公共文化服务平台

分泌型碱性磷酸酶示踪的TA克隆真核表达载体的构建被引量：3: 2010年; 目的制备具有分泌型碱性磷酸酶示踪作用和真核表达功能的TA克隆载体。方法把CMV启动子区-TA克隆位点-BGH多聚腺苷酸区序列克隆到pSEAP2-control载体中,构建成具有真核表达功能并外分泌碱性磷酸酶(SEAP)的pcDNA5AP-前T载体。增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因克隆到pcDNA5AP-T载体上并进行EGFP表达分析和SEAP活性检测。结果 pcDNA5AP-EGFP以400ng/孔转染6孔板293T细胞,EGFP表达率达50%,SEAP活性比对照组高20倍。结论成功构建了具有真核表达功能并外分泌碱性磷酸酶的pcDNA5AP-T载体。; 张洪海计云霞孙玉张玉林乔录新崔丹陈德喜; 关键词：T载体真核表达

艾滋病毒神经损伤机制研究最新进展被引量：1: 2010年; 随着HAART的广泛使用,艾滋病患者无症状生存期及寿命明显延长.这使得其慢性神经系统并发症,尤其是HIV相关痴呆症（HAD）,显得尤为突出.有关HIV神经损伤的确切机制目前还没有完全阐明,因而了解本领域国际前沿对于研究HIV神经损伤机制以及HAD的防治具有非常重要的意义.此文就炎症细胞、gp120、Tat、谷氨酸的作用和在HAD中的作用机制作了综述.; 乔录新张玉林陈德喜; 关键词：艾滋病凋亡

原发性肝癌患者血浆循环游离线粒体DNA定量分析及其诊断意义被引量：1: 2015年; 目的分析血浆循环游离线粒体DNA（CCF mt DNA）水平与原发性肝癌（HCC）的相关性,探讨其作为HCC标志物的可行性。方法收集HCC患者及体检健康者的血浆标本各60例,提取全基因组DNA;实时荧光定量PCR分析线粒体CoⅡ一段保守且与核基因组无同源的序列;构建含该靶序列的已知浓度的质粒作为标准品,系列稀释后定量检测CCF mt DNA的含量;独立样本t检验分析HCC患者与体检健康者CCF mt DNA水平的差异;ROC曲线分析CCF mt DNA诊断HCC的效能。结果HCC患者CCF mt DNA水平[（0.591±0.014）×106拷贝/m L]显著高于健康对照组[（0.364±0.012）×106拷贝/m L],差异有统计学意义（t=12.27,P〈0.05）;ROC曲线结果显示,以0.470×106拷贝/m L为cut off值,CCF mt DNA诊断HCC的敏感性为83.3%,特异性为88.3%;ROC曲线下面积（AUCROC）=0.916,95%CI：0.864-0.968,P〈0.05。结论 HCC患者CCF mt DNA水平升高,且诊断HCC的敏感性、特异性较高,可能作为肿瘤标志物用于HCC诊断。; 乔录新王贲士陈德喜石英郭洪亮; 关键词：肝癌血浆实时荧光定量聚合酶链反应

细胞粘附分子5单克隆抗体、制备方法及应用: 本发明公开了细胞粘附分子5（ICAM5）单克隆抗体、制备方法及应用，其杂交瘤细胞株保藏编号为CGMCC No.5798。本发明提供ICAM5单克隆抗体，可用于针对ICAM5抗原的免疫荧光和蛋白印迹（Western blo...; 陈德喜张玉林李宁石英宋凤丽丁谓乔录新侯庆生徐树莹; 文献传递

艾滋病相关认知损害被引量：3: 2015年; 认知障碍/痴呆症并非都是指阿尔茨海默病、血管性痴呆症以及其他神经科相关痴呆症(以下简称为神经科痴呆症),艾滋病也会引发认知损害/痴呆症。但是,其发病机制、临床表现以及治疗等诸方面都与神经科痴呆症不同。在本文将对这一疾病的发病机制、病理特点及临床表现等进行全面的阐述。; 陈文涛乔录新刘道洁张玉林; 关键词：获得性免疫缺陷综合征 HIV 痴呆

基于同尾酶技术构建CCL3L1基因串联重组质粒的方法被引量：4: 2012年; 目的:利用同尾酶技术将CCL3L1基因重复连续插入pcDNA6.2-GW/miR载体,构建含有CCL3L1基因串联体的重组质粒,实现小片段CCL3L1有效延长。方法:PCR扩增CCL3L1基因并在引物的两端设有同尾酶BamHI和BglII限制性内切酶位点,纯化PCR产物插入pMD18-T载体,阳性克隆命名为pMD18T-CCL3L1。BamHI和BglII双酶切pMD18T-CCL3L1和pcDNA6.2-GW/miR载体后将第一个CCL3L1片段插入pcDNA6.2-GW/miR载体命名为pcDNA6.2-CCL3L1-1。由于载体本身在BglII位点后带有XhoI酶切位点利用BamHI和XhoI切割pcDNA6.2-CCL3L1-1回收CCL3L1片段,BglII和XhoI切割pcDNA6.2-CCL3L1-1回收大片段做载体重组形成含有两个连续CCL3L1片段的质粒命名为pcDNA6.2-CCL3L1-2,重复此步骤可得到含有N个CCL3L1基因串联体的重组质粒pcDNA6.2-CCL3L1-X。结果:经酶切和测序证实成功构建含有4个CCL3L1基因串联体的重组质粒pcDNA6.2-CCL3L1-4,并同时产生含有1个和2个CCL3L1基因串联体的重组质粒。结论:利用同尾酶技术可以快速有效地构建CCL3L1基因串联重组质粒,实现目的片段的无限扩大,为小片段基因表达的研究奠定基础。; 乔录新张世杰石英陈德喜; 关键词：同尾酶 CCL3L1

