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应用胚胎干细胞实验模型评价氢醌的胚胎毒性: 2015年; 目的建立胚胎干细胞实验(EST)模型,应用胚胎干细胞实验模型初步评价氢醌的胚胎毒性。方法体外培养小鼠成纤维细胞3T3和小鼠胚胎干细胞E14TG2a(ES-E14TG2a),四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测阳性对照5-氟尿嘧啶、阴性对照青霉素G和受试物氢醌对3T3细胞和ES-E14TG2a细胞的细胞毒性,计算3种化合物对ES-E14TG2a细胞和3T3细胞的半数生长抑制浓度(IC50)值IC50ES、IC503T3;采用悬滴-悬浮-贴壁法体外诱导胚胎干细胞向心肌细胞分化,根据浓度-反应曲线计算3种化合物对ES-E14TG2a细胞的半数分化抑制浓度(ID50)值ID50ES。利用胚胎毒性预测模型预测氢醌的胚胎毒性。结果氢醌对3T3细胞和E14TG2a细胞的增殖均有抑制作用,其IC503T3和IC50 ES分别为(5.97±0.48)、(2.57±0.10)μg/mL。氢醌对ESE14TG2a细胞的分化也有抑制作用,其ID50ES为(3.77±0.31)μg/mL。根据EST预测模型计算得出氢醌具有强胚胎毒性。结论氢醌具有强胚胎毒性。; 李付贵程伟民季明芳陈京; 关键词：胚胎干细胞氢醌胚胎毒性

人外周血树突状细胞的诱导培养及冻存被引量：1: 2008年; 目的:探讨人外周血树突状细胞(DC)的诱导培养及冻存方法和意义。方法:通过树突状细胞的分离和培养、抗原标本前处理、抗原的装载、实验分组、细胞冻存等,摸索出树突状细胞诱导扩增以及促进成熟的优化实验方案。结果:外周血单个核细胞可作为DC的来源,GM-CSF和IL-4可诱导其前体细胞向DC分化,添加促成熟细胞因子可以让细胞维持细胞生物活性。结论:人外周血DC细胞的诱导培养及冻存具有重要意义。冷冻DC细胞保持了它的特性,但会因冻融过程生物特性有所减低,为此在应用冻存DC细胞时应考虑增加输入细胞量。; 方慧云程伟民季明芳何洁冰李晓玲; 关键词：树突状细胞冻存

胃癌患者血清PGⅠ/PGⅡ测定与肿瘤病灶内癌基因表达改变的相关性研究被引量：4: 2019年; 目的研究胃癌患者血清胃蛋白酶原(PG)Ⅰ/PGⅡ测定与肿瘤病灶内癌基因表达改变的相关性。方法回顾性选择2015年10月至2018年2月期间在中山大学附属中山医院接受根治性切除手术的胃癌患者作为研究的胃癌组,另取同期体检的健康志愿者作为对照组。采集血清后测定PGⅠ及PGⅡ的含量,收集胃癌病灶、癌旁组织后测定抑癌基因、原癌基因、侵袭基因的表达量。结果胃癌组患者血清中PGⅠ/PGⅡ的比值均低于对照组(4.63±0.62 vs.10.45±1.86,t=24.907,P<0.05);胃癌病灶中p16、p53、PTEN、KISS1、TSPYL5的mRNA表达量均低于癌旁组织且与血清中PGⅠ/PGⅡ的比值呈正相关(P<0.05),Notch1、LOXL2、Cyclin D1、PCNA、MMP-2、CEACAM-1、Fascin-1、CST-6的mRNA表达量均高于癌旁组织且与血清中PGⅠ/PGⅡ的比值呈负相关(P<0.05)。结论胃癌患者血清中PGⅠ/PGⅡ值的降低与病灶内抑癌基因的低表达、原癌基因及侵袭基因的高表达密切相关。; 方慧云程伟民季明芳李付贵余霞黄汉添; 关键词：抑癌基因原癌基因

