乔泰东
- 作品数：57 被引量：323H指数：11
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家自然科学基金创新研究群体项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Af116609基因对胃癌细胞系SGC7901/VCR耐药性的影响被引量：1
- 2005年
- 目的研究Af116609基因转染胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR后,对胃癌细胞耐药性的影响。方法采用RT-PCR法克隆Af116609基因,用Northernblot检测其差异表达,以基因转染技术调节其表达,通过体外药敏实验观察其对胃癌耐药表型的影响。结果从胃癌耐药细胞SGC7901/VCR中克隆到Af116609基因的CDS序列327bp,该序列与GenBank登录的一致。Northernblot结果显示,该基因在耐药细胞高表达。体外药敏实验发现,转染正义真核表达载体的药敏细胞中该基因上调,对长春新碱、5-氟脲嘧啶和阿糖胞苷的耐药性增加,而对阿霉素的抗性有损害,对氨甲喋呤的抗性无明显影响;转染反义真核表达载体的耐药细胞中该基因下调,对上述5种药物的抗性均减弱。结论Af116609基因与胃癌MDR表型相关,可作为逆转胃癌MDR的候选靶分子。
- 金晓航杜静平尹芳张宇梅胡文华曹云新时永全赵燕秋乔泰东樊代明
- 关键词：SGC7901/VCR基因转染技术胃癌细胞系细胞耐药性NORTHERN体外药敏实验
- 胃粘膜肠上皮化生肿瘤相关抗原LIMA和MG_7-Ag的表达及与胃癌关系的免疫组化研究
- 1989年
- 肠上皮化生与胃癌间的关系至今尚无定论。部分人发现肠上皮化生的发生率可随多种因素的变化而增高,如年龄的增大、慢性胃炎程度的加重等,认为与胃癌发生的关系不大。但也有人认为萎缩性胃炎、肠上皮化生、不典型增生和胃癌是病理组织学上的渐进过程,其中以大肠型肠化与胃癌的关系密切,故把肠上皮化生视为癌前病变。本文应用从大肠癌中提取物制备的抗大肠型粘液单抗(Large Intestinal Mucin Antibody简称LIMA)
- 乔泰东樊代明陈宝军张学庸陈希陶牟震先胡家露赵建业Jeng Ma
- 关键词：肠上皮化生胃癌免疫组化胃粘膜
- Ss-A／Ro核蛋白60 ku亚单位及其变异体在耐药胃癌细胞中的表达被引量：5
- 2005年
- 目的:克隆Ss-A／Ro 60 ku亚单位编码基因,检测Ss-A／Ro 60 ku亚单位及其变异体在耐药胃癌细胞中的表达情况．方法:应用RT-PCR克隆Ss-A／Ro 60 ku亚单位编码基因,应用半定量RT-PCR检测Ss-A／Ro 60 ku亚单位及其变异体在胃癌细胞中的表达情况．结果:成功克隆了Ss-A／Ro 60 ku亚单位编码基因,并发现了他的两种变异体,长度分别为52 bp和41 bp．半定量RT- PCR结果显示,Ss-A／Ro 60 ku亚单位在SGC7901／VCR中的表达强度高于SGC7901细胞(P=0．0001),Ss-A／Ro 60 ku亚单位的两种变异体在SGC7901／VCR中的表达强度也高于 SGC7901细胞(P=0．001)．结论:Ss-A／Ro 60 ku亚单位及其两种变异体为胃癌多药耐药相关分子．
- 韩全利丁杰郭长存王新乔泰东张学庸樊代明
- 关键词：胃癌变异体多药耐药
- RhoB对胃癌细胞SGC7901的负性调控作用被引量：1
- 2005年
