邢进
- 作品数:96 被引量:256H指数:9
- 供职机构:中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学交通运输工程更多>>
- 多种沙门氏菌分离培养基效果比较及在实验动物和垫料检测中的应用被引量:1
- 2015年
- 目的改进实验动物沙门氏菌分离培养方法,建立垫料中沙门氏菌检测方法。方法参考国内外沙门氏菌检测方法,用不同分离培养基对沙门氏菌、大肠杆菌和变形杆菌进行培养。选用最佳筛选效果培养基对动物肠道和垫料样品进行检测。结果 BPW预增菌、MKTTn选择性增菌转种XLT4培养基分离沙门氏菌的效果优于其他培养基,在1015份动物样品中检测出3份沙门氏菌阳性,能够检测出垫料中1CFU/g的沙门氏菌。结论改进的沙门氏菌分离培养方法检出率高于现有国标方法,结果准确,可用于实验动物沙门氏菌及垫料的检测。
- 邢进冯育芳岳秉飞贺争鸣
- 关键词:沙门氏菌实验动物垫料
- 猴副流感病毒5型实时荧光定量PCR方法的建立与初步应用被引量:2
- 2013年
- 目的建立猴副流感病毒5型(SV5)实时荧光定量PCR方法,并初步应用于猴样本检测。方法根据SV5病毒NP基因保守片段设计特异引物和TaqMan探针,使用分子生物学方法制备质粒标准品,建立SV5实时荧光定量PCR方法;对该方法的线性、敏感性、特异性及稳定性进行测定;并使用该方法对24个猴样品进行检测。结果成功建立SV5实时荧光定量PCR方法;该方法线性范围为(6.8×10^9~6.8×10^5)copy/μL,灵敏度为6.8copy/μL,批内变异系数(CV)为0.63%~8.71%,批间CV为1.52%-12.38%,而且方法特异性好;在24个猴肺样品中未检测出阳性。结论该方法的建立为实验动物和动物源性生物制品中SV5的定量检测奠定了基础。
- 冯育芳李晓波邢进付瑞王吉卫礼岳秉飞贺争鸣
- 关键词:实时荧光定量PCR
- 实验大鼠仙台病毒抗体检测能力验证结果评价
- 目的了解全国实验动物检测相关实验室在大鼠仙台病毒抗体检测项目的技术水平,发现并解决检验中存在的问题,促进各实验室加强质量管理,提高检测水平。方法制备大鼠血清样品,经过标定后分装,按照CNAS的要求进行均一性和稳定性验证,...
- 李晓波付瑞王洪王吉卫礼王淑菁邢进冯育芳贺争鸣岳秉飞
- 关键词:酶联免疫吸附试验
- 文献传递
- 中国实验动物中鼠管状线虫的分子鉴定和感染调查被引量:1
- 2016年
- 目的对鼠管状线虫进行分子鉴定和感染调查,为国家标准的修订提供参考依据。方法 923批5199只SPF动物(包括:1批5只猴,3批25只小型猪,28批55只兔,13批248只地鼠,37批198只豚鼠,93批459只大鼠,742批4179只小鼠,5批25只鸡和1批5只鸭)和145批1389只清洁动物(包括:1批3只兔,4批31只地鼠,16批157只豚鼠,32批268只大鼠和92批930只小鼠)来自全国50个不同的厂家。应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术结合形态学鉴定方法,进行鼠管状线虫感染筛查。应用多重PCR和测序技术,鉴定分离的鼠管状线虫ITS(内转录间隔区)、28S rRNA(28S核糖体RNA)、nad1(NADH脱氢酶亚单位1)和cox1(细胞色素C过氧化物酶亚基1)基因,从分子水平上确证鼠管状线虫感染。结果应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术,从动物中检出鼠管状线虫的虫卵、幼虫和成虫。根据鼠管状线虫的卵细胞、幼虫、雌雄成虫的大小和形态来鉴定虫种。应用多重PCR测序技术,能从分离的单个鼠管状线虫的虫卵、幼虫和成虫中鉴定出ITS、28S rRNA、nad1和cox1基因,与其他不同种属的寄生虫无交叉反应。