丁香酚胚胎毒性评价:应用胚胎干细胞的实验模型被引量：3: 2015年; 背景:丁香酚在医学及食品领域的应用越来越广泛,其药理学作用也不断被研究和发现。但是,对其毒性的研究尚未建立完整的数据库,特别是发育毒性及致畸性的安全性评价亟需完善。目的:建立胚胎干细胞实验模型的基础上,应用胚胎干细胞实验模型初步评价丁香酚的胚胎毒性。方法:体外培养小鼠成纤维细胞3T3和小鼠胚胎干细胞E14TG2a,MTT法检测阳性对照5-氟尿嘧啶、阴性对照青霉素G和受试物丁香酚对3T3细胞和E14TG2a细胞的细胞毒性,计算3种化合物对E14TG2a细胞和3T3细胞的半数生长抑制浓度值;采用悬滴-悬浮-贴壁法体外诱导胚胎干细胞向心肌细胞分化,根据浓度-反应曲线计算3种化合物对E14TG2a细胞的半数分化抑制浓度值。利用胚胎毒性预测模型预测丁香酚的胚胎毒性。结果与结论:丁香酚对3T3细胞和E14TG2a细胞的增殖均有抑制作用,其半数生长抑制浓度值分别为(3.613±0.192)和(1.799±0.131)mg/L。丁香酚对E14TG2a细胞的心肌分化亦有抑制作用,其半数分化抑制浓度值为(3.501±0.158)mg/L。根据胚胎干细胞实验模型预测模型计算得出丁香酚为强胚胎毒性化合物。这为进一步评价丁香酚的安全性提供了研究数据。; 李付贵陈京程伟民季明芳; 关键词：丁香酚毒性试验半数抑制浓度胚胎干细胞干细胞胚胎毒性

WT1抗原负载的DC联合CIK对鼻咽癌细胞的体外杀伤活性研究被引量：1: 2015年; 目的探讨WT1抗原负载的树突状细胞(DC)诱导多种细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对鼻咽癌细胞(CNE)的体外杀伤效应。方法采用密度梯度离心法获取外周血单个核细胞,常规法诱导DC、CIK细胞;流式细胞技术分析测定细胞表型;MIT法分别测定在4个不同效靶比时CIK、DC+CIK和WT1抗原负载的DC+CIK三组效应细胞对鼻咽癌细胞(CNE)的杀伤活性。结果在4个不同效靶比时WT1抗原负载的DC诱导CIK对鼻咽癌细胞的体外杀伤效应明显高于CIK、DC+CIK。结论 WT1抗原负载的DC诱导CIK对鼻咽癌细胞(CNE)的体外杀伤效应增强,为肿瘤临床生物免疫治疗提供了实验室基础。; 方慧云程伟民季明芳; 关键词：WT1 树突状细胞鼻咽癌细胞

CIK治疗11例中晚期肾癌的预后分析被引量：18: 2009年; 目的通过4年跟踪随访11例接受细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)治疗的中晚期肾癌,了解CIK细胞的治疗效果及患者的预后情况。方法收集我院治疗的肾癌20例,根据患者肾癌根治术后有无施行CIK生物治疗,将患者分为治疗组和对照组,跟踪随访4～6年,研究治疗组和对照组患者的生存情况。结果治疗组平均生存时间30个月,对照组平均生存时间11个月,差异有统计学意义(P<0.01)。结论CIK治疗肾癌安全有效,可以改善患者的预后。; 李慧芬李晓玲黄玉玲季明芳程伟民; 关键词：肾癌 CIK细胞生物治疗

应用胚胎干细胞实验模型评价塑化剂邻苯二甲酸二丁酯的胚胎毒性被引量：2: 2015年; 目的应用胚胎干细胞实验模型初步评价塑化剂邻苯二甲酸二丁酯的胚胎毒性。方法体外培养小鼠胚胎干细胞E14TG2a和小鼠成纤维细胞3T3,MTT法检测阳性对照5-氟尿嘧啶、阴性对照青霉素G和受试物邻苯二甲酸二丁酯对E14TG2a细胞和3T3细胞的细胞毒性,计算3种化合物对E14TG2a细胞和3T3细胞的半数生长抑制浓度值IC503T3、IC50E14TG2a;采用悬滴-悬浮-贴壁法体外诱导胚胎干细胞向心肌细胞分化,根据浓度-反应曲线计算3种化合物对E14TG2a细胞的半数分化抑制浓度值ID50E14TG2a。利用胚胎毒性预测模型预测邻苯二甲酸二丁酯的胚胎毒性。结果邻苯二甲酸二丁酯对E14TG2a细胞和3T3细胞的增殖均有抑制作用,其IC503T3和IC50E14TG2a分别为(321.20±8.60)μg/ml和(180.60±4.84)μg/ml。邻苯二甲酸二丁酯对E14TG2a细胞的分化亦有抑制作用,其ID50E14TG2a为(34.40±3.91)μg/ml。根据EST预测模型计算得出邻苯二甲酸二丁酯为弱胚胎毒性。结论邻苯二甲酸二丁酯为弱胚胎毒性。; 李付贵陈京程伟民季明芳项鹏; 关键词：胚胎干细胞邻苯二甲酸二丁酯胚胎毒性

