高萍
- 作品数：21 被引量：43H指数：4
- 供职机构：北京师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 中国生物技术领域专利申请问题探讨被引量：1
- 2011年
- 生物技术领域是科技创新最为活跃的领域之一.本文就生物技术领域专利申请中关于不授权主题、生物材料保藏、以及实验数据充分公开等方面的特殊问题进行阐述,为国内科研工作者在寻求专利保护时提供意见和建议,增强科研工作者对自主创新知识产权的保护意识.
- 冯怡高萍冉亮
- 关键词：生物技术生物材料
- P15^(INK4B)高表达对人黑色素瘤细胞G1/S进程的阻滞及与MAPK信号相关性之初探被引量：4
- 2002年
- 利用TdR-N_2O同步法分别获得P15高表达的MLIK6和表达空载体的MLC2的M期细胞和G_1期细胞,~3H-TdR掺入结果显示,与对照组细胞MLC2相比,实验组细胞MLIK6从G_1期进入S期时间延长2h,并且掺入强度明显减弱,DNA合成被抑制。进一步观察了P15^(INK4B)对G_1/S相关调控蛋白的影响,在M期细胞释放8h(晚G_1期细胞)后,与对照组MLC2细胞相比,实验组MLIK6细胞中CyclinD1,CyclinE,Cdk4,C-Myc蛋白水平均降低。相反,P27^(KIP1)的表达却上升。同时探讨了MAPK信号在P15^(INK4B)阻抑A375细胞G_1/S转换中的作用与相关性,结果显示晚G_1期的MLIK6细胞中ERK1,ERK2水平变化不大,而具有活性的P-ERK1和P-ERK2均表现出下降。上述实验表明,P15^(INK4B)可能通过作用于G_1期相关的周期调节蛋白和抑制ERK1和ERK2活性,阻滞G_1/S转换与抑制DNA合成。
- 刘军柳惠图谭信高萍
- 关键词：P15^INK4B人黑色素瘤细胞细胞周期
- p14^(ARF)对人黑色素瘤细胞增殖的影响及其作用机理的初探被引量：10
- 2004年
- ARF (alternativereadingframe)作为INK4a/ARF的 β转录产物 ,能够稳定p5 3,诱导细胞周期阻断或凋亡 .利用高表达p1 4 ARF的人黑色素瘤细胞模型 ,探讨了ARF抑制细胞增殖的分子作用机理 .研究发现p1 4 ARF高表达能将细胞周期阻断在G1和G2期 ,p5 3,p2 1 cip1 和p2 7kip1 蛋白水平明显增强 ,而p ERK1 / 2 ,CyclinD1和CyclinE蛋白水平下降 ,明显抑制细胞生长 .提示p1 4 ARF能通过ERK (extracellularsignal regulatedkinase)
- 彭丽霞张伟柳惠图何大澄高萍
- 关键词：人黑色素瘤细胞P14^ARF细胞周期
- 新基因P15RS表达产物在人胃癌细胞细胞周期中定位的研究
- 2005年
- P15RS是在p15INK4b高表达的人黑色素瘤细胞MLIK6G1期中发现和克隆的新基因.研究表明,该基因可能在G1期作为增殖负调因子起作用.为了观察P15RS基因产物在细胞中的定位,构建了表达P15RS-EGFP融合蛋白的真核表达质粒pEGFP-P15RS.用绿色荧光蛋白GFP作为报告基因,以人胃癌细胞BGC-823为实验模型,将pEGFP-P15RS转染BGC-823细胞.实验表明,P15RS基因表达产物在G1期、S期和G2期均定位于细胞核内,未见在核仁中分布,M期凝缩的染色体上未见.因此,P15RS可能定位在核质中.
- 张小勇张伟高萍常智杰孙一娜柳惠图
- 关键词：人胃癌细胞GFP细胞定位
- P15^(INK4b)对人黑色素瘤细胞周期及G_1期相关调控基因的影响被引量：1
- 2000年
- 人黑色素瘤细胞A375是P15^(INK4b)缺失细胞系,通过细胞转染技术将外源P15^(INK4b)cDNA转染A375细胞,经PCR和Western blot检测,证明构建了P15^(INK4b)稳定表达细胞模型MLIK6。流式细胞光度术结果显示,与对照组MLC2相比,MLIK6细胞G_1期升高11％,S期下降14％。利用TdR-N_2O同步法所得同步的MLIK6和MLC2的M期细胞比例分别达到89.1％和76.8％,而G_1期的比例分别为74.3％和76.4％。~3H-TdR掺入的结果显示,MLIK6从G_1期进入S期的时间比MLC2延长2 h,并且掺入强度明显减弱。进一步探讨P15^(INK4b)对G_1/S相关调控基因的影响,发现G_1期的MLIK6细胞在诱导P27表达升高的同时,cyclinD1,CdK4,cyclinE和c-myc的蛋白水平均降低,其中cyclinD1的抑制在晚G_1期附近最显著,而对cyclinE的抑制则在G_1/S转换处表现突出,癌基因c-myc表达受到明显抑制并贯穿于G_1→S全部时间进程中。说明P15^(INK4b)是通过对G_1期不同阶段细胞周期引擎分子cyclinD1,CdK4,cyclinE和癌基因c-myc的抑制及增加CKI P27延缓了G_1/S进程。
- 刘军童迎凯柳惠图张伟高萍
- 关键词：细胞周期细胞同步化人黑色素瘤细胞调控基因
- 抗癌新药紫龙金对G1期人胃癌细胞中新基因p15RS表达的影响及其作用机理
- p15RS是我室发现和克隆的与p15INK4b基因相关的新基因(GeneBank登录号AF41984．5)。该基因序列总长为4404bp,编码一个具有312个氨基酸残基的蛋白质,已有实验表明,p15RS可能是增殖负调因子...
