王萌
- 作品数:6 被引量:29H指数:4
- 供职机构:天津医科大学第二医院更多>>
- 发文基金:天津市科技计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 靶向沉默核干因子对前列腺癌PC-3细胞全基因组表达谱变化的影响被引量:2
- 2009年
- 目的探讨核干因子(NS)基因在前列腺癌恶性增殖中的作用机制。方法采用表达谱基因芯片技术,分析前列腺癌PC-3细胞NS基因表达下调后全基因组表达谱的变化,筛选与NS相互作用的差异表达基因及信号通路。采用实时荧光定量聚合酶链反应对重要的差异表达基因进行验证。结果共筛选出219个差异表达的基因,这些基因涉及到细胞周期、细胞增殖、信号转导、细胞凋亡和细胞分化等多个方面。NS基因表达下调后主要引起周期素依赖激酶4抑制因子(INK4)家族基因(p15、p16和p18)的上调,以及cyclinD1和HDAC1基因的下调,其主要作用点位于CDK4/6-cyclin D和pRb—E2F1复合体上。结论在前列腺癌PC-3细胞中,NS基因可能主要通过抑制p15、p16和p18等INK4家族的肿瘤抑制基因的表达,从而促进肿瘤的发生和发展;NS基因是细胞周期G1/S期检查点的重要调控因子。
- 刘冉录徐勇张志宏王萌孙建涛张玥李胜芝
- 关键词:核干因子前列腺肿瘤
- 腹膜后胚胎型横纹肌肉瘤1例
- 2006年
- 齐士勇徐勇凌海宾杨全成李靖王萌
- 关键词:横纹肌肉瘤腹膜后肿瘤
- 靶向沉默核干因子对前列腺癌PC-3细胞增殖能力的影响被引量:5
- 2009年
- 目的:检测前列腺癌PC-3、LNCaP及DU145细胞中核干因子(Nucleostemin,NS)基因的表达,研究NS基因沉默后对PC-3细胞增殖能力的影响。方法:采用免疫细胞化学法及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测NS蛋白及mRNA在3种前列腺癌细胞中的表达。用NS特异性小发夹RNA表达质粒转染PC-3细胞,分别用RT-PCR及Western印迹方法检测转染后细胞(简称NS-shRNA-PC-3)中NSmRNA及蛋白的变化。比较NS基因沉默前后PC-3细胞体外、裸鼠体内增殖能力及凋亡情况的变化。结果:3种细胞中均显示NS基因高表达。转染后NS-shRNA-PC-3细胞中NS表达显著降低,细胞增殖速度减慢,G0/G1期细胞百分率显著升高,早期凋亡细胞增多。体内致瘤实验显示,NS基因沉默后,PC-3细胞在裸鼠体内增殖能力显著降低。结论:NS在前列腺癌细胞系中呈高表达,RNA干扰沉默NS基因后PC-3细胞增殖能力显著降低,凋亡细胞增多。
- 刘冉录徐勇张志宏王萌孙建涛张玥李胜芝
- 关键词:核干因子前列腺癌PC-3RNA干扰
- PSMA增强子/启动子特异性驱动shRNA靶向干扰EGFP的研究被引量:7
- 2008年
- 目的:探讨前列腺特异性膜抗原增强子、启动子(PSMAe/p)驱动shRNA转录效果,比较何种终止序列最有效。方法:分别以poly(A),minipoly(A),poly(U)为终止序列设计针对增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的干扰序列,克隆入经SalⅠ和BamHⅠ双酶切的pPSMAe/p载体上。然后通过脂质体介导,将各重组干扰质粒与pEGFP-C1质粒共转染PC-3和LNCaP细胞,采用荧光显微镜,流式细胞仪,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测EGFP在各组细胞中的干扰效果。结果:重组质粒中成功插入了目的基因片段;荧光显微镜和流式测定结果显示各干扰质粒与pEGFP-C1质粒共转染LNCaP后,各干扰组荧光表达均有不同程度减少,与空载体组相比均有统计学差异(P<0.01),pPSMAe/p-shEGFP-poly(A)组减少与pPSMAe/p-shEGFP-minipoly(A)组相比有统计学差异(P<0.05),与pPSMAe/p-shEGFP-poly(U)组相比有显著统计学差异(P<0.01)。各干扰载体与pEGFP-C1质粒共转染PC-3后各组荧光表达无统计学差异(P>0.05),EGFP mRNA和蛋白表达水平无明显差异;LNCaP细胞各干扰组中EGFP mRNA和蛋白表达与空载体对照组相比均有不同程度下降,以pPSMAe/p-shEGFP-poly(A)组最为明显。结论:成功构建了针对EGFP的RNA干扰表达载体pPSMAe/p-shEGFP-poly(A)、pPSMAe/p-shEGFP-minipoly(A)和pPSMAe/p-shEGFP-poly(U);PSMAe/p可特异性驱动shRNA转录;poly(A)终止信号终止转录最有效。
- 孙建涛徐勇张志宏杨阔王萌刘冉录韩育植
- 关键词:前列腺特异性膜抗原增强型绿色荧光蛋白
- 尿道周围注射治疗女性压力性尿失禁的研究进展被引量:10
- 2006年
- 压力性尿失禁是妇女常见疾病,严重影响患者生活质量。其众多治疗方法中,注射疗法具有安全、简便、微创等优点,而填充剂的选择对注射疗法的安全性和有效性至关重要。本文综述了不同注射材料治疗压力性尿失禁的方法、疗效及安全性等方面的研究进展。
- 王萌徐勇
- 关键词:尿道
- 核干因子在前列腺癌中的表达及其临床意义被引量:8
- 2008年
- 目的:探讨核干因子(NS)基因在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:利用RT-PCR及免疫组化方法对前列腺癌、良性前列腺增生(BPH)及高级别前列腺上皮内瘤(HGPIN)组织中NS基因的表达进行检测,并探讨NS蛋白表达水平与前列腺癌患者临床指标的关系。结果:前列腺癌中NSmRNA表达水平显著高于BPH中的表达水平,NS蛋白在前列腺癌中的强阳性、阳性及弱阳性表达率分别为48.8%、36.6%及12.2%,在BPH中分别为4.0%、32.0%及56.0%,在HGPIN中分别为5.0%、25.0%及60.0%,在前列腺癌中的表达水平显著高于BPH及HGPIN中的水平,具有统计学意义(P<0.05)。NS基因表达水平与前列腺癌的分化程度呈负相关,细胞分化程度越差,NS基因表达水平越高。结论:前列腺癌中高表达NS基因,NS基因在前列腺癌的不良分化和恶性增殖中可能起着重要作用。
- 刘冉录徐勇张志宏王萌孙建涛齐士勇张玥李胜芝
- 关键词:核干因子前列腺癌细胞分化增殖