陈慧慧
- 作品数：18 被引量：32H指数：4
- 供职机构：河北农业大学更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 慢病毒载体介导猪繁殖与呼吸综合征病毒E蛋白在猪肺泡巨噬细胞中的表达
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)E蛋白是病毒最小的囊膜蛋白,与其它囊膜糖蛋白(GP2a、GP3、GP4)以复合物的形式存在于囊膜中。研究认为E蛋白是一种粒子孔道蛋白,推测与病毒释放和致病过程有关。为研究E蛋白的致病作...
- 陈慧慧仲飞李秀锦张考李文艳温洁霞
- 文献传递
- IL-7基因与IL-2基因对DNA疫苗免疫原性增强的协同作用
- 白细胞介素(IL)2和IL-7是动物体重要的细胞因子。IL-2具有促进T细胞的增殖与分化、激活细胞毒性淋巴细胞和巨噬细胞的活性;IL-7具有促进T细胞和B细胞的增殖的活性。研究证明IL-7促进T细胞介导的免疫依赖于IL-...
- 李秀锦陈慧慧仲飞能昌爱韩晓敏王璐孙岩
- 文献传递
- 重组猪肺表面活性蛋白A在体外可抑制PRRSV感染宿主细胞
- 2012年
- 表面活性蛋白A(SP-A)是动物肺泡表面重要的天然防御物质。猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的宿主细胞是猪肺泡巨噬细胞(PAM),SP-A是否对PRRSV的感染有影响尚不清楚。为此本文通过制备重组SP-A在体外分析了SP-A对PRRSV感染的影响。首先采用PCR方法从含有猪SP-A基因的质粒中扩增SP-A基因。
- 张峰仲飞李秀锦王幸兴张考陈慧慧李振李文艳潘红丽韩冬梅
- 关键词：宿主细胞PRRSV感染肺表面活性蛋白肺泡巨噬细胞信号肽序列分泌型表达载体
- IL-2与IL-7基因对犬细小病毒VP2 DNA疫苗在小鼠的免疫增强作用
- <正>试验目的:探讨犬白细胞介素-2(cIL-2)与犬IL-7(cIL-7)基因对犬细小病毒(CPV)VP2蛋白DNA疫苗免疫增强的协同作用。【方法】利用含内部核蛋白体进入位点(IRES)的真核表达载体构建cIL-2和c...
- 陈慧慧王利月林洪羽王永红张考李文艳温洁霞仲飞李秀锦
- 文献传递
- 含绿色荧光蛋白基因的PRRSV感染性克隆的制备及特性分析
- 2012年
- 为直观形象地观察PRRSV对细胞的感染,本文拟构建含有绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组猪呼吸与繁殖综合征病毒(PRRSV)感染性克隆,并对其某些特性进行分析。首先依据PRRSV病毒株(GenBank:AY545985.1)的序列,以其感染性克隆重组质粒(FL-12)和含有GFP基因的质粒(PCDNA-EF1-GFP)为模板,采用重叠PCR的方法,扩增出上。
- 张考仲飞李秀锦陈慧慧李文艳温洁霞
- 关键词：感染性克隆PRRSV感染病毒株非结构蛋白体外转录
- 人CD14信号肽介导卵清蛋白在HEK293T细胞的高效表达
- 2012年