应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术,从5199份SPF和1389份清洁动物样本中分别检出鼠管状线虫阳性样本285份和135份。应用多重PCR和测序技术,鉴定证明这些阳性样本中确实含有鼠管状线虫特异性的DNA。测序结果显示,不同动物分离的鼠管状线虫的ITS、28S rRNA、nad1和cox1部分基因序列核苷酸相似性达100%。SPF和清洁动物的鼠管状线虫感染率分别为5.5%(285/5199)和9.7%(135/1389)。结论应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术联合多重PCR测序技术能够快速精准检测鉴定出鼠管状线虫。鼠管状线虫的人兽共患本质可以视作为公共卫生的一个预警。良好的动物质量控制对保护人类身体健康和保障人民用药安全具有重要作用。本研究对中国SPF和清洁动�
- 高正琴李晓波冯育芳王吉付瑞邢进王淑菁魏杰王洪巩薇李冠民贺争鸣岳秉飞
- 关键词:实验动物分子鉴定
- 北京中国农大小型猪三个亚系群体的遗传状况分析
- 目的 对北京地区中国农大小型猪三个亚系群体进行遗传质量评价与分析.方法 利用DB11/T828.3-2011中的25对微卫星引物,对3个中国农大小型猪亚系群体进行微卫星分型,利用群体遗传分析软件Popgen32对所得结果...
- 魏杰巩薇王洪李晓波付瑞王吉邢进冯育芳王淑菁高正琴岳秉飞
- 关键词:微卫星标记亚系
- 嗜血杆菌属CODEHOP PCR检测方法的建立及在树鼩检测中的应用被引量:3
- 2015年
- 目的建立树鼩中嗜血杆菌的CODEHOP PCR快速检测方法,为树鼩微生物质量控制提供参考。方法应用CODEHOP在线简并引物设计工具,比对NCBI中6株嗜血杆菌的外膜蛋白序列设计简并引物。通过4株嗜血杆菌标准菌株和24株它属菌株进行特异性和敏感性评价,将建立CODEHOP PCR检测方法,应用于树鼩嗜血杆菌的检测。结果简并引物HF1/HR8和HF3/HR3扩增标准菌株副鸡嗜血杆菌(ATCC 29545)、溶血嗜血杆菌(ATCC 33390)、流感嗜血杆菌(ATCC33391)、副流感嗜血杆菌(ATCC 33392)的目的片段分别为506bp^535bp和344bp^390bp,经测序和NCBI Blast比对,结果准确。两对引物组合,能够有效的区分嗜血杆菌属菌株与它属菌株,检测限最低可达2.1pg/μL。在受试的野生树鼩呼吸道样本中嗜血杆菌阳性率为33.3%(20/60)。结论所建立的方法具有较好的特异性和敏感性,操作简便,能够用于动物样品的嗜血杆菌检测。
- 邢进冯育芳岳秉飞贺争鸣孙晓梅代解杰
- 关键词:嗜血杆菌CODEHOPPCR树鼩
- 应用TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR结合分离培养监测分析灰仓鼠细菌多样性被引量:6
- 2014年
- 目的:监测分析中国灰仓鼠细菌的多样性,收集更多的质量信息,获得更全面的微生物背景知识,为灰仓鼠的种群建立、生物净化和动物模型的建立提供科学的数据依据。方法:60只成年灰仓鼠来自新疆地区,安乐死后剖解采集标本。应用TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR和常规微生物学方法进行细菌多样性研究。