钟鸣
- 作品数:120 被引量:717H指数:14
- 供职机构:沈阳农业大学生物科学技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学环境科学与工程医药卫生更多>>
- 羽衣甘蓝甘油-3-磷酸酰基转移酶基因的克隆及序列分析
- 2013年
- 以羽衣甘蓝品种白孔雀为试验材料,通过同源克隆和RACE方法从低温诱导的羽衣甘蓝幼苗中分离得到了羽衣甘蓝甘油-3-磷酸酰基转移酶(glycerol-3-phosphate acyltransferase,GPAT)基因的全基因序列,采用生物学软件对该序列进行生物信息学分析。结果表明:该基因全长1558bp,推测其编码451个氨基酸,并命名为BaGPAT。序列分析发现,羽衣甘蓝BaGPAT基因推导的氨基酸与已知其他植物GPAT基因序列有54%~85%的相似性。聚类分析结果显示:羽衣甘蓝GPAT(BaGPAT)基因与拟南芥和宽叶独行菜GPAT基因亲缘关系较近。
- 马慧李丽丽祝红艳陈丽静钟鸣郭志富
- 关键词:羽衣甘蓝基因克隆
- 碱蓬多酚氧化酶基因的克隆及序列分析被引量:2
- 2013年
- 多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)是一类植物体内广泛存在的由核基因编码的能与铜结合的金属蛋白酶,是碱蓬甜菜红素合成的第一关键酶。以盘锦红海滩碱蓬(盐地碱蓬)为研究材料,采用同源克隆法,根据植物中已克隆出的PPO序列进行引物设计,利用RT-PCR和RACE技术,从碱蓬中克隆出的PPO基因cDNA全长为1 830 bp,编码609个氨基酸。序列分析表明,与其他植物PPO核苷酸序列的相似性为69%~87%,氨基酸的相似性为49%~62%。碱蓬多酚氧化酶基因的成功克隆,为碱蓬甜菜红素的研究和利用打下了坚实的理论基础。
- 马慧祝红艳李丽丽陈丽静郭志富钟鸣
- 关键词:碱蓬多酚氧化酶基因克隆
- 小麦抗条锈病基因分子标记的建立
- 该研究是采用RAPD等分子标记技术,建立与小麦抗条锈病基因紧密连锁的分子标记.根据常规的RAPD分析所用的各种成分的浓度范围,针对小麦这一研究对象设计了128个初选 体系.该研究采用PAGE银染的方法,有效地改善某些引物...
- 钟鸣
- 关键词:小麦抗条锈病基因DNA分子标记RAPDSSCARS
- 文献传递
- 铁皮石斛茎节离体培养的研究被引量:27
- 2007年
- 目的通过无菌茎段实现铁皮石斛快速繁殖。方法将铁皮石斛试管苗茎节接种于不同NAA浓度的MS培养基上诱导腋芽萌发,并在含不同激素配比和有机添加物的培养基上继代和诱导生根。结果NAA0.4mg/L,6-BA5mg/L时铁皮石斛腋芽萌发率达93.33%;NAA0.3mg/L,6-BA2mg/L时丛苗的生根率达96.67%,香蕉汁和土豆汁能够显著促进丛生芽的增殖和壮苗生根。结论建立了适合铁皮石斛茎段离体培养的快速繁殖体系。
- 郭洪波于晓丹陈丽静马慧张丽郭志富钟鸣王学英
- 关键词:铁皮石斛离体培养激素浓度有机添加物
- 性别决定基因TASSELSEED2在水稻中的功能歧化性浅析
- 2017年
- 花器官的发育不仅影响农作物的生产,通过性别决定产生单性花的机制亦是重要的基础理论问题。TASSELSEED2基因是与JA合成有关的调控玉米单性雄花产生的性别决定基因,对一些植物中TS2同源基因的表达分析表明TS2蛋白可能在进化过程中产生了功能歧化。为探究TS2蛋白在进化过程中其功能是否发生了歧化,首先通过生物信息学手段对水稻和玉米的TS2基因进行了比较分析,分子进化分析表明,TS2基因在一些植物中可能并不仅仅局限于抑制雌蕊发育的性别决定功能。因此,猜测两性花植物水稻中的TS2可能具有其他功能。利用蛋白质三维结构预测软件,发现水稻TS2基因编码典型的SDR蛋白,含有保守的GASGIG和YTASK基序,其作用底物可能与玉米TS2蛋白类似。启动子分析表明OsTS2和玉米TS2的激素应答元件存在差别。随后,利用RNA-seq数据进行了OsTS2与玉米TS2的组织器官表达分析,并利用实时荧光定量技术考察外源Me JA喷施处理对OsTS2与玉米TS2基因表达的影响。结果表明,OsTS2主要在花序中表达,经外源MeJA处理后其表达量明显升高;而玉米TS2在雄穗分化关键期的叶片中表达量最高,其表达量基本不受外源Me JA影响。OsTS2与玉米TS2表达方面的差异提示水稻TS2可能具有与玉米TS2不同的功能,为深入了解TS2在两性花植物中的功能提供了线索。
