金治平
- 作品数:22 被引量:230H指数:8
- 供职机构:中国科学院植物研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国科学院知识创新工程中国科学院知识创新工程重要方向项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学化学工程更多>>
- 水母雪莲类黄酮次生代谢分子调控研究——cDNA文库构建、关键酶及Myb转录因子基因的克隆及其功能的初步鉴定
- 水母雪莲(Saussurea medusa Maxim)为名贵珍稀中药材,其主要药用成分为类黄酮,尤其是3-脱氧类黄酮。目前关于雪莲的研究主要集中在采用细胞培养生产类黄酮等方面,但对于雪莲类黄酮生物合成的分子机制了解甚少...
- 金治平
- 关键词:水母雪莲类黄酮次生代谢CDNA文库
- 文献传递
- 快速简便筛选cDNA文库的SSS法被引量:10
- 2003年
- 建立了一种快速简便筛选cDNA文库的方法—SSS法(subsectionscreening)。该方法用cDNA噬菌体平板划块分组和根据目的基因设计的一对特异性引物,用PCR技术逐级筛选cDNA文库获得目的基因。与其它筛选cDNA文库的方法相比,该方法范围可控,目标明确,易于获得目的基因,而且快速、简捷、省时,一般可在一周内筛选出目的基因。本实验室利用该方法在半个月内筛选出了一个查耳酮异构酶(chalconeisomerase)(CHI)基因,一个黄酮类化合物3′ 羟化酶(flavonoid3′hydroxylase)(F3′H)基因,一个热激蛋白(heatshockprotein)(HSP)基因和一个1484bp热激蛋白基因片段。此方法用于同时筛选多个基因,可收到事半功倍的效果,对其它文库筛选也有借鉴意义。
- 瞿文全金治平赵德修陈亚琼李名扬
- 关键词:CDNA文库PCR文库筛选
- PCR方法获取南极衣藻Chlamydomonas L4的Ribosomal protein L9基因
- 本文采用SMART(Switching mechanism at 5’end of RNA transcript)技术,构建了南极衣藻L4(Chlamydomonas L4)的全长cDNA文库。按TRIzol试剂盒的操作...
- 王能飞金治平赵爱云付春祥沈继红
- 关键词:PCR南极冰藻CDNA文库
- 文献传递
- 羊草光合作用相关基因的克隆与分析
- 在构建了羊草叶片cDNA文库的基础上,利用M13载体通用引物筛选其亚文库,挑选阳性克降进行测序,将测序结果在NCBI基因库中进行比对,得到一个Rubisco大亚基基因全长序列和Rubisco小亚基基因部分序列,并对其核苷...
- 刘公社金治平郝亚琦王丽娟李晓峰
- 文献传递
- 不同理化因子对雪莲毛状根生长和总黄酮生物合成的影响被引量:39
- 2005年
- 在 1 2MS液体培养基上研究了不同理化因子对水母雪莲毛状根生长和总黄酮生物合成的影响。实验结果表明 :氮源总浓度 (包括NH+4和NO-3)为 30mmol L ;NH+4 NO-3比例为 5∶2 5 ;2 %蔗糖和 3%葡萄糖组合 ;0 . 5mg LGA3和 0 . 5mg LIBA ;pH5 8;18h d的光照 (光强为 35 .0 0lx) ;2 4℃ ;摇床转速为 10 0r min有利于毛状根生长及总黄酮的生物合成。在此培养条件下 ,经过2 1d的培养毛状根生长量达到 12. 8g L(DW) ,总黄酮合成量为 192 .2mg L ,即总黄酮含量占毛状根干重的 15 % ,约为干重野生水母雪莲植株总黄酮含量的 2 5倍。
- 杨睿付春祥金治平赵德修
- 关键词:根生长干重毛状根总黄酮生物合成
- 水母雪莲愈伤组织cDNA文库的构建被引量:8
- 2004年
- 用TRIZOL Reagent提取水母雪莲红色系1~15d愈伤组织总RNA,用SMART cDNA Library Construction Kit构建cDNA文库。经测定原始文库滴度达到1.5~4×10^6,扩增总文库滴度达到10^11重组率达到98%,插入片段在0.5kb到3kb之间,多在1kb左右。通过PCR检测,从总文库中检测到了雪莲CHS、DFR及SmP基因的特异片段。SmP基因是转录调控因子,其表达丰度很低。各项指标都表明,已获得高质量的cDNA文库,为雪莲基因资源保存,雪莲类黄酮次生代谢分子调控奠定了坚实的基础。
- 金治平赵德修乔传令付春祥
- 关键词:水母雪莲愈伤组织CDNA文库基因资源
- 植物遗传转化技术研究概况被引量:9
- 2002年
- 本文介绍了植物基因转移的各种方法,涉及载体介导的转化、DNA直接转化和种质系统转化.
- 郑秀芳金治平
- 关键词:植物遗传转化技术基因转移DNA根癌农杆菌
- 茉莉酸甲酯与水杨酸对肉苁蓉悬浮细胞中苯乙醇甙合成的影响被引量:36
- 2005年
- 向肉苁蓉悬浮细胞培养系中添加茉莉酸甲酯(MJ)和水杨酸(SA) ,分别考察了这两种诱导子的添加浓度及添加时间对肉苁蓉悬浮细胞系中苯乙醇甙含量的影响。研究结果表明:MJ和SA能够促进肉苁蓉悬浮细胞系中苯乙醇甙(PeG)和松果菊甙(Echinacoside)的合成,但两者的适用的浓度范围和最佳添加时间存在差异。与未经诱导子处理的细胞培养结果相比,MJ在对数生长初期(培养14d) ,添加浓度为5 μmol L条件下,可使肉苁蓉悬浮细胞系中PeG含量提高2 5 9倍,Echin含量提高3 82倍;而SA在对数生长后期(培养2 8d) ,添加浓度为5 0 μmol L条件下,可使PeG含量提高2 71倍,Echin含量提高3 16倍。
- 徐亮胜薛晓锋付春祥金治平陈毓荃赵德修
- 羊草叶片cDNA文库的构建及部分表达序列标签的分析被引量:15
- 2009年
- 采用SMART 技术,以品质优良羊草“吉生一号”叶片为材料,构建了高质量cDNA 文库。原始文库滴度达到106cfu/mL,扩增文库滴度接近1011cfu/mL。随机抽样检查结果表明,插入片断大小在0.5-3.0kb,主要集中在1kb左右,其中检测到插入片断大于1kb的占70%,最大达到2.5kb,其重组率达到98%。同时在扩增文库中检测到了羊草维生素E 合成途径中的关键酶基因α-生育酚环化酶(TC)及γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)的特异信号,挑选307个筛选出了285条EST 序列,将得到的117条非重复序列与GenBank中已知序列比对,获得了如3磷酸甘油醛脱氢酶。光系统Ⅱ蛋白D1。翻译起始因子蛋白。翻译延生因子蛋白。RNaseS-like protein precursor蛋白等基因。羊草高质量的cDNA 文库的构建为进一步从分子水平研究羊草及开发利用这一基因资源提供了条件。
- 王丽娟金治平王能飞李晓峰刘公社
- 关键词:羊草叶片CDNA文库EST
- 水母雪莲Myb转录调控因子SmP基因的克隆及序列分析
- <正> 采用快速、经济、简便的PCR法从水母雪莲(Saussuea medusa Maxim)红色系愈伤组织cDNA文库中筛选克隆到雪莲Myb转录调控因于SmP基因。序列分析表明该基因全长969bp,包括一个771bp的...
- 金治平赵德修乔传令翟文全陈亚琼付春祥
- 文献传递