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脂多糖通过NF—κB途径上调大鼠腹膜间皮细胞表达CD40和ICAM-1被引量：3: 2008年; 目的观察脂多糖（LPS）作用下大鼠腹膜间皮细胞NF-κB活性及其对CD40和细胞间黏附分子1（ICAM-1）表达的影响。方法分离及培养大鼠腹膜间皮细胞。LPS不同浓度作用12h及LPS（5μg／m1）作用不同时间点收集细胞；LPS（5μg／m1）或BAY11-7085（一种IκBα的磷酸化抑制剂）不同浓度（1μmol／L和5μmol／L）预处理3h加LPS，作用3h后收集细胞；采用RT-PCR方法检测CD40和ICAM-1 mRNA表达。采用蛋白印迹检测NF—κB和磷酸化NF-κB（p-NF-κB）蛋白表达。结果与常规培养基对照组相比，5μg／ml LPS组CD40和ICAM-1 mRNA表达显著升高（P〈0．05），10μg／ml LPS组显著高于5μg／ml LPS作用组（P〈0．05）。5μg／ml LPS作用下，ICAM-1 mRNA表达从1h开始升高，3h达到高峰，之后逐渐降低。CD40 mRNA表达在1h无显著变化，3h时迅速达到高峰，之后逐渐降低。常规培养的大鼠腹膜间皮细胞结构性表达p-NF-κB蛋白；加入LPS后，p-NF-κB蛋白表达显著增加，其中30min～1h表达最强，之后逐渐降低，至2h仍显著高于常规培养组（P〈0．05）。加入5κmol／LBAY11-7085后，LPS诱导的CD40和ICAM-1 mRNA表达显著降低（P〈0．05），与正常对照组相比差异无统计学意义。结论LPS以时间依赖和浓度依赖模式上调CD40和ICAM-1的表达。NF-κB信号途径参与调节LPS诱导的大鼠腹膜间皮细胞CD40和ICAM-1的表达。; 张云芳阳晓邹循亮伍军王雅宁郭群英董秀清余学清; 关键词：腹膜间皮细胞 CD40 细胞间黏附分子1

罗格列酮通过核因子κB抑制脂多糖诱导的大鼠腹膜间皮细胞CD40和胞间黏附分子1的表达被引量：2: 2009年; 目的探讨罗格列酮对脂多糖（LPS）诱导的体外培养大鼠腹膜间皮细胞CD40和胞间黏附分子1（ICAM-1）表达的影响以及调节机制。方法分离及培养大鼠原代腹膜间皮细胞。将细胞随机分为正常对照组、LPS（5mg／L）组、BAY11-7085（NF-κB抑制剂）组（5μmol／L预刺激3h后加入LPS作用3h）、不同浓度罗格列酮（过氧化物酶体增殖蛋白激活性受体1配体）组（10、20μmol／L分别预处理3h再加入LPS5mg／L）、GW9662（过氧化物酶体增殖蛋白激活性受体v拮抗剂）预处理组（预处理3h后加入罗格列酮10μmol／L，3h后再加入LPS5mg／L）和溶媒对照组。加入LPS后1h收集细胞检测核因子κB（NF—κB）p65水平；3h收集细胞分别检测CD40和ICAM-1基囚表达；24h收集细胞分别检测CD40和ICAM-1蛋白表达。RT-PCR法检测基因表达；Western印迹和免疫荧光方法检测蛋白表达及核因子磷酸化。结果（1）常规培养的腹膜间皮细胞表达基础量CD40和ICAM-1，LPS显著上调其表达（P〈0．05）；LPS作用1h时腹膜间皮细胞磷酸化NF-κBp65活化水平显著增高，与对照组差异有统计学意义（1．10±0．17比0．55±0．06，P〈0．05）。（2）NF-κB抑制剂BAY11—7085预处理后LPS诱导的磷酸化NF-κBp65水平、CD40和ICAM-1表达显著低于LPS组（0．22±0．11比1．10±0．17，P〈0．01；0．34±0．02比0．50±0．06，P〈0．05；0．35±0．16比0．74±0．03，P〈0．05）。（3）罗格列酮预处理后，LPS诱导的磷酸化NF-κBp65水平、CD40以及ICAM-1蛋白表达亦显著低于LPS组（0．77±0．08比0．90±0．10，P〈0．01；0．79±0．16比0．99±0．06，P〈0．05；0．83±0．20比1．22±0．13，P〈0．05）。GW9662和罗格列酮联合预处理后，LPS诱导的磷酸化NF-κBp65水平与罗格列酮预处理组差异无统计学意义，但CD40和ICAM-1表达显著高于罗格列酮预处理组（0．95±0．19比0．79±0．16；1．04±0．24比0．83±0�; 张云芳阳晓伍军王雅宁邹循亮张锐刘眉郭群英骆宁董秀清余学清; 关键词：脂多糖类 CD40 罗格列酮腹膜间皮细胞

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王雅宁

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