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实时荧光定量PCR方法检测幼兔粪便双歧杆菌的实验研究被引量：7: 2006年; 目的:应用实时荧光定量PCR技术对实验幼兔粪便内双歧杆菌进行定量分析．方法:依据双歧杆菌16S rDNA序列设计属特异性引物,以常规PCR产物经克隆后的质粒 DNA为标准品,经光谱定量、梯度稀释后制备标准曲线．抽提正常对照组和双歧杆菌喂饲组幼兔粪便内的细菌基因组DNA,用实时荧光定量PCR技术定量分析样品中双歧杆菌数量．结果:两组幼兔粪便内双歧杆菌测定结果均成阳性,双歧杆菌喂饲组0．05 g湿粪内菌量的对数值较对照组显著升高(6．37±0．58 vs 5．18 ±0．98,P=0．004)．结论:实时荧光定量PCR方法可正确定量实验兔粪便内双歧杆菌数量．; 陈津津蔡威; 关键词：实时荧光定量PCR 双歧杆菌粪便

双歧杆菌定量分析技术研究进展被引量：3: 2006年; 传统细菌培养计数法是依据细菌表型特征来对双歧杆菌进行鉴别计数的,MTPY和BSM培养基是经常使用的双歧杆菌培养基．近年来包括点杂交、荧光原位杂交、荧光原位杂交结合流式细胞计数和荧光实时定量PCR技术在内的以核糖体及其编码基因核酸序列为鉴别基础的分子生物学技术被广泛用于双歧杆菌的定量定性分析,其中荧光原位杂交结合流式细胞计数和荧光实时定量PCR技术是目前较为理想的方法．; 陈津津蔡威; 关键词：双歧杆菌计数杂交

脓毒症患者机体德代谢变化和营养支持: 脓毒症(sepsis)做为感染情况下的全身炎症反应综合征(systematic inflammatory response syndrome SIRS),目前对其病理生理变化人们已有了较深刻的认识。机体分解代谢亢进或高代...; 陈淼戴李华盛颖徐红华陈津津董利军; 关键词：脓毒症全身炎症反应综合征代谢营养支持; 文献传递

慢性心力衰竭急性发作急诊诊治流程管理初探: 慢性心力衰竭急性发作是一种急诊科常见而又具有高致死性的疾病。我院急救中心心衰科研小组为了对慢性心衰急性发作患者进行迅速正确地分诊、诊断、鉴别诊断及治疗,根据回顾性研究结果,结合美国心脏病学会和美国心脏学会(ACC/AHA...; 杨旭峰戴李华陈淼陈津津钱嵘刘佳福董利军; 文献传递

应用Real-time PCR定量分析PN幼兔肠道双歧杆菌和乳杆菌的变化: 目的:应用Real-time PCR技术对:PN幼兔肠道内双歧杆菌和乳杆菌进行定量分析。方法:生后2 周的新西兰种白兔16只,分成对照组和PN组。对照组为正常兔食饲养,PN组幼免完全肠外营养,10d 后自直肠取出新鲜粪便...; 陈津津王翔蔡威; 文献传递

双歧杆菌减轻肠外营养幼兔肝损害的实验研究被引量：17: 2006年; 目的长期肠外营养（PN）患儿容易发生肝损害并发症，如肝脂肪变、胆汁淤积，甚至肝衰竭，其机制仍不清楚，可能和肠屏障功能障碍有关。近来双歧杆菌作为一种益生菌，在调节肠道微环境、保护肝脏中的作用日益受到重视。本研究拟通过给PN幼兔添加双歧杆菌，探讨其保护机制。方法生后3周的新西兰种白兔27只，体重200-250g。分为3组，PN组10只，PN＋双歧杆菌组8只，对照组9只。双歧杆菌组每日经胃管注入丽珠肠乐溶液1ml／只（含青春双歧杆菌0．5×10^8），PN组注人生理盐水1ml／只。PN持续10d，取血测肝功能、内毒素水平；作肝脏组织病理分级评分；作回肠黏膜显微测量；作内脏组织匀浆和血培养观察细菌移位。结果双歧杆菌组幼兔肝功能明显改善，血清总胆红素和胆汁酸含量较PN组显著下降（P〈0．05）。病理切片显示双歧杆菌组幼兔肝小叶完整，细胞形态基本正常，个别存在轻度炎症细胞浸润和纤维组织增生。而PN组则出现明显肝细胞变性（主要为脂肪变性）、胆管增生和胆汁淤积。参照Loff肝脏病理学评分标准，显示PN组分值明显高于对照组和双歧杆菌组（P〈0．05），而双歧杆菌组和对照组比较差异无显著性意义（P〉0．05）。肠道病理切片的计算机显微测量结果显示，双歧杆菌组幼兔回肠绒毛高度、隐窝深度、绒毛面积显著高于PN组（P〈0．05），和对照组比较差异无显著性意义（P〉0．05）。PN组幼兔血浆内毒素水平显著升高（P〈0．001），双歧杆菌组内毒素水平处于正常范围。内脏组织、器官细菌培养结果显示，PN组幼兔肠菌移位率明显高于双歧杆菌组（P〈0．01）。结论双歧杆菌可能通过降低肠黏膜通透性，避免幼兔产生肠菌移位和内毒素血症，保护肝功能。; 王翔蔡威洪莉陈津津吴江陶晔璇; 关键词：细菌移位胃肠外营养

