丛聪 作品数:4 被引量:21 H指数:2 供职机构: 四川大学华西医院 更多>> 发文基金: 长江学者和创新团队发展计划 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
免疫抑制剂依维莫司对大鼠胰岛细胞的毒性作用 2010年 目的观察依维莫司等免疫抑制剂对大鼠胰岛瘤细胞(INS-1)和SD大鼠正常胰岛细胞代谢活性和功能的影响,旨在探讨依维莫司在胰岛移植免疫抑制治疗中的安全性和可行性。方法不同浓度梯度免疫抑制剂依维莫司、西罗莫司、环胞霉素A和霉酚酸酯处理INS-1和正常胰岛细胞,用MTT法检测细胞的代谢活性;用葡萄糖刺激胰岛素分泌实验检测胰岛细胞的胰岛素分泌功能。结果临床血药浓度以上的依维莫司和西罗莫司高浓度组胰岛细胞增殖抑制率低于环胞霉素A和霉酚酸酯(P<0.05);依维莫司在临床血药浓度范围和其它免疫抑制剂一样可以抑制胰岛细胞的胰岛素分泌功能,各组间的刺激指数差异无统计学意义。结论依维莫司和西罗莫司对INS-1细胞及SD大鼠胰岛的毒性作用较小,环胞霉素A和霉酚酸酯对INS-1和SD大鼠胰岛具有较为明显的毒性作用,依维莫司有望作为新型免疫抑制剂应用于临床胰岛移植。 金熙 丛聪 袁宇 麦刚 魏玲玲 陈又南 程惊秋 陆燕蓉关键词:依维莫司 免疫抑制剂 胰岛 毒性 大鼠胰岛的分离纯化方法改进与功能鉴定 被引量:14 2008年 目的通过改进胰腺消化和分离的技术条件,提高成年大鼠胰岛分离纯化产率和质量。方法用胶原酶Ⅺ液灌注消化成年SD大鼠胰腺,对胰岛分离纯化方法加以改进:以4种比重的Euro-Ficoll(F1:D=1.132,F2:D=1.108,F4:D=1.069)Hank’s(F5:D=1.023)不连续密度梯度离心,以离心半径15cm,2000r/min于4℃缓慢升降离心20min,收集位于F1和F2界面的胰岛。双硫腙特异染色法鉴定胰岛纯度;二醋酸酯荧光素/碘化丙啶染色法计算胰岛成活率;放射免疫分析法检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌量,计算刺激指数。将胰岛当量(islets equivalent quantity,IEQ)为1000的胰岛移植于同品系糖尿病大鼠肾包膜下,9d内隔日观察动物血糖的变化,评价胰岛功能。比较分离条件优化前后收获胰岛的产率和质量。结果改进纯化方法后每只大鼠胰岛收获量为(920±122)IEQ,胰岛纯度>90%,胰岛细胞成活率为91%±2%。胰岛细胞功能良好,在低糖和高糖刺激后培养液中胰岛素浓度分别为(18.25±0.32)mU/L和(36.70±3.57)mU/L,刺激指数为2.01±0.15。1000 IEQ胰岛移植于糖尿病大鼠肾包膜下,观察期内可维持动物血糖水平正常。结论改进后的胶原酶灌注消化和不连续梯度离心方法提高了胰岛的产率,保证了胰岛的高纯度及高成活率。 袁宇 丛聪 张静 魏玲玲 李胜富 金熙 麦刚 李幼平 程惊秋 陆燕蓉关键词:胰岛 纯化 胰岛素 恒河猴骨髓间充质干细胞分离培养及其生长特性 被引量:5 2007年 采用密度梯度离心和贴壁筛选方法分离纯化了恒河猴骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells from bone marrow of Rhesus monkey,RhBMSCs);通过表面抗原检测和核型分析对细胞进行了初步鉴定;通过生长曲线的绘制和细胞凋亡的检测探讨了细胞的生长特点。本实验获得的RhBMSCs形态以梭型为主,核型正常,CD29表达率为99.2%,CD34、CD45、HLA-DR表达率均低于3.2%,RhBMSCs表型符合间充质干细胞的特点,且纯度较高,细胞生长旺盛,但倍增时间有随传代数的增加而逐渐延长的趋势。本实验探讨了RhBMSCs的体外分离、扩增培养及鉴定的方法,并对其生长特点进行了初步观察,这不仅有助于进一步了解与之近似的人的骨髓间充质干细胞的相关特性,而且为以猕猴为对象的BMSC定向分化和组织修复等动物体内实验打下了基础。 高昆 陆燕蓉 李胜富 丛聪 袁宇 张杰 程惊秋 李宏霞 王莉关键词:骨髓间充质干细胞 恒河猴 细胞培养 细胞特性 大鼠骨髓间充质干细胞对淋巴细胞增殖的负调节作用 被引量:2 2008年 [目的]探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)的免疫负调节作用。[方法]分离和鉴定大鼠MSCs,用MTS法观察该细胞对淋巴细胞增殖活性的影响,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测MSCs与淋巴母细胞混合培养液24h后上清中LDH活性。[结果]大鼠MSCs表型为CD29+、CD44+、CD45-、CD54+、CD95+和SH-2+,具有诱导分化成脂肪和成骨的潜能力,对ConA刺激的淋巴细胞增殖有显著的抑制作用,能够诱导淋巴母细胞裂解,释放LDH。[结论]MSCs能够抑制淋巴细胞的活化增殖,这种负向免疫调节功能有可能在免疫耐受诱中发挥作用。 丛聪 袁宇 魏玲玲 陈又南 金熙 李幼平 程惊秋 陆燕蓉关键词:骨髓间充质干细胞 淋巴细胞 增殖抑制