鲁永玲
- 作品数：70 被引量：184H指数：8
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 黄芩抗内毒素活性物质的分离提取与活性研究被引量：10
- 2008年
- 目的从黄芩中提取具有拮抗内毒素（LPS）活性的物质。方法采用大孔吸附树脂和高效液相色谱（HPLC）等技术将黄芩水提物分离成若干组分，应用生物传感器技术检测各组分与LPS的活性中心LipidA的结合活性，动态比浊法鲎试验检测各组分（2．0mg／L）对LPS（0．2μg／L）的中和作用，籍此筛选出活性组分；逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测所筛组分对LPS诱导的RAW264．7细胞的Toll样受体4（TLR4）mRNA表达的影响，ELISA法检测所筛组分对LPS（100μg／L）刺激的RAW264．7细胞释放肿瘤坏死因子α（TNF-α）的影响。结果获得5种HPLC产物S3K1-5，其中S3K1与LipidA结合活性最高，S3K1（2．0mg／L）可显著抑制LPS（0．2μg／L）介导的鲎试剂的凝结反应（P〈0．05）；以LPS（100μg／L）刺激RAW264．7细胞，其TLR4mRNA表达增强，给予40、80、160mg／L的S3K1预处理后能减弱LPS诱导RAW264．7细胞的TLR4mRNA表达（P〈0．05）；单纯LPS刺激RAW264．7细胞释放的TNF-α为（1757．61±207．25）ng／L（对照组），给予40、80、160mg／L的S3K1预处理后TNF-α浓度依次为（1324．53±149．73）、（893．87±140．77）、（799．97±124．21）ng／L，随S3K1剂量递增而减低，均显著低于对照组（P〈0．05）。结论从黄芩中提取到具有拮抗LPS活性的组分S3K1，S3K1在体外对LPS具有一定的中和作用，可抑制LPS诱导的RAW264．7细胞的TLR4mRNA表达，进而抑制LPS诱导的RAW264．7细胞活化。
- 伏建峰曹红卫王宁刘鑫杨东郑新川鲁永玲郑江
- 关键词：黄芩内毒素生物传感器大孔吸附树脂
- Toll样受体9阻断剂及应用
- 本发明涉及一种针对Toll样受体9(TLR9)的特异性阻断剂，所述阻断剂为非甲基化CpG核苷酸序列片段，其核心结构为CGCG核苷酸序列，所述非甲基化CpG核苷酸序列片段的长度为12-30核苷酸。所述阻断剂能特异性与TLR...
- 李彦郑江周红曹红卫王宁鲁永玲赵苛岑向阳
- 栀子拮抗细菌脓毒症有效成分京尼平苷的研究被引量：10
- 2009年
- 目的：脓毒症是感染因素介导的全身炎症反应综合征，是烧伤、创伤和感染性疾病患者的常见并发症，其中内毒素（LPS）是介导细菌脓毒症的重要病原体相关分子模式。重组人活化蛋白C作为FDA批准的第一个用于治疗重度脓毒症的药物，经过6年的应用评估，其疗效已被否定，迄今脓毒症治疗仍缺乏有效药物。本文通过从中药栀子中提取分离具有中和LPS作用的有效成分京尼平苷，研究其拮抗细菌脓毒症的活性。方法：以LPS活性中心LipidA为靶点，采用生物传感器技术，从传统清热中药中筛选出具有LipidA结合活性的栀子，进而利用现代色谱技术分离出具有拮抗LPS活性的单体京尼平苷，通过鲎试剂法检测京尼平苷对LPS的体内外中和作用；RT-PCR法检测京尼平苷对LPS诱导巨噬细胞TLR4和TNF—αmRNA表达的影响；ELISA法检测京尼平苷对LPS刺激RAW264．7细胞产生细胞因子（TNF—α）的抑制作用；观察京尼平苷对脓毒症模型小鼠的保护作用。结果：京尼平苷在体外对LPS具有直接的中和作用，并呈现出较好的剂量效应关系：同时可剂量依赖的抑制LPS刺激引起的RAW264．7细胞的活化（TLR4和TNF-αmRNA的表达下调，细胞因子TNF-α的产生减少）；在体内可降低LPS血症模型动物血中的LPS水平；对致死剂量热灭活大肠埃希氏菌攻击的小鼠具有显著的保护作用。
- 郑新川杨东刘鑫王宁李斌曹红卫鲁永玲卫国周红郑江
- 关键词：细菌脓毒症京尼平苷TNF-ΑMRNARAW264.7细胞栀子重组人活化蛋白C
- 抗菌多肽葛佬素的原核表达纯化及活性鉴定被引量：5
- 2005年
- 目的 原核表达抗菌肽葛佬素,并对其生物学活性进行初步鉴定。方法 应用pET原核表达系统进行目的 蛋白的表达,应用蛋白免疫印迹对蛋白进行鉴定,并采用鲎试剂法,对表达产物的生物活性进行初步鉴定。结果 体外表 达产物经蛋白免疫印迹鉴定,为融合有聚组氨酸标签的葛佬素抗菌肽,鲎试剂检测结果表明,该表达产物对LPS有明显的 中和活性。结论 在原核表达系统中成功表达了具有生物活性的抗菌肽葛佬素。
