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华南地区HGV的流行状况和同源性分析被引量：3: 1999年; 目的了解华南地区庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的流行状况及ＨＧＶ不同株和不同基因区的同源性。方法采用逆转录聚合酶链反应技术（ＲＴ－ＰＣＲ）检测来自广东、香港、云南的不同人群血清标本共１９９１份。对其中２０份的５端非编码区（５ＵＴＲ）２３８ｂｐ和３份非结构蛋白５区（ＮＳ５）６２１ｂｐ进行了序列测定和同源性分析。结果一般人群ＨＧＶＲＮＡ阳性率为（０．７３～１．３４）％，献血员（２．５２～２．９０）％，静脉吸毒者１７．８６％，血液透析患者１４．１３％，接受骨髓移植者４１．６７％，在非甲～戊型肝炎病人为２５．３０％，肝细胞癌１４．４８％，乙型肝炎７．２２％，丙型肝炎（８．３３～１６．１３）％。不同株５ＵＴＲ同源性介乎（９０．４０～１００）％；不同株ＮＳ５区核苷酸同源性（９３．３０～９４．００）％，氨基酸为（９７～９９．２）％。结论接受骨髓移植、血液透析、静脉吸毒者，乙型、丙型、非甲～戊型肝炎病人及肝细胞癌患者是ＨＧＶ的高感染人群。不同ＨＧＶ株存在一定的地区性差异；同一地区不同人群的ＨＧＶ株变异不明显；; 李刚廖家杰马会慧梁英杰梁英杰姚春斓姚集鲁汤文辉崇雨田陈青; 关键词：庚型肝炎病毒 DNA序列分析同源性 PCR

HCV5＇端非编码区cDNA的体外转录被引量：1: 1996年; 采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）从广东省一例慢性丙型肝炎病人血清中获得丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）５＇端非编码区（５＇ＮＣＲ）３０２ｂｐ的ｃＤＮＡ片段，经补齐和提纯后插入ｐＵＣ１９质粒，获得的重组体ｐＵＮ进行序列测定。将ｐＵＮ的目的基因亚克隆进体外转录载体ｐＳＰＯＲＴＩ多克隆位点的ＥｏｏＲＩ和ＰｓｔＩ切点之间，所得重组体ｐＳＮ线性化后由Ｔ＿７ＲＮＡ多聚酶及ＳＰ６ＲＮＡ多聚酶引导体外转录反应，产物经凝胶电泳及特异引物ＲＴ－ＰＣＲ，证实ＳＰ６引导的是正义ＲＮＡ，Ｔ７合成的是反义ＲＮＡ，其大小分别力４２９ｂｐ和３６２ｂｐ。并证实所得ＲＮＡ力ＨＣＶ５＇ＮＣＲｃＤＮＡ转录而来。获得的ＨＣＶ５＇ＮＣＲｃＤＮＡ和ＲＮＡ在常规逆转录和ＰＣＲ步骤中用于设立有效的模板对照，对消除假用性及评估试剂有重要意义。同时，ＨＣＶ５＇ＮＣＲ体外转录载体的构建可用于制各ＲＮＡ探针和反义ＲＮＡ，改进后还可作为定量ＰＣＲ的竞争性模板。; 李刚姚集鲁彭文伟王斌陈青; 关键词：丙型肝炎病毒分子克隆体外转录 CDNA

一种新型肝炎病毒──庚型肝炎病毒的cDNA克隆被引量：18: 1996年; 一种新型肝炎病毒──庚型肝炎病毒的ｃＤＮＡ克隆李刚，姚集鲁，陈青，谭德，汤文辉（中山医科大学传染病学教研室；广州，５１０６３０）主题词庚型肝炎病毒（ＨＧＶ），逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），分子克隆中图号Ｒ５１２．６２；Ｑ５２３．１采用ＲＴ－ＰＣ...; 李刚姚集鲁陈青陈青陈青; 关键词：庚型肝炎病毒聚合酶链反应克隆 CDNA

庚型肝炎病毒广东株与云南株5′端非编码区的比较: 1997年; 目的:明了中国不同地区(包括广东与云南)庚型肝炎病毒(HGV)株5′端非编码区(NCR)序列的差异。方法:采用逆转录聚合酶链反应扩增 HGV 5′NCR cDNA 片段,产物为238bp,纯化后直接测定核苷酸序列。结果:HGV 广东株与云南株5′NCR 的同源性为96.97%,他们与国外株的同源性介乎86.36%～90.91%。结论:广东株与云南株5′NCR 的同源性较大,与国外分离株的同源性较小;不同碱基在序列中呈散在分布;HGV 核酸变异可能与地域因素有关。; 李刚姚集鲁陈青汤文辉谭德; 关键词：庚型肝炎病毒聚合酶链反应非编码区

庚型肝炎病毒5’端非编码区cDNA的序列分析被引量：2: 1997年; 为了解国CBV-C/HCV株的基因序列与国外分离株的同源性状况，对我国GBV-C/HCV的5’端非编码区（5’NCR）。cDNA进行了序列测定。参考国外发表的序列资料，在相对保守的5’NCR设计两对HGV特异性引物。采用热变性法提取云南省一个静脉吸毒者血浆中的GBV－C／HGVRNA逆转录为cDNA后进行巢式聚合酶链反应（PCR）扩增，获得238bp的片段。PCR产物纯化后直接经双脱氧链末端终止法测定核苷酸序列。与国外分离株比较，同源性为86.36％～90.9t％，微分区域变异较大。结果表明，所扩增片段属于GBV－C／HGV基因，所测序列可为引物设计据供依据。对核酸变异性分析有一定意义。; 李刚姚集鲁陈青彭文伟汤文辉; 关键词：庚型肝炎病毒 CDNA

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陈青

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