王笑迎
- 作品数:4 被引量:2H指数:1
- 供职机构:暨南大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- OX40L在小鼠B16黑素瘤细胞中表达及对活化淋巴细胞凋亡影响
- 2009年
- 目的:构建OX40L的真核表达载体,分析其在B16细胞中的表达,研究OX40L对活化T淋巴细胞凋亡的影响。方法:以小鼠C57BL/6脾脏的cDNA为模板,PCR扩增小鼠OX40L基因,构建真核表达载体pVAX1-OX40L,转染B16细胞后,荧光染色检测OX40L的表达;利用AnnexinV-PE凋亡试剂盒,检测B16黑素瘤细胞-淋巴细胞体外混合培养中对活化淋巴细胞凋亡的影响。结果:成功构建OX40L的真核表达载体,并转染B16细胞中,流式细胞术和激光共聚焦显微术均可检测到OX40L表达于B16细胞表面。淋巴细胞体外混合培养显示,表达OX40L的B16细胞组活化淋巴细胞的凋亡率为6.57%,而空质粒转染组为17.24%。结论:OX40L能表达于B16细胞表面,并能显著抑制活化淋巴细胞凋亡。
- 高琦徐丽慧郭贺欧阳东云王笑迎何贤辉
- 关键词:OX40L黑素瘤淋巴细胞混合淋巴细胞培养
- 负载SIV抗原肽的中国恒河猴Mamu-B*1703可溶性单体及其四聚体的制备和鉴定
- 严重威胁着人类的生命与健康的HIV感染和艾滋病,在全球呈现逐年增加的趋势,已成为人们研究的热点,而疫苗是预防病毒感染和传播的最佳策略。由于SIV感染后恒河猴出现与HIV感染者相似的病理变化,和相似的临床表现,猴免疫缺陷病...
- 王笑迎
- 关键词:恒河猴猴免疫缺陷病毒四聚体
- 文献传递
- 负载野生型p53抗原肽HLA-A^*2402四聚体的制备和鉴定
- 2010年
- 目的:制备负载野生型p53抗原肽的HLA-A*2402四聚体,用于检测卵巢肿瘤患者p53特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)。方法:在p53125-134抗原肽TYS和轻链β2微球蛋白存在时,利用稀释法复性获得负载p53125-134抗原肽(TYSPALNKMF,TYS)的可溶性单体,经生物素酰化并纯化后与荧光素标记的链亲和素按4∶1的比例混合形成HLA-A*2402/TYS四聚体,以流式细胞仪检测特异性CTL的频率。结果:流式细胞术分析显示,卵巢癌患者外周血中可检测减低频率的p53125-134TYS抗原肽特异性CTL。结论:成功制备HLA-A*2402/TYS四聚体。
- 王笑迎查庆兵何贤辉欧阳东云徐丽慧郭贺高琦
- 关键词:四聚体细胞毒T淋巴细胞
- 负载SIV抗原肽的中国恒河猴Mamu-B*1703可溶性单体及其四聚体的制备和鉴定被引量:2
- 2009年
- 目的:制备负载SIV抗原肽的中国恒河猴Mamu-B*1703可溶性单体及其四聚体。方法:以含Mamu-B*1703重链cDNA序列的pMD19-T克隆为模板,通过PCR的方法克隆Mamu-B*1703重链基因,进而构建羧基端融合生物素化酶BirA底物肽(BSP)的Mamu-B*1703重链胞外域融合蛋白的表达载体,并在大肠杆菌中获得表达。β微球蛋白、SIV抗原肽共存时,通过稀释法复性可溶性Mamu-B*1703单体,经生物素化并纯化后与荧光素标记的链亲和素按4∶1的比例混合形成四聚体。结果:ELISA检测显示获得具有正确构象的负载SIV抗原肽的Mamu-B*1703四聚体。结论:印度恒河猴Mamu-B*1701特异性抗原肽IW9,与中国恒河猴的Mamu-B*1703相结合形成可溶性Mamu-B*1703/IW9单体和四聚体。
- 王笑迎欧阳东云何贤辉徐丽慧施焕敬高琦郭贺
- 关键词:恒河猴猴免疫缺陷病毒四聚体