- 郭盈盈候志鹏钟鸣陈丽静马慧张丽徐正进李浩戈
- 关键词:水稻玉米茉莉酸甲酯
- 利用SRAP标记分析玉米遗传多样性被引量:40
- 2007年
- 相关序列扩增多态性(SRAP)是一种基于PCR的新型分子标记技术。本研究的目的在于探讨利用该标记进行玉米种质资源遗传多样性分析和杂种优势群划分的价值及可行性。利用22对SRAP引物对16个玉米自交系进行了遗传多样性分析,共扩增出197条具多态性的条带,平均多态性信息量为0.8847,平均多态性比率为59.8%。通过聚类分析将16个自交系分为5个群,其划分结果与系谱分析基本一致。该结果表明SRAP标记是一种适合于玉米种质遗传多样性研究的分子标记。
- 姜树坤马慧刘君何晶郭志富陈丽静钟鸣张立军王学英张丽
- 关键词:SRAP玉米分子标记
- 一种水稻幼苗单株DNA的快速提取及PAGE银染改良法被引量:5
- 2006年
- 目的:为了提高SSR分子标记技术在水稻遗传育种中的研究效率,介绍一种快速的适于SSR-PCR扩增的水稻幼苗单株DNA提取法及PAGE银染法。方法:在常温下加入少量SDS提取液将单株叶片迅速捣碎,再加入300μLSDS提取液,65℃水浴10min后离心,取上清用乙醇沉淀后离心,超净工作台吹干后用100μLTE回溶即可。改进的PAGE银染法只需染色、冲洗、显影等3步,用乙醇和硝酸银作为染色液,去离子水快速冲洗1次后置显影液中即可显影。结果:本法可快速提取DNA,不须液氮研磨、氯仿抽提,提取的DNA经0.8%琼脂糖凝胶电泳检测表明质量较好,且扩增结果稳定可靠,满足了SSR-PCR的需要。改良的银染法与常规银染法的检出结果相同,但快速方便,整个过程只需10min,且背景较浅,灵敏度高。结论:快速提取法及PAGE银染改良法结合SSR分子标记技术,可有效地用于杂种后代的遗传连锁分析和分子标记辅助育种时的单株检测。
- 陈罡钟鸣徐正进张丽刘少霞李敏
- 关键词:水稻DNA提取聚丙烯酰胺凝胶电泳银染
- 土壤中微生物对多环芳烃的降解及其生物修复的研究进展被引量:14
- 2011年
- 多环芳烃是一类在环境中普遍存在的有机污染物,微生物降解是多环芳烃(PAHs)降解的主要途径。文中主要介绍PAHs的降解菌,降解机理和PAHs的生物修复方面的研究进展。这些进展可为降解菌株的分子及遗传机制研究提供理论依据,将促进通过基因工程优化降解菌、更有效地检测PAHs环境污染及实现PAHs污染的生物修复。
- 杨峰钟鸣白鹏马慧
- 关键词:多环芳烃微生物降解生物修复
- 双加氧酶α亚基保守序列克隆及探针制备
- 2008年
- 制备地高辛标记的环羟基化双加氧酶的α亚基保守序列探针。利用PCR法成功地克隆了环羟基化双加氧酶的α亚基保守序列310 bp片段,并对其进行测序。利用PCR法制备地高辛标记探针,对新标记的探针进行检测,结果显示其标记效率在0.1 pg/μL;敏感性检测表明,对同源DNA的检出限量为100 pg;对提取的副溶血性孤菌质粒DNA、短小芽胞杆菌总DNA杂交均呈阴性,说明该探针具有较强的特异性。
- 钟鸣董章成郭致富马慧陈丽静张丽
- 关键词:克隆基因探针
- 血红铆钉菇免疫调节蛋白基因克隆及其生物信息学分析和重组表达被引量:1
- 2015年
- 为研究血红铆钉菇中克隆的一种新型真菌免疫调节蛋白基因以及其在毕赤酵母GS115中进行高效重组表达,采用同源克隆的方法从血红铆钉菇菌丝体基因组DNA中扩增得到一个新的真菌免疫调节蛋白基因——FIP-cru,构建FIP-cru真核表达重组载体,并在毕赤酵母GS115中进行FIP-cru重组表达。利用硫酸铵沉淀、琼脂糖镍纳米磁珠纯化目的重组FIP-cru蛋白,采用SDSPAGE和Western blot验证重组FIP-cru表达情况。利用体外血细胞凝集实验与MTT法检测r FIP-cru生物学活性。结果表明:FIPcru属于真菌免疫调节蛋白家族,包含342 bp,编码113个氨基酸,经生物信息学分析发现,FIP-cru与其他真菌免疫调节蛋白有较高的同源性。SDS-PAGE和Western blot检测表明FIP-cru在毕赤酵母GS115中正确重组表达,粗蛋白表达水平为148.5mg·L-1。纯化后的r FIP-cru可以在体外凝集小鼠和羊的血细胞而不凝集人血细胞,MTT法表明r FIP-cru可明显刺激小鼠脾淋巴细胞的增殖。FIP-cru为一种新型真菌免疫调节蛋白,毕赤酵母高效重组表达的r FIP-cru具有良好的生物学活性。
- 林景卫关山越钟鸣陈丽静李浩戈张丽范文丽李天来
- 关键词:血红铆钉菇毕赤酵母GS115重组蛋白