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肺炎链球菌自溶素对感染性肺炎的诊断价值被引量：9: 2015年; 目的通过基因原核表达技术获取肺炎链球菌自溶素LytA重组蛋白(rLytA),探讨其对感染性肺炎患者的血清学诊断价值。方法根据Genbank中肺炎链球菌M66菌株lytA基因序列(FN549899.1)设计合成特异性引物;采用PCR技术以肺炎链球菌基因组DNA为模板扩增lytA基因序列;构建重组表达质粒pET32a(+)/lytA,经由IPTG诱导后通过等电点洗脱方法获取纯化的重组蛋白LytA;Western blot测定表达蛋白的抗体结合活性;以rLytA为抗原,建立ELISA反应模式,测定2013年3-6月36例临床诊断为CAP并经细菌学确定的患者血清标本中相应IgG和IgM抗体,评价对肺炎链球菌感染性肺炎的诊断价值。结果成功构建原核表达质粒pET32a(+)/lytA,表达的rLytA具有较好的抗体结合活性;CAP患者血清IgM和IgG类抗LytA的抗体滴度均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),其诊断的敏感性均高于常规的痰培养和血培养(P<0.01)。结论以重组蛋白LytA为抗原建立ELISA反应模式可用于肺炎链球菌感染的血清学诊断,快速、客观,具有一定的应用价值。; 邹琴孙文平杨光周杰罗红; 关键词：肺炎链球菌自溶素原核表达酶联免疫吸附试验

肺炎链球菌自溶素LytA研究进展被引量：5: 2014年; 自溶素是一种内源性酶,广泛存在于细菌表面,参与细菌分裂、细胞黏附、细菌自溶以及细胞壁的更新等重要生理活动。本文对肺炎链球菌自溶素LytA结构、功能、调控及应用研究现状进行了综述。; 邹琴罗红; 关键词：肺炎链球菌自溶素抗菌药

肺炎链球菌自溶素LytA小片段免疫活性的研究被引量：1: 2014年; 通过对肺炎链球菌（ATCC49619）自溶素lytA全序列基因的克隆和表达，获得部分小片段蛋白，初步研究其免疫活性。根据GenBank中肺炎链球菌M66菌株lytA基因序列（FN549899.1）设计合成特异性引物，采用PCR技术从肺炎链球菌（ATCC49619）基因组中扩增lytA全序列片段，构建克隆载体PGM T/lytA, 测序后与M66菌株比对显示，肺炎链球菌ATCC49619株碱基序列内存在新酶切位点BamHⅠ。以BamHⅠ、HindⅢ双酶切后，目的基因出现2个小片度，以约500 bp小片段构建重组表达载体pET32a（＋）/lytA′，经IPTG诱导后等电点洗脱法获取纯化的目的蛋白LytA′。将LytA′免疫小鼠，测定抗体效价，同时进行Western blot鉴定。测序显示肺炎链球菌ATCC49619菌株与M66菌株的lytA全基因序列同源性为98%，具有高度保守性，碱基不同主要位于下游部分，在444～450 bp之间新出现BamHⅠ酶切位点。构建的小片段重组表达质粒pET32a（＋）/lytA′在BL21（DE3）中高效表达，获得纯化蛋白LytA′，免疫BALB/c小鼠产生的抗体效价为1：32，经Western blot证实该蛋白具有较好的抗体结合活性，为进一步应用于疫苗及药物等相关研究奠定基础。; 邹琴杨光罗红宫晓红孙文平; 关键词：肺炎链球菌自溶素酶切免疫活性

肺炎链球菌自溶素小片断基因表达蛋白、制备方法及用途: 本发明公开一种肺炎链球菌自溶素小片断基因表达蛋白、制备方法及用途，小片断基因表达蛋白如SEQIDNO：5所示的氨基酸序列；制备方法按如下步骤进行：提取肺炎链球菌（ATCC49619）基因组DNA；以所得到的DNA为模板，...; 罗红殷素岚邹琴孙文平杨光谢兴凤周杰吕明睿刘科芳; 文献传递

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邹琴