陈夏
- 作品数:9 被引量:8H指数:2
- 供职机构:重庆师范大学更多>>
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- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 白唇竹叶青蛇毒5′-核苷酸酶的分离纯化及性质被引量:7
- 2008年
- 用DEAE-SephadexA-25、Sephadex-G-100和CM-SephadexC-50三步柱层析分离法,从白唇竹叶青(Trimeresurus albolabris)蛇毒中分离纯化出具有5′-核苷酸酶活性的组分。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其分子量为48.03kDa,HPLC柱层析图谱为单一峰。该组分是一个糖蛋白,以一磷酸腺苷(AMP)为底物时,其酶活力为330.33μg Pi/(min·mg);而以二磷酸腺苷(ADP)为底物时,其酶活力为123.56μg Pi/(min·mg)。金属离子Zn2+、Fe3+和Cu2+对5′-核苷酸酶活性有显著的抑制作用,EDTA可完全抑制其酶活性。该酶的最适pH为9,最适温度为50℃。该组分还具有抑制由ADP诱导的血小板聚集的生物功能。
- 陈夏余晓东邓敏李卉林亦心和七一柳建平
- 关键词:分离纯化
- 白唇竹叶青蛇(Trimeresurus albolabris)毒类凝血酶基因工程菌的构建与表达
- 从中国白唇竹叶青毒腺提取总RNA,通过RT-PCR方法扩增出类凝血酶基因,将该基因克隆到载体pMD18-T载体中并进行测序,由此推测出其相应的氨基酸序列。再将该基因克隆到pET-32a中,以融合蛋白的形式在大肠杆菌BL2...
- 林奕辛余晓东和七一邓敏李卉陈夏
- 文献传递
- 白唇竹叶青蛇毒5'-核苷酸酶的制备方法
- 本发明公开了一种白唇竹叶青蛇毒5′-核苷酸酶的制备方法,该制备方法依次包括以下步骤:(1)白唇竹叶青蛇毒的预处理;(2)DEAE-Sephadex A-25阴离子交换层析初步分离;(3)Sephadex-G-100层析纯...
- 余晓东陈夏
- 文献传递
- 虎斑游蛇中国大陆亚种(Rhabdophis tigrinus lateralis)颈背腺结构及其毒液中蛋白水解组分RT-2组分的研究
- 虎斑颈槽蛇中国大陆亚种(Rhabdophis tigrinus lateralis)是我国分布较广,数量较多的蛇类之一,为无管无沟的后毒牙蛇类,颈背部具有特殊的腺体,可以分泌毒液。肉眼观察发现腺体呈珠球状,8~13对腺体...
- 和七一余晓东邓敏李卉陈夏林奕辛
- 白唇竹叶青蛇毒5'-核苷酸酶的制备方法
- 本发明公开了一种白唇竹叶青蛇毒5′-核苷酸酶的制备方法,该制备方法依次包括以下步骤:(1)白唇竹叶青蛇毒的预处理;(2)DEAE-SepHadex A-25阴离子交换层析初步分离;(3)SepHadex-G-100层析纯...