外源性双歧杆菌对肠外营养幼兔肠道益生菌的影响被引量：4: 2007年; 目的:研究外源性双歧杆菌对肠外营养(PN)幼兔肠道益生菌的影响。方法:生后2w的新西兰种白兔24只,分成对照组(n=7)、PN组(n=9)和PN+双歧组(n=8)。对照组为兔食喂养,PN组幼兔完全肠外营养,PN+双歧组幼兔口服青春双歧杆菌0.5×108/d,10d后自直肠取出新鲜粪便。应用SYBR Green I Real-time PCR法,定量检测粪便中双歧杆菌和乳杆菌含量。结果:Real-time PCR法的检测限最低为102PFU,凝胶电泳证实合成探针具有属特异性。粪便细菌定量结果显示,PN组幼兔湿粪(0.05g)中双歧杆菌和乳杆菌含量(对数值)分别为4.62±0.24和4.29±0.49,显著低于对照组(分别为5.84±0.92、5.14±1.07log)和双歧组(6.41±0.39,5.46±0.61log)。结论:SYBR Green I Real-time PCR法能够准确、迅速地对幼兔粪便双歧杆菌和乳杆菌进行定量检测。PN幼兔口服双歧杆菌后,其粪便中双歧杆菌和乳杆菌含量显著增加。; 王翔陈津津洪莉吴江陶晔璇蔡威; 关键词：双歧杆菌乳杆菌 REAL-TIME 肠外营养

双歧杆菌对肠外营养幼兔肠道通透性的影响被引量：2: 2008年; 目的本研究应用高效液相色谱法（high performance liquid chromatography．HPLC），检测幼兔尿液中乳果糖、甘露醇含量，计算其排出率比值，探讨双歧杆菌对肠外营养幼兔肠道通透性的影响。方法2周龄新西兰种白兔21只，分为3组，对照组6只，PN组8只，PN＋双歧杆菌7只。对照组幼兔为母乳喂养，PN组幼兔完全肠外营养，PN＋双歧组幼兔经胃管予青春双歧杆菌0．5×10^8，共10d。于第九天分别经胃管予3组幼兔灌服乳果糖和甘露醇溶液2ml（含乳果糖100mg，甘露醇50mg）。收集24h尿液。经处理后应用高效液相离子色谱法检测尿中乳果糖、甘露醇含量，分别计算排出率及其比值。结果上述色谱条件下，尿液中甘露醇和乳果糖能得到良好分离。该法检测上述2种糖的日内精密度：乳果糖为3．03％～3．57％，甘露醇为2．40％～3．31％；日间精密度：乳果糖为3．43％～4．0％，甘露醇为1．73％～2．84％。乳果糖和甘露醇加样回收率分别为99．6％～100．7％和97．3％～100．7％。3组尿液中乳果糖排出率分别为0．019±0．005、0．099±0．022和0．025±0．01，甘露醇排出率分别为1．142±0．17、2．43±0．24和1．147±0．67，比值分别为0．019±0．005、0．038±0．008和0．020±0．004。结论高效液相离子色谱法能够快速、简单、灵敏地测定幼兔尿中乳果糖、甘露醇含量；双歧杆菌能够降低肠外营养幼兔肠道通透性。; 王翔洪莉陈津津蔡威; 关键词：双歧杆菌胃肠外营养高效液相色谱法

应用real-time PCR测定幼兔肠道内双歧杆菌和乳杆菌的变化被引量：6: 2007年; 目的：通过研究PN过程中肠道双歧杆菌和乳杆菌的变化，探讨PN导致肠屏障功能障碍的机制．方法：将新西兰种白兔16R，分成对照组（正常兔食饲养）和PN组（幼兔完全肠外营养）．10d后自直肠取出新鲜粪便，抽提所有细菌DNA，常规PCR检测合成的双歧杆菌和乳杆菌属引物的特异性．应用青春双歧杆菌和植物乳杆菌作外标准品，梯度稀释制作标准曲线，作灵敏度测定．应用SYBRGreenIReal-timePCR法，定量检测粪便中双歧杆菌和乳杆菌含量．结果：琼脂糖凝胶电泳显示两种引物特异性良好，灵敏度达到10^2个菌．溶解曲线显示单一峰形，说明没有引物二聚体形成．粪便细菌定量结果显示，PN组幼兔湿粪（0．05g）中双歧杆菌和乳杆菌含量显著低于对照组（4．62±0．24，4．29±0．49vs5．84±0．92．5．144±1．07；P〈0．01）．结论：Real-timePCR法能准确迅速地对幼兔粪便双歧杆菌和乳杆菌进行定量检测．长期肠外营养导致的肠屏障障碍可能与肠内双歧杆菌和乳杆菌的数量减少有关．; 陈津津蔡威; 关键词：双歧杆菌乳杆菌实时荧光定量PCR技术

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陈津津

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