马丽萍
- 作品数：9 被引量：31H指数：4
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HER2启动子在卵巢癌细胞系中控制报告基因特异性表达
- 2000年
- 目的 构建一种能在卵巢癌肿瘤组织中进行肿瘤特异性表达的逆转录病毒载体 ,增强肿瘤基因治疗的靶向性。方法 PCR法获得 HER2基因的启动子片段并将其克隆至逆转录病毒载体 PL XSN中 ,再将突变型绿色荧光蛋白 (mt GFP)基因克隆至该启动子下游 ,将此载体转染 SK- OV3细胞和 MCF- 7细胞。结果 转染 3天后可见部分 SK- OV3细胞呈现绿色荧光 ,而 MCF- 7中无此现象。结论 HER- 2基因启动子可控制报告基因在卵巢癌细胞系中进行高效特异性表达 。
- 郑姝颖王申五马丽萍孙开来
- 关键词：HER2基因卵巢癌报告基因基因治疗
- 逆转录病毒介导的反义bcl-2序列促进足叶乙甙诱导的白血病细胞凋亡被引量：15
- 1998年
- 目的：探讨逆转录病毒介导的反义ｂｃｌ２序列对细胞凋亡的诱导作用。方法：ＰＡ３１７细胞包装逆转录病毒，病毒转导Ｊｕｒｋａｔ细胞后用ＲＴＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法检测ｂｃｌ２ｍＲＮＡ及蛋白表达水平；用流式细胞仪计数及ＤＮＡ电泳检测细胞凋亡。结果：转染反义ｂｃｌ２序列可使内源性ＢＣＬ２蛋白表达下降，提高白血病细胞株对足叶乙甙（Ｖｐ１６）的敏感性，促进细胞凋亡。结论：反义ｂｃｌ２序列能促进Ｖｐ１６诱导的白血病细胞凋亡，为ｂｃｌ２反义技术治疗白血病的临床应用提供了实验依据。
- 曹国栋王申五陈德喜马丽萍潘秀英林文玉
- 关键词：逆转录病毒细胞凋亡反义DNA白血病
- 转导野生型p53基因提高K562细胞对紫外线诱导的细胞凋亡的敏感性被引量：4
- 1998年
- 目的：观察野生型ｐ５３基因转染的Ｋ５６２细胞对紫外线诱导其细胞凋亡的影响。方法：应用基因转染技术将重组野生型ｐ５３的逆转录病毒载体转导ｐ５３蛋白缺失的Ｋ５６２细胞，用紫外线照射Ｋ５６２ｐ５３细胞不同时间后再培养不同时间，用ＤＮＡ片段化和细胞ＤＮＡ原位末端标记技术检测细胞凋亡情况。结果：紫外线照射Ｋ５６２ｎｅｏ和Ｋ５６２ｐ５３细胞８分钟后再培养７～１２小时，Ｋ５６２ｎｅｏ和Ｋ５６２ｐ５３两组细胞的凋亡差异显著。结论：野生型Ｐ５３蛋白在Ｋ５６２细胞表达后，能加速紫外线诱导的Ｋ５６２细胞凋亡。
- 陈德喜王申五曹国栋马丽萍潘秀英
- 关键词：细胞凋亡P53基因紫外线K562细胞
- 转导p16 cDNA对Jurkat细胞的生长抑制作用
- 2000年
- 武莎莎王申五马丽萍刘玉京潘秀英
- 关键词：白血病JURKAT细胞株
- BCL—2蛋白不能抑制VP16诱导的乳腺癌细胞(Bcap37)凋亡被引量：4
- 1999年
- 目的 为了解BCL—2在Bcap37细胞表达增高能否抑制足叶乙甙诱导的细胞凋亡,把重组的逆转录表达载体pLXSN—bcl—2和pLXSN—neo转染Bcap37细胞,经G418筛选获得表达细胞(Bcap37—bcl—2,Bcap37—neo)。方法 经RT—PCR和Western blotting检测bcl—2基因的表达,并用不同浓度的VP16处理两种细胞16小时,经细胞形态观察、细胞凋亡原位显示、MTT实验检测细胞的凋亡变化。结果 两种细胞的凋亡变化没有显著差异。结论 BCL—2高表达不能阻滞VP16诱导的Bcap37细胞凋亡,这与我们以前所做的关于BCL—2能阻滞VP16诱导的K562细胞凋亡作用相反,推测BCL—2的抗凋亡作用可能和细胞类型有关,可能还有其它因素参与BCL—2对细胞凋亡的调节。