- 目的 研究RhoB对胃癌细胞SGC7901增殖调控作用。方法 用PCR扩增出RhoB的全长cDNA,构建RhoB可诱导表达载体pGene/V5-His-RhoB;脂质体介导法将调控载体pSwitch及诱导表达载体pGene/V5-His-RhoB先后转入人胃癌细胞SGC7901中,筛选出稳定抗性克隆;Westernblot检测米非斯酮诱导后转染细胞中RhoB蛋白的表达。用MTTassay检测RhoB转染细胞株的生长速度、双苯并咪唑染料(Hoechst33258)活细胞吸收分析法、流式细胞仪(FCM)检测RhoB对胃癌细胞凋亡指数作用。结果 成功构建RhoB可诱导真核表达载体pGene/V5-His-RhoB,并经酶切和测序鉴定;转染后经潮霉素B和Zeocin筛选出稳定抗性克隆SGC7901 /RhoB;米非斯酮诱导出RhoB蛋白表达,在诱导 24小时后蛋白表达最高;细胞增殖试验结果显示,RhoB表达上调后胃癌细胞增殖受到抑制;细胞凋亡检测提示高表达RhoB可明显诱导胃癌细胞凋亡。结论 RhoB对胃癌细胞增殖具有负性调控作用,可诱导胃癌细胞出现凋亡。
- 孙立军毕锋潘阳林刘娜梁洁张国云乔泰东樊代明
- 关键词：RHOB胃癌
- 金探针标记LAK细胞体内示踪的研究
- 1994年
- 用胶体金（ｃＡｕ）标记ＰＨＡ、ＣｏｎＡ，制备出ｃＡｕ－ＰＨＡ和ｃＡｕ－ＣｏｎＡ金探针。电镜示踪显示，该金探针与ＬＡＫ细胞表面相应受体结合后，可在２小时内发生完全内化。主要定位于ＬＡＫ细胞的溶酶体内，并在相当长的时间内稳定地滞留在ＬＡＫ细胞内，故可作为ＬＡＫ细胞可靠的示踪标志物。将内化有金探针的ＬＡＫ细胞输入荷结肠癌的裸鼠体内，然后对不同时间的各种组织分别作光镜银染和电镜观察，既可清楚地显示ＬＡＫ细胞在组织中的分布，也可对ＬＡＫ细胞与靶细胞相互作用的过程作仔细的观察。结果为ＬＡＫ细胞的体内示踪研究提供了新的途径。
- 乔泰东王福安杨静胡家露樊代明张学庸
- 关键词：胶体金探针体内示踪杀伤细胞
- 人假想镁离子转运蛋白在胃癌细胞耐药中的生物学作用被引量：3
- 2004年
- 目的 制备人假想镁离子转运蛋白(HPT)抗血清并检测其在胃癌耐药细胞中的表达 ,以观察其在胃癌耐药发生中的作用。方法 克隆编码HPT蛋白的cDNA并测序鉴定 ;构建原核表达载体pRSETB HPT ,诱导表达 6×His与HPT的融合蛋白 ;用含融合蛋白的聚丙烯酰胺凝胶颗粒免疫小鼠 ,以Westernblot检测小鼠血清的抗体活性 ;以所制备的抗血清检测HPT蛋白在胃癌各细胞系中的表达。结果 DNA测序结果证实所克隆的基因片段与预计相符 ;利用原核系统表达出 1条约 5 5kD的新生蛋白带 ,Westernblot证实其为与6×His融合的蛋白 ;该融合蛋白免疫血清仅结合SGC790 1细胞中约 5 0kD的单一蛋白带 ;利用该血清检测发现SGC790 1 /ADR中HPT蛋白表达水平高于SGC790 1。结论 成功地制备了鼠抗人HPT蛋白抗血清 。
- 严鹏飞程翌尹芳胡文华乔泰东樊代明
- 关键词：抗血清胃肿瘤多药耐药
- 人胃癌血管特异性结合多肽的体内筛选及其三维结构模拟的初步分析被引量：1
- 2004年
- 目的 :利用噬菌体随机环七肽库在小鼠肾包膜下荷人胃癌模型体内筛选能够与人胃癌血管内皮细胞结合的特异性分子 ,对其多肽进行计算机空间结构模拟分析 .方法 :制备免疫抑制小鼠肾包膜下人胃癌移植瘤模型 ,用随机环七肽库在其体内进行 4轮筛选 ,对随机获得的 14个克隆进行测序 .通过细胞ELISA检测所得到的特异性小肽在脐静脉内皮细胞(HUVEC) ,SGC790 1,LoVo,Eca 10 9及Hep G2细胞系上的结合能力 .并通过计算机分子模拟多肽CGNSNPKSC的空间结构 .结果 :成功获得 14个噬菌体克隆 ,并呈现出 2种氨基酸序列 ,其中多肽CGNSNPKSC ,相比于对照细胞SGC790 1,LoVo ,Eca 10 9,Hep G2 ,其同HUVEC结合能力明显增强 .利用计算机技术成功地模拟并分析了该多肽的空间结构 .结论 :多肽CGN SNPKSC同血管内皮细胞结合能力较强 ;空间结构稳定 ,是一个高亲水多肽 ,更容易形成折曲的抗原表位 ,很有可能是一个极具肿瘤血管靶向治疗前景的多肽 .
