郝东云
- 作品数：91 被引量：211H指数：8
- 供职机构：吉林省农业科学院更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家自然科学基金吉林省农业科学院博士启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生一般工业技术更多>>
- 抗人Cyclin D1人源单链抗体AD9的表达及活性分析
- 2008年
- 目的原核表达、纯化抗人cyclin D1人源单链抗体(AD9)并对其活性进行分析。方法将含有AD9基因片段的噬菌粒转化大肠杆菌HB2151后,IPTG诱导表达,ELISA鉴定培养上清具有与cyclin D1蛋白结合活性后,经硫酸铵沉淀,His Trap HP亲和纯化,获得抗人cyclin D1人源单链抗体(AD9),进一步利用ELISA和Western blot对其进行鉴定和活性分析。结果IPTG诱导AD9可溶性表达,培养上清经硫酸铵沉淀和亲和纯化后,获得纯度达95%的单链抗体蛋白,ELISA和Western blot结果表明,诱导上清及纯化的AD9均能够与人Cyclin D1蛋白有特异性结合,AD9的分子量约为30kDa。结论成功地可溶性表达和纯化了,具有较好的结合人Cyclin D1蛋白活性的抗人Cyclin D1人源单链抗体。
- 曹玉华李善玉陈勇邹德生田宇郝东云李桂英
- 关键词：D1蛋白单链抗体
- 高分辨率溶解曲线分析技术在大豆Ecotilling中的应用被引量：8
- 2011年
- 将高分辨率溶解曲线(High Resolution Melting,HRM)技术运用在大豆Ecotilling中,对256份栽培大豆的大豆异黄酮合酶基因(IFS1)的外显子区域进行SNP筛查,并采用直接测序的方法对HRM检测结果进行验证。结果表明:模板均一化后的检测效果较未均一化的检测效果差异显著,野生型样本与待测样本按1∶1及1∶4比例混样溶解曲线阈值较高,其中1∶4混样适合高通量检测。HRM对IFS1基因外显子区域的检测结果与PCR产物测序的结果比对显示,对IFS1第5段外显子和第7段外显子检测的准确率分别达到91.2%和100%,表明该研究利用HRM技术建立的栽培大豆的Ecotilling技术体系是一种高灵敏度、高通量和低成本检测SNP的新方法。
- 焦丽刘相国杨春明王虎义郝东云王庆钰
- 关键词：大豆SNP
- 一个由禾谷镰孢引起的玉米穗腐病抗性主效QTL及其连锁的分子标记
- 本发明公开了一个由禾谷镰孢引起的玉米穗腐病抗性主效QTL及其连锁的分子标记。玉米抗穗腐病的主效QTL位点，位于玉米7号染色体7.01‑7.02bins上约3.33Mb的物理区间内，该主效QTL能解释14.09‑15.70...
- 张艳郝东云闻竞王梓钰韩四平李世界
- 一种低分子量EC-SOD重组酶及其制备方法及其用途
- 本发明涉及一种低分子量EC-SOD重组酶及其制备方法及其用途，属于分子生物学与生物化学领域。包括EC-SOD活性中心和C-端结构域，核苷酸序列为SEQ ID NO：1所述。本发明在制备清除自由基的药物中的应用。优点在于：...
- 王晓平曲和之郝东云柴智杨朔张伟宋晓
- 文献传递
- 一种人工合成的Bt抗虫基因FLIa及其制备方法和应用
- 一种人工合成的Bt抗虫基因FLIa及其制备方法和应用，属于抗虫蛋白及生物安全技术领域。该Bt抗虫基因FLIa的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其编码的蛋白的氨基酸序列如序列表中的SEQ ID NO:2所示。该Bt...
- 郝东云刘相国李楠韩四平尹悦佳柳青刘洋康领生王阳闫玮玉
- 文献传递
- 特异性抗人cyclin D1人源单链抗体的筛选被引量：6
- 2006年
- 目的从噬菌体抗体库中筛选人源性抗人cyclinD1蛋白的单链抗体并进行鉴定。方法以原核表达并用Ni-NTA Agarose纯化的重组人cyclinD1蛋白为抗原,通过“吸附-洗脱-扩增”淘选过程从噬菌体抗体库中筛选特异性抗人cyclinD1蛋白的单链抗体,通过ELISA方法对获得抗体的特异性和结合活性进行分析鉴定。结果经过4轮筛选,获得7株能与人cyclinD1蛋白结合的阳性克隆,其中3株噬菌体的可溶性表达单链抗体能与人cyclinD1蛋白有特异性结合活性。结论利用噬菌体抗体库技术可以不经免疫过程制备出特异性的人源性抗人cyclinD1抗体。
- 李桂英朱迅周立宏邹德生郝东云田宇杜柏榕
- 关键词：噬菌体抗体库单链抗体
- 玉米ZmCOL3pro217启动子的克隆及功能分析被引量：3
- 2020年
- ZmCOL3是玉米开花期光周期调控网络中一个重要的功能基因,研究发现自然群体中该基因的启动子存在遗传变异,推测这些变异可能参与玉米开花调控。研究从热带血缘玉米材料CIMBL119中克隆了ZmCOL3启动子,命名为ZmCOL3pro217。序列比对发现,该启动子序列与温带血缘玉米B73序列存在1个217 bp大片段置换。生物信息学分析表明,ZmCOL3pro217含有分生组织特异性、光响应、胁迫响应等多个顺势作用元件,预测ZmCOL3pro217可能具有组织特异性,并通过响应光和胁迫反应参与玉米开花调控。进一步构建ZmCOL3pro217驱动gus报告基因表达载体,转化玉米,实时荧光定量PCR、酶联免疫吸附剂测定、GUS组织化学染色等研究结果发现,转基因植株中ZmCOL3pro217驱动gus基因在根和叶器官中高表达,而在茎、花丝和子粒中几乎不表达,证实ZmCOL3pro217是1个新的组织特异性表达启动子。
- 果天宇尹悦佳贾伟柳青柳青郭嘉刘洋郝东云郝东云
- 关键词：玉米启动子
- 拟南芥全细胞蛋白质样品制备及其双向电泳条件的优化被引量：3
- 2006年
- 对双向电泳方法进行了改进,包括对样品的制备、双向电泳参数的选择等关键步骤进行优化.实验发现,采用乙酸铵-甲醇沉淀拟南芥全细胞蛋白质,同时结合高伏时、长时间的等电聚焦可以获得高分辨率、重复性好的蛋白质双向电泳图谱.银染后,经Phoretix 2D v2004软件分析可分辨出1 000以上蛋白点.
- 席景会殷建文岳琳李善玉周欣王旭郝东云
- 关键词：拟南芥双向电泳
- 谷物种子储存装置
- 谷物种子储存装置，涉及农业科研用品领域，解决了分子标记辅助育种研究中谷物籽粒侵泡切割后，籽粒快速干燥中存在的问题。该装置包括储存袋和支撑配件，储存袋包括主体部；固定在主体部上的固定部；在主体部上成阵列式排布的多个存储部；...
- 刘相国郝东云尹悦佳刘洋韩四平张艳
- 文献传递
- 一种用于检测玉米植物ND4401的核酸分子及其检测方法
- 本发明涉及一种用于检测玉米植物ND4401的核酸分子及其检测方法，所述玉米植物的核酸分子序列包括SEQ ID NO:1所示序列或其互补序列、或者SEQ ID NO:2所示序列或其互补序列。本发明玉米植物ND4401具有高...
- 郝东云刘洋刘相国郭嘉尹悦佳柳青赵涵宁丽华陈子奇韩四平李毅丹叶欣男
- 文献传递
