郭劲松 作品数:20 被引量:47 H指数:4 供职机构: 同济医科大学附属协和医院 更多>> 发文基金: 教育部留学回国人员科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
体外乙肝病毒致骨髓细胞感染、致细胞病变及其功能研究 熊开钧 曾令兰 黄华芳 王建华 郭劲松 该成果与国内外有关研究不同和创新之外,是乙肝病毒(HBV)感染体外培养的骨髓细胞,创建HBV易感的细胞模型,且证实了HBV致细胞病变,免疫功能改变和细胞膜功能异常。研究出体外培养的人骨髓细胞为HBV易感细胞,采用免疫酶(...关键词:关键词:乙肝病毒 细胞病变 体外感染 乙型肝炎病毒体外感染正常人骨髓中3种细胞的动态研究 被引量:5 1996年 用乙型肝炎病毒(HBV)体外感染正常人骨髓中的淋巴细胞、中性粒细胞和单核细胞。从6h至3周的6个不同时期的动态观察发现:细胞内乙型肝炎核心抗原(HBcAg)阳性率表明3种细胞均受到不同程度的感染,但以中性粒细胞和单核细胞最为敏感,其次为淋巴细胞,3者之间有统计学差异(P<0.05或0.01),并发现病毒感染程度随细胞增殖和时间的延长而增强,无吞噬能力的淋巴细胞亦是如此。透射电镜观察感染后的中性粒细胞,6h就出现线粒体和内质网的空泡变和髓样变性,24h细胞膜破裂,72h细胞表面重度破坏。表明病毒感染细胞有2种途径,其一为病毒主动侵犯细胞,其二为细胞吞噬病毒。在不同时期培养的上清液中均可较长时期检测到乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)和乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)。 曾令兰 熊开钧 黄华芳 郭劲松关键词:体外培养 骨髓细胞 PAP法 SABC法和胶体金标免疫电镜观察体外感染细胞中HCV-NS5的表达 被引量:1 2001年 To study the expression of HCV non structure 5 antigen in vitro , a human HepG2 cell line was incubated with a HCV RNA positive serum. The SABC immunological techniques and gold labeled colloid electron microscopy method were employed to examine for the viral proteins in those cells. The HCV non structure 5 antigen was first detected in the HepG2 cells at 72 hours post incubation. The antigen was continuously observed in the cytoplasm or on the membrane as well on the cell wall of the HepG2 cells even after 1, 2, 3 and 4 weeks post incubation. The observation of HCV non structure 5 antigen continuously expressed in the HepG2 cells strongly indicates that the cells may have been infected by HCV virus and the virus may have replicated in the cells. Therefore, the HepG2 cell line may be served as a potential host for establishment of HCV infection and propagation in vitro . 叶进 曾令兰 杨木兰 罗端德 郭劲松关键词:丙型肝炎病毒 抗原 慢性重型乙型肝炎患者血清TNFα水平与HBV前C区基因变异关系的研究 被引量:1 2001年 朱传武 罗端德 曾令兰 李淑莉 郭劲松 李伟 高勇关键词:慢性重型乙型肝炎 血清诊断 TNFΑ HBV 前C区基因变异 日本血吸虫病小鼠脏器Th2相关淋巴因子的动态定位 被引量:3 1999年 目的了解感染日本血吸虫后小鼠不同脏器Th2相关因子介导的免疫反应。方法采用ABC免疫组化法,并用多媒体病理图文定量分析,动态研究感染后IL4,IL5,IL10的变化。