陈新刚 作品数:7 被引量:7 H指数:1 供职机构: 中国科学院上海细胞生物学研究所 更多>> 发文基金: 贵州省科学技术基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
人醛缩酶A单克隐抗体的制备及人肝癌醛缩酶A的纯化 1994年 本文提纯并鉴定了人醛缩酶A、B、C(human Aldolase A、 B、C,hA-LD-A、B、C)。用hALD-A和佐剂免疫Balb/C小鼠,将免疫小鼠的脾细胞和P3-X63-Ag8.653骨髓瘤细胞用50%PEG作融合剂进行融合,融合率100%,用ELISA进行筛选,hALD-B、C作为阴性对照,选取仅对hALD-A有反应的阳性孔作克隆化,得到3株抗hALD-A的杂交瘤细胞株。克隆化的杂交瘤细胞扩增后注入经过降植烷处理的Balb/C小鼠腹腔。腹水经过盐析和DEAE-Cellulose52层析后,得到纯化的McAb,亚类分别为IgG2b、IgGI、IgM,腹水效价分别为1×10-11,1×10-8,1×10-9, 亲合常数分别为7.5×1010、3.5×109、2.3×109 3株细胞株分泌的单克隆抗体通过Im-munoblotting得到证实。 用McAb与CNBr-Sepharose 4 B偶合制合制成了亲和层析柱,从人肝癌组织中提纯了ALD-A。SDS-PAGE显示为单一区带,但其电涂迁移率较hALD-A滞后。 陈新刚 舒建德 谢弘 刘德腾 孙培南关键词:单克隆抗体 人醛缩酶A单克隆抗体的ELISA用于肝癌的初步探讨诊断 1994年 建立人醛缩酶A单抗及其竞争性ELISA法测定血清ALD-A、最小检出量为5ng/m1,对ALD—B和C无交叉反应。测定60例正常人血清ALD—A为131±24ng/ml,上限176ng/ml,肝癌为554±163ng/ml,超过上限179ng/ml者95.5%(44/45),胃癌为482±241ng/ml,增高者75%(9/12)。本法灵敏度高、特异性强、方法简便、所用单抗可大量制备,能使ALD—A检测标准化,可用于临床肝癌诊断测定。 舒建德 陈新刚 曹芳 谢弘 刘德腾 孙培南血清醛缩酶Km值作癌瘤诊断指标的初步探讨 1989年 醛缩酶(ALD)有A、B、C三型同工酶,患癌瘤时其酶谱发生“返祖”变化。已有应用1,6—二磷酸果糖(FDP)和1—磷酸果糖(FlP)双底物测定酶活力比值(FDP/FlP)、免疫沉淀和放射免疫分析法测定的报道。ALD的同工酶属原级同工酶,其动力学参数不同,但健康人与癌瘤患者血清ALD Km值有无变化,尚未见报道。为了探讨这种变化以及能否以此作为癌瘤诊断的一项指标,作者以FDP为底物,用血清ALD Km值的测定法,对71例癌瘤患者,同时对健康人、 舒建德 蔡德庭 陈新刚 关琼 周炳全 高晓玲关键词:醛缩酶 肿瘤诊断 KM值 抗醛缩酶 A 抗体的制备及鉴定——血清醛缩酶 A 的 ELISA 及用于肿瘤诊断的研究之一 被引量:1 1992年 Schapira 等证明醛缩酶(Aldo-lase,ALD)A 型存在于各种肿瘤组织中,肿瘤 ALD 是 A 型而不是 B 型。Asaka 等的工作表明,人血清 ALD-A 的测定,对肝癌和消化道肿瘤的诊断优于 AFP 和 CEA,是有价值的诊断指标。用抗 ALD-A 抗体建立 ELISA 测定人血清 ALD-A,经 MEDLARS 检索未见报道。我们已建立了人血清 ALD-A 的 ELISA,本文仅报道抗 ALD-A 的 IgG 的制备及鉴定,ELISA 的建立及人血清 ALD-A 的测定另文报道。材料和方法1、抗原:兔肌 ALD-A 系中国科学院上海生物化学研究所产品,用醋酸纤维素膜电泳(PH8.6,离子强度0. 舒建德 陈新刚 吴琼 陈利红关键词:抗体 肿瘤诊断 人醛缩酶A单抗ELISA对原发性肝细胞癌诊断价值的探讨 被引量:6 1996年 从人骨骼肌纯化醛缩酶(ALD)A,制备抗人ALD-A单克隆抗体,首次建立了测定血清ALD-A的竞争性ELISA,最小检出量0.1ng/ml,对ALD-B和C无交叉反应。60例正常人血清含量131±24ng/ml,上限179ng/ml,均未超过此限;原发性肝细胞癌45例554±193ng/ml,阳性率95.5%(44/45),两组差异有非常显著意义(P<0.001)。对肝癌诊断有实用价值。单抗可大量制备,能使ALD-A检测标准化。 舒建德 谢弘 陈新刚 刘德滕 曹芳关键词:肝细胞癌 醛缩酶 单克隆抗体 ELISA 贵州部分人群血清载脂蛋白 B_(100)与 AI 含量的测定及初步临床观察 1992年 载脂蛋白(apolipoprotein,Apo)B_(100)与 AI 分别是低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)的重要组成蛋白质,在动脉粥样硬化(AS)形成过程中,LDL 与 AS 呈正相关,HDL 与 AS 呈负相关。新近发现:血清 Apo B_(100)升高和 AI 下降具有判别冠心病的意义,尤以 B_(100)/AI 的辨别力最高,优于血脂的指标,特别是对那些胆固醇含量正常的动脉粥样硬化病人有重要的预测价值,有助于冠心病的早期发现和提高诊断率。鉴于省内未见报道,我们对都匀地区170名健康人及省内三家医院的110例心脑血管等6组疾患病人,作了血清 Apo B_(100)、AI、血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)的含量测定,并初步作了临床观察。现报告如下。 吴琼 舒建德 陈新刚 谯鲜珍关键词:载脂蛋白 血清 血清醛缩酶Km值作癌瘤鉴别诊断的初步探讨 1989年 醛缩酶(ALD)有A、B、C三型同工酶,因属原级同工酶,其Km值不同。为探讨血清ALD Km值的变化以及能否用此作癌瘤的鉴别诊断,作者对癌瘤患者及健康成人、新生儿脐血、非瘤疾患和良性肿瘤4个对照组,测定其血清ALD Km及酶活性。结果表明本法对癌瘤有一定特异性,阳性率78%(56/71例)。 舒建德 蔡德庭 陈新刚 吴琼 周炳全 高晓玲关键词:醛缩酶 肿瘤