结果:本研究采用常规微生物学方法从灰仓鼠中鉴定出179株细菌,包括大肠埃希菌、鲍氏志贺菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、栖冷克吕沃尔菌、嗜肺巴斯德菌、溶血性巴斯德菌、产气巴斯德菌、铜绿假单胞菌、栖稻假单胞菌、门多萨假单胞菌、粪产碱杆菌、阴道加特纳菌、卡它莫拉菌、莫拉克斯氏菌、CDC group EF-4a、特氏纤维单胞菌、戊糖片球菌、金黄色葡萄球菌、溶血性葡萄球菌、腐生葡萄球菌、模仿葡萄球菌、头状葡萄球菌、孔氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、鸡葡萄球菌、里昂葡萄球菌、山羊葡萄球菌、粘滑罗斯菌、麻疹孪生球菌、肺炎链球菌、咽峡炎链球菌、血链球菌、牛链球菌Ⅰ型、乳房链球菌、少酸链球菌、无乳链球菌、粪肠球菌、黄肠球菌、浅绿气球菌、解酪蛋白巨大球菌、拥挤棒杆菌、人皮肤棒状杆菌、蜂房芽孢杆菌、短芽孢杆菌、环状芽胞杆菌。分离培养鉴定出12个科21个属48个种179株细菌,肠杆菌科是主要优势菌群,葡萄球菌科、肠球菌科、假单胞菌科、巴斯德菌科、链球菌科是次优势菌群。应用TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法从灰仓鼠中检出167份核酸阳性标本,包括支原体、泰泽氏菌、空肠弯曲菌、CAR菌、幽门螺杆菌、肝螺杆菌、嗜肺巴斯德菌。TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测结果显示支原体是最主要的优势菌群,泰泽氏菌、空肠弯曲菌、CAR菌、幽门螺杆菌、肝螺杆菌是次优势菌群。结论:TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR结�
- 高正琴邢进冯育芳关伟鸿贺争鸣岳秉飞
- 关键词:灰仓鼠细菌多样性TAQMAN实时荧光定量PCR生化鉴定监测分析
- 长爪沙鼠淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒抗体ELISA检测方法的建立与应用
- 目的建立长爪沙鼠淋巴细胞脉络丛炎病毒(LCMV)抗体ELISA检测方法,应用于长爪沙鼠携带LCMV的检测。方法培养Vero细胞,接种LCMV毒种,制备Vero正常抗原和LCMV特异抗原,滴定酶结合物、正常抗原及特异抗原最...
- 王吉卫礼付瑞李晓波王淑菁邢进冯育芳巩薇岳秉飞贺争鸣
- 关键词:ELISA长爪沙鼠
- 文献传递
- 丝状网尾线虫的实时荧光定量PCR检测方法及试剂盒
- 本发明公开了丝状网尾线虫的实时荧光定量PCR检测方法及试剂盒,涉及生物工程技术领域,其技术要点为:所述试剂盒包括用于对丝状网尾线虫进行探针法实时荧光定量PCR检测的引物和TaqMan探针,是根据丝状网尾线虫的内转录间隔区...
- 高正琴邢进付瑞巩薇梁春南 柳全明
- 六年实验动物病原菌检测能力验证结果分析被引量:4
- 2018年
- 目的总结分析2011年、2013~2017年实验动物病原菌检测能力验证活动情况,提高检测能力,促进能力验证活动开展。方法 2011年、2013年~2017年,本院组织开展了六次7个项目的实验动物病原菌检测能力验证活动。通过汇总六年中能力验证活动的结果数据,分析整体趋势,总结归纳出现的问题。结果六年中共有全国20个省市的45个单位先后报名参加实验动物病原菌的能力验证活动,项目包括肺支原体、泰泽病原体、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌、肺炎克雷伯杆菌和支气管鲍特杆菌;满意率分别为75%、87.5%、80.0%、78.6%、93.3%、96.2%和88.0%。不满意结果原因主要有培养时间不足、可疑菌落筛选错误、生化鉴定错误、报告书写笔误以及未及时提交报告等。结论通过连续的能力验证活动,国内实验动物病原菌检测水平逐渐提高,达到预期目标。
- 邢进冯育芳王洪张雪清付瑞岳秉飞
- 关键词:实验动物病原菌检测