- 陈德喜马丽萍曹国栋王申五
- 关键词：VP16乳腺癌
- p53基因转导诱发慢性髓性白血病患者骨髓细胞凋亡被引量：1
- 1999年
- 研究及应用细胞凋亡相关基因参与肿瘤治疗是基因治疗的一个重要领域。细胞凋亡相关基因中研究得最深入的是p53基因。已经有报道转移野生型p53基因抑制肿瘤细胞的体外实验,或转p53基因抑制动物体内成瘤性的实验。为进一步接近人体内基因治疗,我们采用逆转录病毒载体将p53基因转导至CML细胞,初步的实验结果提示,转导的p53基因能引起白血病细胞生长抑制和凋亡。
- 马丽萍童春荣王申五陈德喜
- 关键词：P53基因逆转录病毒载体基因转导细胞凋亡慢性髓性白血病
- 逆转录病毒载体介导的bcl-2反义RNA促进胃癌MGC-803细胞凋亡
- 1999年
- ｂｃｌ－２是Ｔｓｕｊｉｍｏｔｏ在Ⅱ型Ｂ细胞淋巴瘤中发现的一种基因，其过度表达能抑制撤退生长因子、射线、热休克、化疗药物、病毒及促凋亡基因等多种因素诱导的细胞凋亡。ｂｃｌ－２蛋白高表达赋予肿瘤细胞对多种化疗药物的抗性，导致化疗失败或复发。逆转ｂｃｌ－２的表达可能提高化疗效果。我们将ｂｃｌ－２的编码序列反向插入逆转录病毒表达载体中并转导实体瘤胃癌细胞株ＭＧＣ～８０３，观察ｂｃｌ－２反义序列对实体瘤肿瘤细胞的作用。１方法 重组体的构建、包装及转导：ｂｃｌ－２ ｃＤＮＡ全长 １．９ ｋｂ（由王洛权博士提供），插入逆转录病毒表达载体ｐＬＸＳＮ中，ＰＣＲ法鉴定ｂｃｌ－２的插入方向。
- 曹国栋王申五武莎莎马丽萍潘秀英
- 关键词：MGC-803细胞凋亡BCL-2反义RNA
- 转染野生型p53对乳腺癌细胞所致细胞凋亡的研究被引量：4
- 2000年
- 目的 为研究 p5 3对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响 ,用重组人野生型 p5 3全长 c DNA的逆转录病毒载体转染Bcap37细胞 ,观察其增殖的凋亡变化。方法 应用 Northernblotting和 Western blotting检测 Bcap37细胞 p5 3表达变化 ,流式细胞仪计数检测细胞增殖及周期变化 ,MTT及苔盼兰计数观察紫外线刺激后细胞存活率差异 ,DNA末端原位标记技术检测细胞凋亡变化。结果 外源野生型 p5 3在Bcap37细胞表达后 ,使细胞生长速度变慢 ,克隆形成所需时间增加 ,并使细胞周期发生变化 ,主要表现在 G1 期生长抑制 ,即细胞停滞于 G1 期 ,紫外线刺激后 ,细胞存活率比对照细胞下降 2 0 %～ 40 % ;细胞凋亡明显增加 (所有数据均 P<0 .0 1)。结论 转染野生型 p5 3的 Bcap37细胞出现生长抑制 ,并加速 U
- 马丽萍陈德喜王申五
- 关键词：乳腺癌细胞凋亡转染野生型P53基因
- 转导野生型p53的K562细胞出现生长抑制和凋亡被引量：6
- 1998年
- 把重组有编码野生型p53的逆转录病毒载体转导到p53蛋白缺失的K562细胞,以观察野生型p53蛋白在K562细胞表达后对K562细胞增殖和凋亡的影响。应用RT-PCR和Western印迹杂交方法检测K562细胞p53表达,应用流式细胞仪计数检测细胞的增殖,采用梯形DNA和细胞形态学方法检测细胞凋亡变化。研究结果表明:感染pLXSN-p53病毒24小时后,K562细胞p53表达阳性,K562-p53细胞的生长受到抑制,少数细胞进入凋亡状态。结论提示,野生型p53可促进p53表达阴性的K562细胞生长抑制与凋亡。
- 陈德喜王申五曹国栋马丽萍潘秀英
- 关键词：K562细胞P53基因PLXSN