- 余晓东陈夏
- 文献传递
- 中华眼镜蛇(Naja Naja Atra)毒神经生长因子对PC_(12)细胞κ阿片受体mRNA表达的影响被引量:1
- 2008年
- 目的研究眼镜蛇毒神经生长因子(nNGF)对PC12细胞κ阿片受体mRNA表达的影响,探讨nNGF诱导PC12细胞分化的分子机制。方法用RT-PCR方法半定量地考察nNGF及κ阿片受体的一些拮抗剂和激动剂对PC12细胞κ阿片受体mRNA表达的影响。结果(1)在25,50和100 ng/mL 3个nNGF剂量组中,50和100 ng/mL nNGF显著下调PC12细胞κ阿片受体mRNA的表达。(2)50 ng/mL nNGF分别处理PC12细胞1,3,5,7,10 d后,结果显示κ阿片受体mRNA表达随时间有降低的趋势,7 d时显著下调(P<0.05),10 d时特别显著(P<0.01)。(3)10μmol/L吗啡上调PC12细胞κ阿片受体mRNA表达,并能逆转nNGF对该κ阿片受体mRNA表达的下调效应。10μmol/L纳络酮对PC12细胞κ阿片受体的表达无显著影响,也能逆转nNGF对该κ阿片受体mRNA表达的下调效应。但吗啡和纳络酮共存时不能逆转NGF对该κ阿片受体mRNA表达的下调效应。结论nNGF诱导PC12细胞分化时,能下调其κ阿片受体mRNA表达,这种下调能分别被吗啡或纳络酮逆转,但不能被吗啡和纳络酮共存时逆转。
- 李卉余晓东和七一邓敏陈夏林奕心
- 关键词:PC12细胞Κ阿片受体
- 白唇竹叶青蛇(Trimeresurus albolabris)毒降纤酶的分离纯化以及性质被引量:3
- 2008年
- 目的从白唇竹叶青蛇(T.albolabris)毒中分离纯化无出血作用的降纤活性组分,探讨其理化性质及部分生物功能。方法用DEAE-SephadexA-25,SephadexG-100和CM-SephadexC-50三步色谱法进行分离纯化。SDS-PAGE和HPLC鉴定其纯度和相对分子质量,平板法测定其降纤活性。结果从白唇竹叶青蛇毒中分离纯化获得单一的降纤组分,能迅速水解纤维蛋白原或纤维蛋白原Aα链,缓慢水解Bβ链,而对γ链无作用,SDS-PAGE鉴定其相对分子质量为56000。EDTA能抑制其纤维蛋白原水解活性,而PMSF、β-巯基乙醇对其活性无影响,提示该组分为单链α金属蛋白酶。结论从白唇竹叶青蛇毒中分离纯化得到1种无出血作用且降纤活性强的新蛇毒降纤酶。
- 邓敏余晓东陈夏李卉林亦心和七一柳建平
- 关键词:降纤酶蛇毒金属蛋白酶
- 白唇竹叶青(Trimeresurus albolabris)蛇毒5’--核苷酸酶分离纯化、理化性质及抑制家兔血小板聚集机制研究
- 白唇竹叶青(Trimeresurusalbolabris)是蝮亚科(Crotalinae)竹叶青属(Trimeresurus)的一种剧毒毒蛇,主要分布于重庆、四川、云南、贵州、福建、广东、广西、海南和台湾等地区。我们实验...
- 陈夏
- 关键词:分离纯化血小板聚集抑制剂
- 文献传递
- 中华眼镜蛇毒神经生长因子对PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的影响
- 2009年
- 目的探讨中华眼镜蛇毒(Naja Naja Atra)神经生长因子(nNGF)对PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的影响。方法PC12细胞分为正常对照组和给药组,采用Western blot方法检测各组PC12细胞κ阿片受体蛋白质的表达。结果①nNGF的25、50、100μg.L-13个剂量中,50和100μg.L-1nNGF下调PC12细胞κ阿片受体蛋白质的表达,50μg.L-1剂量组下调最明显(P<0.01),100μg.L-1剂量组下调(P<0.05)。②50μg.L-1nNGF分别处理PC12细胞1、3、5、7、10 d后,其κ阿片受体蛋白质表达呈降低趋势,其中d 5、7下调(P<0.05),d 10下调明显(P<0.01)。③10μmol.L-1吗啡可上调PC12细胞κ阿片受体蛋白表达,而10μmol.L-1纳络酮对其无影响,二者分别都能逆转nNGF的下调效应,但是二者共存时不能逆转nNGF的下调效应。结论nNGF诱导PC12细胞分化中,可引起PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的下调效应,该效应能被吗啡或纳络酮逆转,但二者共存不能被逆转效应。
- 李卉余晓东和七一邓敏陈夏林奕心
- 关键词:PC12细胞Κ阿片受体