艾秀莲
- 作品数：34 被引量：95H指数：7
- 供职机构：新疆农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 雪莲PBP基因表达载体的构建被引量：7
- 2006年
- 目的:利用新疆雪莲特殊功能基因磷脂酰乙醇胺结合蛋白基因(XLPBP)与基础质粒构建植物表达载体pXLPBP,为介导该基因在植物中表达,以期提高植物抗寒力的转基因研究打下基础。方法:利用设计好的两端加有EcoRⅠ酶切位点的引物,对XLPBP全长基因片段进行PCR扩增,获得700bp左右大小的片段,将其纯化回收并与同样经过EcoRⅠ酶切的质粒pCAMBIA3301连接;然后采用冻融法和电击法,将含XLPBP基因的载体pCAMBIA3301转入根癌农杆菌中。结果:通过一系列分子克隆方法获得含雪莲XLPBP基因的植物表达载体,并经PCR实验证实。结论:利用以自身携带的非编码区为调控序列的XLPBP全长基因和双向表达载体pCAMBIA3301为基础构建植物表达载体,可望提高外源基因表达量。
- 李萍艾秀莲王志方王博
- 关键词：雪莲磷脂酰乙醇胺结合蛋白根癌农杆菌
- 新疆陆地棉转化雪莲XLPEBP基因的研究被引量：8
- 2007年
- 研究构建了一个含有除草剂基因和雪莲XLPEBP基因的重组质粒pXLPEBP,以新疆陆地棉(新石K5和新陆早17号)为材料,采用花粉管通道法进行转基因研究,对转基因后代进行除草剂筛选和PCR鉴定,结果表明,除草剂基因及雪莲XLPEBP基因已经整合到陆地棉基因组中。
- 吕秀娟危晓薇艾秀莲罗淑萍
- 关键词：雪莲花粉管通道法
- 正常人体淋巴细胞cDNA文库的构建被引量：2
- 2002年
- 应用GIBCOBRL建库试剂盒建立了正常人体淋巴细胞cDNA文库。取新鲜的正常人外周血 ,分离出淋巴细胞 ,进行体外培养 ,提取总RNA ,纯化mRNA ,并将其反转录成cDNA ,与SalI和NotI接头连接后插入λZipLox载体 ,体外包装后转染到Y10 90宿主菌中 ,进行滴度测试及文库扩增。构建的正常人淋巴细胞cDNA文库含 2 6×10 6重组子 ,克隆效率为 5× 10 12 重组子 /gcDNA ,插入片段长度约为 1～ 5kb。扩增后的文库浓度为 3× 10 7重组子 /μl,将文库稀释到 10 -6时所产生的噬菌斑密度最为适宜。试验结果表明 ,该库符合标准 ,所构建的正常人淋巴细胞cDNA文库为进一步筛选目的基因。
- 崔东红张伟姚华王国荃艾秀莲王新远吉军刘开泰许素玲
- 关键词：CDNA文库人外周血淋巴细胞
- 牛促卵泡激素基因克隆筛选和序列分析
- 1992年
- 从牛垂体中分离出总mRNA,经逆转录酶及大肠杆菌DNA聚合酶合成双链cDNA,经T4DNA聚合酶切成平末端后与Sma I酶切的pUC19连接,转化JM83,构建了脑垂体mRNA的cDNA文库。用标记的牛促卵泡激素基因的寡核苷酸片段进行杂交,从文库中筛选到几个阳性克隆,其中一个含有全长的牛促卵泡激素基因编码序列。利用PCR扩增技术从cDNA中扩增出了387bp的牛促卵泡激素基因,序列分析表明,10号克隆中的牛促卵泡激素基因含有起始密码ATG及终止密码TAA,所编码的氨基酸序列与天然牛促卵泡激寡素的氨基酸序列相同。
- 陈新国季青艾秀莲郭三堆石玉瑚
- 关键词：促卵泡激素CDNA克隆
- 猪脑垂体基因文库构建和促卵泡激素基因克隆的筛选
