组人多肽因子，生物学活性分析显示这种新发现的因子具有促进造血干祖细胞和血管内皮细胞增殖...; 关键词：; 关键词：血液血管增殖干细胞因子

口服避孕药对凝血机能的影响被引量：1: 1990年; 口服避孕药(OC)是目前应用较广的避孕方法.由于其具有效果可靠,使用简便等优点,受到广大育龄妇女的欢迎.据国外文献报道,OC 最大的危险是引起血栓和栓塞性疾病,其发病率高于对照组4～11倍,发病机制是由于 OC 使凝血机能增强和血管受损所致.我国约有3000万妇女服用 OC。; 刘蔼如吴淑熙李家增田萌苏甄文莹张敬芬孙红袁学文任倩; 关键词：口服避孕药凝血机能

血液微循环灌流状态的在体实验研究: 本文是通过体内实验,血微观血液流变学角度,来揭示微血管的舒缩运动,微流场中的动态耦合现象,网络流动,微血流的反馈调节机制等.; 李贵山任倩; 关键词：血液微循环生物力学; 文献传递

血液微循环灌流状态的在体实验研究: 2000年; 李贵山任倩; 关键词：血液微循环在体实验

蚯蚓提取物对微循环障碍形成的保护作用被引量：7: 2003年; 目的研究蚯蚓提取物对金黄地鼠血液微循环障碍形成的保护作用及其机理。方法以高分子右旋糖酐所致血液微循环障碍模型为基础 ,采用直观图像图示法和体外红细胞聚集试验 ,研究蚯蚓提取物对金黄地鼠颊囊血液微循环障碍的改善及体外红细胞聚集情况。结果以 2 0、1 0 0、2 0 0mg kg剂量经口给予蚯蚓提取物 3d ,可明显减少体内微血管中血细胞聚集团块和加快微血流速度 (P <0 .0 1 ) ,各观察时间点的红细胞聚集均显著低于阴性对照组 (P <0 .0 1 ) ;体外试验表明 ,在中、低切变率时 ,体外红细胞聚集状态得到明显改善 ,红细胞主要呈串珠及缗钱状 ,与阴性对照组相比有显著性统计学差异 (P <0 .0 5 )。结论蚯蚓提取物对微循环障碍形成具有一定的保护作用。; 吕中明石根勇胡启之李贵山薄丽津任倩; 关键词：蚯蚓提取物金黄地鼠右旋糖酐血流速度红细胞聚集微循环障碍

复方脑栓1号对血细胞解聚效应的实验研究被引量：2: 1997年; 选用金黄地鼠，从足背静脉注射大分子右旋糖酐的方法，复制以血细胞聚集为基础的微循环障碍动物模型，然后注射“复方脑桂１号”和“维脑路通”。通过显微电视录像系统将图像放大约８００倍，观测体内与体外血细胞聚集－解聚动态变化过程，并作定性定量分析．纶果表明：“复方脑栓１号”对体内外血细胞有明显的解聚作用（治疗作用）和抑制血细胞的聚集效应（预防作用）且均优于常用药“维脑路通”．; 齐文明孟威宏姜延青李贵山任倩薄丽津; 关键词：微循环障碍维脑路通

人促血液血管细胞生成素的高效表达和快速纯化: 2005年; 目的构建人促血液血管细胞生成素(HAPO)的表达载体,获得纯化的HAPO蛋白并研究其生物学功能。方法通过PCR方法扩增人HAPO基因,克隆于不同的原核表达载体,ITPG诱导融合蛋白表达。NTA层析柱纯化融合蛋白,再经肠激酶裂解融合蛋白,阳离子交换层析纯化,得到纯化的重组蛋白。用培养的MO7e和ECV-304细胞检测蛋白活性。结果HAPO可在pET32C中,获得稳定高效的可溶性表达。在E coli BL21(DE3)中,HAPO表达量可占菌体总蛋白的10%左右。重组蛋白80%是以可溶性蛋白形式存在。NTA层析柱纯化得到的HAPO融合蛋白,再经肠激酶裂解,阳离子交换层析纯化,得到90%以上纯度的重组HAPO蛋白,并且具有良好的生物学活性。结论得到具有90%以上纯度的重组HAPO蛋白,而且,对MO7e和ECV-304细胞具有促增殖的作用。我们获得了纯化的人重组HAPO蛋白,为进一步研究其功能及临床应用打下基础。; 任倩刘拥军徐斌韩之波卢士红马凤霞韩忠朝; 关键词：融合蛋白纯化层析纯化细胞生成素 ECV-304细胞

IL-27通过信号通路p38 MAPK和PI3K途径调节中性粒细胞Mac-1、fMLP-R及IL-1β表达被引量：7: 2010年; 本研究探讨IL-27调节人外周血中性粒细胞中黏附分子Mac-1、趋化因子受体fMLP-R和促炎因子IL-1β表达的信号通路。采用Ficoll密度梯度离心及低渗裂解残存红细胞方法分离高纯度的外周血中性粒细胞。用RT-PCR方法检测中性粒细胞IL-27受体(WSX-1/TCCR和gp130)mRNA表达。分别应用IL-27及信号通路p38 MAPK、PI3K和ERK抑制剂SB203580、LY294002、U0126处理中性粒细胞,用实时定量RT-PCR检测作用前后fMLP-R和IL-1βmRNA水平变化;应用放射免疫法检测作用前后培养上清液中IL-1β的水平变化;流式细胞术检测作用前后Mac-1表达水平变化。结果表明:人外周血中性粒细胞协同表达IL-27受体的两个亚单位WSX-1/TCCR和gp130,IL-27下调中性粒细胞表面黏附分子Mac-1表达(p<0.05),SB203580阻断了IL-27对Mac-1的下调作用(p<0.05),而LY294002及U0126无阻断作用(p>0.05)。相反,IL-27上调中性粒细胞中fMLP-R和IL-1βmRNA的表达并能增加IL-1β释放(p<0.05),LY294002阻断了IL-27对fMLP-R和IL-1β的上调作用(p<0.05),而SB203580及U0126无阻断作用(p>0.05)。结论:IL-27与IL-27R相互作用,可能通过p38 MAPK和PI3K信号途径调节人外周血中性粒细胞中Mac-1、fMLP-R及IL-1β表达。; 李建平杨少光董春兰吴昊贾海蓉赵艳津王彤卢世红任倩赵钦军邢文张磊韩忠朝; 关键词：IL-27 中性粒细胞 MAC-1 IL-1Β

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任倩

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