结果在感染小鼠肝脏IL4,IL5,IL10明显高于正常对照(P<0.01),并随感染时间的延长而逐步升高;在脾脏IL4,IL5,IL10亦升高,但其幅度明显较肝脏为低;在结肠IL4,IL5,IL10随感染时间延长呈缓慢升高趋势。结论感染日本血吸虫病的小鼠,肝脏是Th2相关因子免疫应答的主要器官;脾脏是调节免疫的器官; 曾令兰 罗端德 刘薇 郭劲松关键词:血吸虫病 TH2 淋巴因子 日本血吸虫 感染流行性出血热病毒的正常人骨髓细胞膜脂和酶生物活性的研究 1996年 采用疏水性荧光探针DPH(1,6,-苯基-1,3;5-已三烯)标记感染了流行性出血热病毒的正常人骨髓细胞的细胞膜,根据荧光偏振值的变化推导出膜脂流动性,同时通过细胞组化染色定量方法,测定细胞内酸性磷酸酶(ACP)和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性。动态观察1、6、24、72h培养后的淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞,发现感染后细胞膜脂的流动性明显降低,并随培养时间的延长而明显,和正常对照组比较有显著性差异(P<0.05~0.01)。通过组化染色和显微分光光度计单细胞扫描定量认为:感染细胞在培养开始的72h内ACP、SDH升高,120h后明显下降,和正常相比亦有显著差异(P<0.05),这与病毒侵犯和细胞机能的受损程度有关。 曾令兰 罗端德 蔡淑清 刘薇 杨渝珍 郭劲松关键词:流行性出血热 病毒 骨髓细胞 膜脂 PCR杂交梳技术在乙型肝炎诊断中的应用 被引量:2 1999年 目的:为临床诊断乙型肝炎提供灵敏、准确、可靠的实验依据。方法:采用PCR杂交梳(反相膜杂交法),对71例乙型肝炎患者血清进行DNA验证性检测,并与一般聚合酶链反应(PCR琼脂糖凝胶电泳法)同步对比分析。结果:71例乙型肝炎患者血清中杂交梳方法检出HBV DNA阳性58例,阳性率81.7%;琼脂糖凝胶电泳质检出HBV DNA阳性50例,阳性率70%。结论:PCR杂交梳法较PCR法具有更高特异性和敏感性。 郭劲松 曾令兰 李淑莉 罗端德 李璐关键词:聚合酶链反应 乙型肝炎 体外乙型肝炎病毒致大单核细胞病变的动态研究 1992年 应用透射和扫描电镜,对体外培养、接种乙肝病毒(HBV)和不接种 HBV 的大单核细胞超微结构进行了动态对比观察。发现接种 HBV 6小时后,胞浆出现空泡变和髓样变性;24小时后部分细胞表面膜破裂,细胞器变性和细胞崩解;72小时后,较多细胞表面膜破裂,有细胞坏死;经1、2和3周观察,细胞坏死增多,崩解和核固缩,而同期对照细胞超微结构完好。结果表明,乙肝病毒有直接致细胞病变作用。 熊开钧 曾令兰 黄华芳 郭劲松 王建华 阮幼冰关键词:乙型肝炎病毒 单核细胞 细胞病变 全文增补中 丙型肝炎或庚型肝炎病人外周血单个核细胞内外病毒RNA的检测 2000年 了解丙肝和庚肝重叠感染的发生率,以及血浆和外周血单个核细胞中HCV-RNA及HGV-RNA的检出率是否有差异。方法:运用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)扩增的方法检测72例丙肝患者血浆、外周血单个核细胞中的HCV-RNA和HGV-RNA的情况。结果:在患者的血浆,单个核细胞中分别检出HGV-RNA阳性者11例和15例,两者同时呈阳性者10例。丙肝和庚肝重叠感染者在血浆中、在外用血单个核细胞中、和在血浆+外用血单个核细胞中、检出HCV-RNA和HGV-RNA的例数分别为9、11、6例,占总例数的12.4%、15.3%和8.3%。同步检测HCV-RNA和HGV-RNA感染率均是细胞高于血浆。结论:丙肝和庚肝重叠感染发生率与欧美、日本等国报道相似,同步检测对于避免临床漏诊和研究发病机理有重要意义。 李淑莉 曾令兰 罗端德 刘薇 郭劲松 杨小铭关键词:丙型肝炎 庚型肝炎 单个核细胞 汉滩病毒感染正常人骨髓细胞后细胞膜流动性的变化 1998年 为了解汉滩病毒(HTNV)感染正常人骨髓细胞后膜流动性改变,以疏水荧光DPH(1,6-二苯基-1,3,5-已三烯)为探针,标记于被检测的细胞膜上,根据荧光偏振值的变化推导出膜脂流动度。经动态观察:1h、6h、24h、72h培养后的淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞,发现感染后细胞与未感染细胞膜脂流动度的比值随培养时间的延长逐步降低,其中中性粒细胞膜脂流动度比值始终处于较低水平,说明中性粒细胞是病毒感染的主要靶细胞。 曾令兰 蔡淑清 李淑莉 郭劲松关键词:汉坦病毒感染 骨髓细胞 细胞膜流动性