分泌型碱性磷酸酶示踪TA克隆真核表达载体及其构建方法: 本发明公开了一种分泌型碱性磷酸酶示踪TA克隆真核表达载体，其是在真核表达启动子(CMV)下游和BGH多聚腺嘌呤转录终止子的上游插入碱性磷酸酶示踪TA克隆位点。本发明所述载体可利用培养基上清进行检测；可利用化学发光仪器进行...; 陈德喜张洪海魏飞力李宁张玉林孙玉乔录新; 文献传递

核苷类似物对小鼠肝脏线粒体DNA D-loop区突变的影响被引量：1: 2016年; 目的探讨长期使用核苷类似物(NA)是否导致肝脏线粒体DNA(mt DNA)D-loop区损伤。方法选取7周龄Balb/C小鼠25只,将其随机分为对照组和4个NA实验组。对照组腹腔内注射双蒸水,各实验组分别给予司他夫定(D4T)50 mg/kg、齐多夫定(AZT)100 mg/kg、拉米夫定(3TC)50 mg/kg和去羟肌苷(DDI)50 mg/kg,分别腹腔内注射,每周5次,共12周。取各组小鼠肝组织,通过激光捕获显微切割获取肝细胞,对mt DNA D-loop区克隆和测序。结果 DDI组肝组织中mt DNA拷贝数(0.440±0.040)和肝细胞中mt DNA拷贝数(0.464±0.013)均较对照组[(1.000±0.080)、(1.000±0.058)]显著减少,差异均有统计学意义(均P<0.05)。D4T组肝细胞D-loop区与参考序列的平均距离为(0.0037±0.0019),3TC组为(0.0031±0.0017),DDI组为(0.0035±0.0028),与对照组(0.0018±0.0017)比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。D4T组肝细胞D-loop区平均同义替换率(d S)为(0.0060±0.0010),3TC组为(0.0050±0.0007),与对照组(0.0030±0.0007)比较差异有统计学意义(P<0.05)。DDI组肝细胞D-loop区平均错义替换率(d N)为(0.0020±0.0010),与对照组(0.0008±0.0003)比较差异有统计学意义(P<0.05)。AZT组肝组织D-loop区的"A→G"转换率(0.001 90)较对照组(0.000 62)高,差异有统计学意义(P<0.05)。D4T组肝细胞D-loop区的"T→C"转换率为0.001 28,3TC组为0.001 75,较对照组(0.000 58)显著增高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论长期暴露于核苷类似物可导致小鼠肝细胞mt DNA D-loop区病变,主要突变类型为转换,主要的转换为"A→G"和"T→C"。; 张维乔录新丁渭陈德喜张玉林; 关键词：D-LOOP区线粒体DNA 肝细胞核苷类似物

ASPP2以p53非依赖形式促进自噬引起Hep3B细胞凋亡被引量：4: 2013年; p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein 2 of p53,ASPP2)能特异性地与p53蛋白结合并增强其促凋亡的功能,进而发挥抗肿瘤作用.本室前期研究发现,ASPP2可以通过p53-DRAM-自噬途径诱导细胞凋亡.在本研究中,利用ASPP2腺病毒感染Hep3B细胞(p53缺陷型肝癌细胞系)并用甲基磺酸(MMS)处理后;Calcein AM/PI和M30染色检测细胞凋亡;GFP-LC3质粒转染细胞后检测自噬;荧光定量PCR和免疫印迹检测自噬基因表达.结果表明,ASPP2在p53缺陷的Hep3B细胞内可诱导发生凋亡;在MMS存在和缺失条件下,Adr-ASPP2均引起自噬体水平升高及自噬基因的表达增加,且MMS协同Adr-ASPP2能使自噬水平增加;进一步用VPS34 siRNA和DRAM siRNA抑制自噬发现,细胞凋亡水平下降,说明由Adr-ASPP2诱发经损伤相关自噬调节蛋白(DRAM)介导的自噬参与了肝癌细胞系凋亡的发生.综上结果表明,ASPP2可以通过非p53依赖的DRAM介导自噬,并促进肝癌细胞凋亡.该研究可为肝癌的基因治疗提供新的思路.; 刘凯王安娜姜涛温韬殷继明刘道洁乔录新石英李莉李宁陈德喜; 关键词：自噬

自噬功能研究进展被引量：4: 2012年; 近年来，自噬功能越来越成为除细胞凋亡之外备受关注和研究的领域。自噬不仅被证实是一种细胞自我死亡的方式，同时也是一种细胞的自我保护机制，在肿瘤、老化和神经退化等细胞增殖和凋亡发生紊乱的疾病中发挥着重要的作用。根据细胞内底物进入溶酶体腔的方式不同，自噬可分为分子伴侣介导的自噬、小分子自噬和大分子自噬3种方式，; 徐树莹乔录新张玉林陈德喜; 关键词：自噬生理过程信号传导

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

乔录新

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

乔录新

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