- 许波周红李慧增鲁永玲王良喜丁国富
- 关键词：抗菌肽原核表达内毒素
- 抗脓毒症新药苦柯胺B介导肝细胞清除LPS及缓解肝损伤的作用研究
- 刘鑫王宁郑新川范仕郡鲁永玲郑江
- 杀菌性/通透性增加蛋白模拟肽中和内毒素作用的研究被引量：10
- 2002年
- 目的 观察 4种杀菌性 /通透性增加蛋白 (BPI)模拟肽 (10 342、10 343、10 344、10 345 )体内外中和内毒素 (LPS)的作用。 方法 采用定量鲎基质显色法测定BPI模拟肽体外中和LPS的能力 ;采用尾静脉给药方法 ,观察BPI模拟肽对LPS攻击小鼠的保护作用 ;测定BPI模拟肽对LPS血症模型大鼠TNFα及IL 6影响。 结果 BPI模拟肽具有中和LPS的能力 ,中和能力随浓度增加而增加 ,其中 10 342的作用最强 ;不同BPI模拟肽对LPS血症小鼠具有强大的保护作用 ,保护率达 90 % ,并可明显降低LPS血症模型大鼠各时相点血清TNFα及IL 6水平。 结论 杀菌性 /通透性增加蛋白 (BPI)模拟肽不仅具有体外中和LPS的能力 ,而且对LPS血症动物具有强大的保护作用。
- 郑江周红鲁永玲肖光夏
- 关键词：内毒素内毒素血症动物实验炎症反应
- 利用RTS500系统进行抗菌肽葛佬素蛋白的体外表达被引量：1
- 2005年
- 目的:构建含目的基因葛佬素(gloverin)的重组子并通过体外快速翻译系统RTS500(rapidtranslationsystem)对其进行表达。方法:采用PCR方法扩增葛佬素cDNA,将其与表达载体pIVEX2.3连接;采用PCR及双酶切方法鉴定连接产物。将含目的基因片段的阳性重组质粒通过体外表达翻译系统RTS500,使其蛋白能在大肠杆菌(E.coli)裂解产物中进行表达。应用蛋白免疫印迹方法对表达产物进行鉴定。结果:pIVEX2.3G重组表达质粒通过体外表达翻译系统RTS500可表达出分子量约为14.4的蛋白;蛋白免疫印迹证实该蛋白为带有多聚组氨酸标签的融合蛋白。结论:抗菌肽葛佬素可在体外大肠杆菌裂解产物中进行表达。
- 罗平许波鲁永玲周红
- 关键词：抗菌肽体外表达PCR
- 2’,5,6’,7-四羟基二氢黄酮醇用于制备治疗脓毒症的药物的用途
- 本发明涉及一种 2’，5，6’，7-四羟基二氢黄酮醇(2’，5，6’，7-tetrahydroxyflavanonol，THF)及其衍生物用于治疗脓毒症的用途。本发明从中药黄芩中提取与分离得到的二氢黄酮醇类化合物THF，...
- 郑江伏建峰周红郑新川刘鑫曹红卫王宁鲁永玲
- 大肠杆菌DNA在失控性炎症反应综合征(SIRS)中的作用
- 为了探讨细菌DNA是否参与SIRS的发生及其可能机制,我们采用碱裂解法提取纯化大肠杆菌杆25922基因组DNA(ECDNA),观察EC DNA引起的小鼠死亡率以及大鼠血清TNF-α、IL-6的变化情况.结果表明 EC D...
- 潘文东周红郑江夏培元秦孝建鲁永玲肖光夏
- 关键词：DNA大肠杆菌
- 白鲜皮生物碱抗内毒素活性的研究被引量：4
- 2012年
- 目的从中药白鲜皮中分离抗内毒素/脂多糖(endotoxin/lipopolysaccharide,LPS)的有效成分,对分离得到的成分进行定性鉴别和体内外抗LPS活性的研究。方法采用大孔吸附树脂、离子交换、聚酰胺和硅胶柱层析等方法从白鲜皮水煎液中分离有效成分,并以试管法进行定性鉴别;在体外,以动态浊度法检测该成分对LPS的中和作用;ELISA法检测其对LPS刺激RAW264.7细胞释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的影响;在体内,观察该成分对热灭活大肠埃希菌攻击小鼠的保护实验。结果从白鲜皮中分离得到具有抗LPS作用的生物碱类成分BXP-A。体外实验结果显示,BXP-A(0.5～1.0 mg/L)可抑制LPS(0.2μg/L)介导的鲎试剂的凝结反应(P<0.05);BXP-A(100～200 mg/L)可显著抑制LPS(100μg/L)诱导RAW264.7细胞释放TNF-α及IL-6(P<0.05,P<0.01);BXP-A(40 mg/kg)可提高注射热灭活大肠埃希菌(1.3×1011CFU/kg)攻击小鼠存活率约40%。结论 BXP-A在体外能较好地中和LPS并抑制其诱导的炎症细胞因子释放,对热灭活大肠埃希菌攻击所致脓毒症模型小鼠具有保护作用。
- 杨东张瑛郑新川刘鑫鲁永玲郑江
- 关键词：白鲜皮内毒素细胞因子脓毒症