鼻咽癌高危人群血浆EBV-DNA定量分析被引量：12: 2014年; 目的:探讨鼻咽癌高危人群E病毒DNA(Epstein-Barr virus DNA,EBV-DNA)的存在情况及其在鼻咽癌早期诊断中的应用价值。方法:2009-08-13-2010-07-27在广东省中山市小榄镇开展鼻咽癌筛查,ELISA法检测16 712名EBV抗体,确定鼻咽癌高危人群386名,同时收集鼻咽癌低危人群273名。收集同期中山市人民医院初诊鼻咽癌患者62例。荧光定量PCR方法检测高危人群血浆EBV-DNA,并随访1年,比较分析高危人群EBV-DNA定量检测的应用价值。结果:初筛鼻咽癌高危人群EBV-DNA阳性率为12.2%(47/386),高于鼻咽癌低危人群的3.3%(9/273),而低于初诊鼻咽癌患者的91.9%(57/62),3组差异有统计学意义,P<0.001。随访复查时,血清学持续高危人群EBV-DNA阳性率为9.7%(18/186),而血清学转变为非高危人群的EBV-DNA阳性率为3.1%(3/97),差异有统计学意义,P=0.045。筛查人群中血清学诊断鼻咽癌的阳性预测值为5.6%(32/572),而在鼻咽癌高危人群中增加EBV-DNA检测,其阳性预测值提高到44.6%(29/65)。结论:鼻咽癌高危人群血浆EBV-DNA定量检测能对血清学EBV抗体检测进行有效的补充,可大大提高筛查准确性,对鼻咽癌高危人群的监测具有重要作用。; 俞霞季明芳程伟民李星华吴标华何秀芳; 关键词：鼻咽癌高危人群 EBV-DNA 鼻咽癌筛查

中山市小榄镇肝癌高危人群筛查依从性及筛查效果分析被引量：4: 2020年; 目的:分析广东省中山市小榄镇肝癌高危人群筛查依从性和队列人群后续肝癌患者发病情况。方法:筛查方案参照《中国癌症筛查及早诊早治技术方案(2011年版)进行》,2012年开始对中山市小榄镇进行肝癌筛查,对ELISA法检测发现的乙肝表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)阳性者,采用甲胎蛋白(alpha-fetorprotein,AFP)联合超声检查的方法开展每年两次的诊断性筛查。对肝癌高危人群进行随访,随访截至2017年12月31日。统计学分析肺癌的发病率及人群筛选依从性。结果:初筛队列19386人,检出HBsAg阳性者2882人,阳性率14.9%。剔除初筛时发现的13例肝癌,实际随访高危人群2869人。2014~2017年对肝癌高危人群连续4年进行随访,AFP检测依从性(58.9%)显著高于B超检查(57.2%)依从性(P<0.01)。AFP检测和B超检查上半年依从性分别为62.8%和62.2%,下半年依从性分别为55.0%和52.1%,上半年依从性均显著高于下半年(P<0.01)。整体女性筛查依从性高于男性;35~54岁男性随访依从性最低。筛查队列中HBsAg阳性人群肝癌发病率为363.5/105,显著高于HBsAg阴性人群肝癌发病率20.9/105(P<0.05),而两组人群肝癌早诊率差异无统计学意义(57.9%vs.47.4%,P>0.05)。B超高依从组和HBsAg阳性组中肝癌患者生存率分别高于低依从组和HBsAg阴性组(P<0.05)。结论:筛查队列依从性和高危人群肝癌早诊率低。队列中B超检查依从性高的肝癌生存率相对较好。提高HBsAg阳性人群筛查依从性,是提高肝癌早诊率及生存率的重要途径之一。; 俞霞程伟民吴标华季明芳; 关键词：肝癌依从性发病率生存率

DC-CIK细胞抗鼻咽癌细胞的作用被引量：3: 2010年; 目的:研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)与树突状细胞(DC)共培养后DC-CIK细胞抗鼻咽癌细胞的作用。方法:正常人外周血单个核细胞诱导DC和CIK细胞,加入CNE1或CNE2细胞冻融液,将DC与CIK共培养,以CIK细胞单独培养为对照。用MTT法测定杀伤活性。结果:DC-CIK细胞杀伤鼻咽癌细胞活性高于CIK细胞(P<0.05);杀伤CNE1细胞活性高于CNE2细胞(P<0.05)。结论:DC-CIK细胞抗鼻咽癌细胞的作用显著,为DC-CIK细胞免疫治疗提供了实验和理论依据。; 方慧云程伟民李晓玲季明芳; 关键词：CIK细胞 DC-CIK细胞鼻咽癌

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程伟民

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