- 本试验将人CD14信号肽序列与卵清蛋白(ovalbumin,OVA)基因融合,旨在提高OVA在非输卵管上皮细胞中的表达。提取鸡输卵管上皮细胞总RNA,经反转录合成的cDNA,再利用修饰的特异性引物,通过PCR从cDNA中分别扩增出5'端与人CD14信号肽序列融合和非融合的OVA基因,并将它们分别插入到真核表达载体pcDNA3.1A中,构建成表达载体pcDNA-CD14sp-OVA和pcDNA-OVA。经磷酸钙介导,将质粒转染至HEK293T细胞,使其进行表达,用鼠抗OVA单克隆抗体通过免疫印迹(Western blot)法检测OVA表达水平。结果表明:本试验扩增的OVA基因序列与GenBank中的序列(登录号NM_205152)一致,构建的人CD14信号肽序列融合OVA基因的表达载体结构正确。经过在HEK293T细胞的表达,融合人CD14信号肽序列的重组蛋白OVA的表达水平明显得到提高。结果提示,融合人CD14信号肽序列后的重组蛋白OVA在非输卵管上皮细胞中的表达水平明显提高,为OVA基因作为DNA疫苗模式抗原的应用提供了必要的条件。
- 能昌爱李秀锦仲飞李振张峰陈慧慧张考韩冬梅
- 关键词：卵清蛋白重组蛋白表达
- IL-2与IL-7基因对犬细小病毒VP2 DNA疫苗的协同免疫增强作用
- 犬细小病毒病是危害我国养犬业最为严重的传染病之一。目前对该病尚无有效的治疗药物，主要通过接种弱毒疫苗进行预防。但接种弱毒疫苗后易出现亚临床感染或弱毒苗毒力返强等现象，近年来，DNA疫苗受到国内外学者的广泛关注，因为它既可...
- 陈慧慧
- 关键词：犬细小病毒病DNA疫苗
- PRRSV囊膜GP5/M双基因表达载体的构建
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是危害养猪业发展最严重的传染病之一,目前由于缺乏有效的疫苗未能得到有效控制。已知PRRS病毒(PRRSV)主要感染猪的肺泡巨噬细胞(PAM),我们在研究猪天然防御活性物质时发现,肺泡表面活性...
- 陈慧慧王利月林洪羽王永红张考李文艳温洁霞仲飞李秀锦
- 犬细小病毒NS1非结构蛋白可诱导细胞凋亡被引量：8
- 2012年
- 【目的】研究犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)非结构蛋白NS1在CPV引起宿主细胞凋亡中的作用,初步探讨CPV引起细胞凋亡的机制。【方法】首先采用PCR方法从犬细小病毒基因组中扩增NS1编码基因,然后利用pcDNA3.1A质粒构建NS1真核表达载体pcDNA-NS1,并通过HEK293FT细胞瞬时表达NS1重组蛋白,用Western-blot检测以确定重组NS1蛋白能否在真核细胞中表达。然后用CPV感染和用pcDNA-NS1表达载体转染F81宿主细胞,通过AnnexinV/PI双染法检测磷脂酰丝氨酸外翻和通过化学发光法检测caspase-3/7活性,分析感染CPV或转染NS1基因对F81宿主细胞凋亡的影响。【结果】结果表明,本实验扩增的NS1基因序列与GenBank的序列一致,构建的表达载体结构正确,并能够介导NS1基因在真核细胞中表达。感染CPV和转染NS1基因均能诱导F81细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻和明显提高细胞内caspase-3/7的活性,表明CPV和NS1蛋白均能引起细胞的凋亡。【结论】CPV诱导宿主细胞凋亡与其编码的NS1非结构蛋白有关。
- 潘红丽仲飞潘素敏李秀锦张峰张考陈慧慧
- 关键词：犬细小病毒NS1蛋白细胞凋亡
- IL-7基因与IL-2基因对DNA疫苗免疫原性增强的协同作用
- 2012年
- 白细胞介素(IL)2和IL-7是动物体重要的细胞因子。IL-2具有促进T细胞的增殖与分化、激活细胞毒性淋巴细胞和巨噬细胞的活性;IL-7具有促进T细胞和B细胞的增殖的活性。研究证明IL-7促进T细胞介导的免疫依赖于IL-2。由于IL-2和IL-7 IL-2均有刺激淋巴细胞增殖作用。
- 李秀锦陈慧慧仲飞能昌爱韩晓敏王璐孙岩
- 关键词：免疫原性细胞介导淋巴细胞增殖IL-7