- 柳惠图张伟张小勇高萍王代树
- 关键词：紫龙金TFP人胃癌细胞G1抗癌新药
- 文献传递
- p14^(ARF)高表达对γ射线诱导的人黑色素瘤细胞凋亡的影响被引量：2
- 2003年
- 抑癌因子ARF可以激活p53诱导细胞周期的阻断或凋亡.为阐明ARF在促进细胞凋亡作用中的分子机理,建立了高表达p14^(ARF)的人黑色素瘤A375细胞模型.实验表明,p14^(ARF)高表达能促进p53富集在细胞核.经γ射线照射后,发现pI4^(ARF)高表达能促进A375细胞凋亡,促使Smac从线粒体释放到胞质中,p53,Bax,Caspase-3,Caspase-9,p21^(cipl)和p27^(kipl)蛋白水平明显提高,而Bcl-2和磷酸化的ERK蛋白水平下降.提示γ射线辐照下,p14^(ARF)促进A375细胞凋亡是ERK介入的依赖p53的以线粒体为核心的凋亡途径.
- 彭丽霞张伟柳惠图何大澄高萍
- 关键词：抑癌因子ARFΓ射线黑色素瘤细胞凋亡A375细胞
- 蛋白激酶Cα对人正常肝和肝癌细胞中Ha-ras基因表达的影响被引量：3
- 2002年
- 运用基因转染技术 ,将蛋白激酶C(PKCα)cDNA正向插入的真核表达重组质粒pXJ4 1 PKCα ,导入人正常肝细胞 (L 0 2 ) ,经蛋白质免疫印迹等检验 ,表明成功构建了稳定过表达PKCα的人正常肝细胞模型 (LT3) ,用LT3和表达反义PKCα的人肝癌细胞HT6为细胞模型 ,通过RT PCR ,蛋白质印迹 (Westernblot)等分析和进一步运用自行构建的真核表达质粒prasGL3,进行荧光素酶活性检测表明 :过表达PKCα可以促进L 0 2细胞的增殖速率 ,并引起Ha ras基因转录水平上升和Ha ras启动子活性升高 ;反之 ,表达反义PKCα的BEL 74 0 2细胞增殖被抑制 ,Ha ras基因转录水平下降 ,Ha ras启动子活性降低 .通过实验我们首次观察到 ,PKCα亚类对Ha ras癌基因表达的影响与其对Ha ras启动子活性的作用有关 ,PKCα可能参与了对Ha
- 冯怡柳惠图高萍
- 关键词：蛋白激酶CΑ肝癌细胞HA-RAS基因表达
- 佛波酯对人胃癌细胞Ha-ras基因启动子及启动子结合蛋白的影响
- 2006年
- 目的探讨佛波酯(PMA)对人胃癌细胞BGC-823 Ha-ras基因启动子活性及启动子结合蛋白活性的影响。方法通过RT-PCR和运用自行构建的真核表达载体prasEYFP转染细胞进行荧光细胞检测,并应用凝胶电泳移动检测S、outhwestern blotting等方法检测PMA(100μg/L)处理BGC-823细胞72和96 h后,对Ha-ras基因表达水平、Ha-ras基因启动子活性以及对Ha-ras启动子结合蛋白的影响。结果经PMA(100μg/L)处理72和96 h,与未处理细胞相比,BGC-823细胞中Ha-ras基因表达显著降低,Ha-ras基因启动子活性分别被抑制65.2%和71.8%;同时两个Ha-ras启动子结合蛋白活性也显著降低,经检测,其分子量分别约为18 kD,35 kD。结论PMA长期处理通过降低人胃癌细胞中Ha-ras启动子结合蛋白活性使Ha-ras启动子活性被抑制,从而在转录水平上调节Ha-ras基因表达。
- 高萍王永军柳惠图
- 关键词：佛波酯人胃癌细胞BGC-823
- 钙调素拮抗剂TFP对BGC-823细胞增殖的影响及其分子机制的探讨被引量：2
- 2003年
- 为了进一步探讨钙调素拮抗剂 TFP对人胃癌细胞增殖的影响及其分子机制 ,利用MTT法及流式细胞光度术检测了 TFP对细胞增殖的影响 ,进一步利用 western blot的方法对细胞中 p1 6INK 4a和 cyclin D的表达水平进行了检测 .结果表明 :TFP处理可以明显提高 BGC- 82 3细胞中 p1 6INK 4a的表达水平 ,而 cyclin D1的水平则明显下降 ,提示 TFP可能通过影响 p1 6IN K4a的表达水平抑制细胞的增殖 .
- 张伟彭丽霞柳惠图高萍
- 关键词：钙调素三氟拉嗪TFPP16^INK4A