- 郅敏肖高铿郅慧董蕾乔泰东樊代明吴开春
- 关键词：胃癌噬菌体随机肽库血管生成多肽
- 艾氏腹水瘤全细胞瘤苗诱导的特异性杀伤活性被引量：2
- 2001年
- 目的研究艾氏腹水瘤全细胞瘤苗诱导的特异性杀伤活性。方法用40g/L的多聚甲醛处理的艾氏腹水瘤细胞作为全细胞瘤苗免疫Balb/c小鼠,建立瘤苗小鼠模型。用HE染色法对亲本肿瘤细胞皮下再次攻击形成的肿瘤结节进行病理学观察;用51Cr释放法测定瘤苗免疫组、荷瘤组、正常组小鼠脾细胞,对亲本艾氏腹水瘤细胞和Sp2细胞的杀伤活性。结果HE染色显示,经瘤苗免疫后亲本肿瘤细胞皮下再次攻击形成的肿瘤结节中,瘤细胞几乎完全坏死,同时在坏死部位有大量炎细胞浸润、纤维母细胞和小血管增生而对照组则无以上现象。效靶比为200∶1时,免疫小鼠脾细胞体外杀伤亲本艾氏腹水瘤细胞的杀伤率%为42.3±3.2%,显著高于荷瘤组的12.1±2.3%、正常组的6.1±1.1%和对Sp2/0细胞的杀伤率8.8±0.4%P均0.05。结论艾氏腹水瘤全细胞瘤苗可诱导机体产生特异性杀伤活性。
- 刘娜樊代明马征陈宝军乔泰东
- 关键词：艾氏腹水瘤肿瘤疫苗
- HLA-A匹配的人胃癌细胞系诱生胃癌特异性T淋巴细胞被引量：1
- 2000年
- 目的 用HLA A匹配的人胃癌细胞系诱导对胃癌细胞具有特异性杀伤作用的T淋巴细胞。方法 分离胃癌患者及正常人外周血淋巴细胞 (PBL) ,用HLAⅠ类型别已知、经照射的异体胃癌细胞系刺激 ,进行筛选性的混合淋巴细胞肿瘤细胞培养 (MLTC) ,初步获得HLA A可能匹配的淋巴细胞供体 ,血清法测定其HLA A、B分子确认匹配后 ,进一步进行MLTC ,3H掺入法评估其增殖能力 ,直接免疫荧光法分析其细胞表型 ,5 1 Cr释放试验检测效应细胞的杀伤效应。结果 从 9例 (共分离 11次 )胃癌患者及 10例 (共分离 16次 )正常人PBL中 ,初筛发现有 2例胃癌患者及 1例正常人PBL得以大量增殖 ,检测出其中 1例胃癌患者及正常人的HLA A抗原均为HLA A2、A2 4,与用作刺激的异体胃癌细胞系相匹配 ,1例则不相匹配。对匹配的PBL进一步实施MLTC ,经 3～ 4次刺激后 ,CD3+ 淋巴细胞达到 98% ,其对HLA A匹配胃癌细胞的杀伤表现出明显的特异性。结论 利用HLA A2 (A2 4)匹配的异体胃癌细胞系作为刺激细胞反复诱导胃癌患者或健康人PBL ,有可能产生胃癌特异性的CTL。推测在刺激及培养条件适宜时 ,人外周血中较少的CTL前体细胞 (CTLp)是可能捕捉到的。
- 聂勇战吴开春田凤岐李玲陈宝军乔泰东樊代明
- 关键词：HLA抗原T淋巴细胞
- 丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1对缺氧诱导因子-1转录活性调节机制的研究被引量：9
- 2005年
- 目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶- 1 (MKP -1)参与缺氧诱导因子- 1 (HIF- 1)转录活性调节的机制。方法 采用Western印迹检测常氧及缺氧状态下磷酸化细胞外信号调节激酶ERK和总ERK在胃癌细胞系SGC7901中的表达;利用脂质体将正义真核表达载体及针对MKP-1的小干扰RNA载体转入SGC7901细胞;借助双荧光素酶基因报告系统(dualluciferasereporter, DLR)检测ERK通路抑制剂PD98059对SGC7901细胞中HIF 1转录活性的影响。结果 ( 1 )缺氧时磷酸化ERK在SGC7901中的含量增加,而总ERK的表达不变; (2)缺氧12h时不同浓度的PD98059均能抑制HIF -1的转录活性;而p38通路抑制剂SB203580对HIF -1的转录活性无影响; (3)将针对MKP 1的小干扰RNA载体和空载体分别瞬时转入SGC7901细胞,转染24h后, 缺氧12h时磷酸化ERK在小干扰RNA载体转染细胞(U6M2)的表达高于空载体转染细胞(U6); (4)不同浓度的PD98059均能够抑制U6和U6M2细胞中HIF- 1的转录活性,当PD98059浓度达50μmol/L以上时,U6和U6M2细胞中HIF- 1的转录活性差异无统计学意义。(5)不同浓度的PD98059均能够抑制U6和U6M2细胞血管内皮生长因子(VEGF)的产生,当PD98059浓度达50μmol/L以上时,VEGF的分泌量在U6和U6M2细胞中差异无统计学意义。结论 在胃癌细胞系SGC7901中。
- 乔泰东刘长江时永全杜昱蕾韩霜樊代明
- 关键词：转录活性PD98059缺氧诱导因子-1HIF-1丝裂原活化蛋白激酶荧光素酶基因