- 1991年
- 用甘油分级梯度离心法纯化噬菌体入EMBL_4,将纯化的EMBL_4DNA用BamHI/SaLI双酶切。用蛋白酶K及SDS法提取猪大分子DNA,Sau 3A部分酶切,将15-20Kb的“目的”DNA片段与载体连接,体外包装成噬菌体,构建了猪的基因文库。所得重组子值为1.38×10~6pfu,超过了建库要求的理论值,将基因文库DNA分成十份,用^(32)P标记合成的促卵泡激素基因寡核酸探针进行分子杂交,筛选出强杂交组分,进一步从强杂交组分中筛选出了几个阳性克隆。
- 陈新国艾秀莲季青石玉瑚胡冰
- 关键词：基因文库促卵泡激素
- 雪莲类PEBP基因在大肠杆菌中的表达及鉴定被引量：1
- 2008年
- 本实验旨在构建雪莲类PEBP基因原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化类PEBP基因所编码的蛋白,为进一步研究奠定基础。将雪莲类PEBP基因开放阅读框序列克隆到原核表达载体pET30(+)上,转化感受态表达菌株BL21(DE3),低浓度IPTG低温诱导融合蛋白的表达,纯化产物,Western blotting鉴定目的蛋白。IPTG低温诱导PEBP,经SDS-PAGE分析,其相对分子量约为28kD,与预期相符,表达量约占菌体蛋白的26.8%,并且通过亲和层析纯化了重组融合蛋白,Western blotting鉴定为阳性。成功构建了原核表达载体pET-PEBP,获得了高效表达产物,并为进一步研究雪莲类PEBP基因的抗冻功能打下基础。
- 王志方张学军王博周小云艾秀莲
- 关键词：磷脂酰乙醇胺结合蛋白原核表达雪莲
- 新疆雪莲冷调节蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了来源于新疆雪莲的冷调节蛋白及基编码基因与应用，目的是提供具有较强抗寒性能的冷调节蛋白及其编码基因。本发明所提供的冷调节蛋白名称是XLCOR，是具有序列表中序列2氨基酸残基序列的蛋白质，或者是将序列2中的氨基酸...
- 王志方王博艾秀莲
- 文献传递
- 补糖对丝氨酸摇瓶发酵产酸率的影响被引量：6
- 2003年
- 在测定丝氨酸产生菌黄色短杆菌C -1 2摇瓶发酵生长曲线和糖代谢曲线的基础上 ,研究补糖对丝氨酸产酸率的影响 ,并确定摇瓶条件下最佳的补糖浓度、补糖时间及补糖种类。
- 崔春生付建红谢玉清李晨华王成石玉瑚艾秀莲
- 关键词：丝氨酸摇瓶发酵产酸率
- 新疆鸡传染性腔上囊病病原的分离与鉴定
- 1999年
- 近年来，鸡传染性腔上囊病（ＩＢＤ）在我国各地呈普遍流行趋势，对养禽业造成严重损失，ＩＢＤ免疫失败的原因，被认为是与超强毒株或变异株的出现有关。新疆也不例外，该病不仅在个体户养鸡场发病严重，而且在许多大中型鸡场也常有发生，连从未发生过ＩＢＤ的克拉玛依市...
- 符子华易中胡尔玛西刘建元王宁李淑霞陈新国余红艾秀莲
- 关键词：传染性腔上囊病病原
- 提高平末端连接效率的研究被引量：4
- 2002年
- 在平末端连接反应中 ,为了提高连接效率 ,研究载体与片段的分子量比、载体与片段的摩尔比、连接反应体积、连接反应的温度、连接反应时间长短等条件对连接效率的影响 ,发现这些因素都会直接影响连接效率。因此在做不同的平末端连接反应时 ,应该把上述因素协同起来考虑。此外 。
- 张伟艾秀莲王玮王志方崔春生李晨华谢玉清
- 关键词：DNA片断
