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带血管蒂筋膜瓣包裹组织工程骨修复兔桡骨缺损对降钙素基因相关肽和神经肽Y表达的影响被引量：3: 2008年; 目的研究带血管蒂筋膜瓣包裹组织工程骨修复兔桡骨缺损对降钙素基因相关肽(CGRP)和神经肽Y(NPY)表达的影响。方法12只新西兰大白兔,每只动物均在左、右侧桡骨中段制作长1.5cm的骨与骨膜缺损,然后植入组织工程骨修复骨缺损,左侧采用带血管蒂筋膜瓣包裹组织工程骨(实验组),右侧仅放置组织工程骨(对照组)。于术后3、6、12个月分别处死4只动物,行免疫组化染色检测修复骨段内CGRP和NPY的表达,并用图像分析软件进行半定量分析。结果两组CGRP和NPY的表达量均随时间延长而增高(P<0.05),且各时间点实验组两者的表达均高于对照组(P<0.05)。3个月时两组CGRP阳性表达部位大致相同,多在血管和骨髓处,新生骨边缘和骨膜处也有少量阳性表达,而6和12个月时以骨膜处和血管周围最多。在各时间点两组的NPY阳性表达部位无明显差异,在灶状骨髓的血管周围表达最多,新生骨质边缘及骨膜处也有少量表达。结论与单纯组织工程骨植入相比,采用带血管蒂筋膜瓣包裹组织工程骨修复兔骨缺损在术后12个月内可以明显促进CGRP和NPY的表达。; 崔建德裴国献金丹江汕戴金良黄爱文王秋实赵培冉梁双武; 关键词：骨代用品带血管蒂筋膜瓣降钙素基因相关肽

组织工程骨神经化构建及其修复兔大段骨缺损的实验研究被引量：17: 2010年; 目的构建功能化组织工程骨是目前骨组织工程研究过渡到临床应用的重要方向。通过组织工程骨的神经化构建,在体内外实验的基础上探讨神经因素在骨组织工程中的作用。方法5～6月龄健康新西兰大白兔54只,雌雄不限,体重2～3kg,从骨髓中分离培养BMSCs;制备兔外周感觉神经匀浆和运动神经匀浆,按1∶10(V/V)加入LG-DMEM培养基,培养第2代BMSCs。对照组以LG-DMEM培养基培养。通过MTT实验、ALP染色和Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色鉴定,观察感觉、运动神经匀浆在体外对BMSCs增殖和成骨分化的影响。将体外经成骨诱导的BMSCs复合β磷酸三钙(βtricalcium phosphate,β-TCP)制备组织工程骨,植入兔体内修复15mm股骨与骨膜缺损。将兔随机分为3组,每组18只,A组在β-TCP生物支架材料的侧槽中植入感觉神经束,B组植入运动神经束,C组为单纯组织工程骨;分别于术后4、8、12周通过X线片、骨密度检测和免疫组织化学染色观察神经化组织工程骨的成骨效应。结果MTT法检测示,各组吸光度(A)值随培养时间延长均逐渐增加,从6d开始,感觉神经组和运动神经组的A值均低于对照组(P<0.01);8d和10d时,感觉神经组A值低于运动神经组(P<0.05)。培养7d后,感觉神经组和运动神经组ALP染色阳性细胞数均明显少于对照组;培养14d后,感觉神经组和运动神经组的细胞未见Ⅰ型胶原阳性表达,对照组的细胞Ⅰ型胶原表达呈阳性。兔大段骨缺损修复区的术后X线片及Yang评分提示,随着时间延长,各组Yang评分逐步升高,8周后A组评分高于B、C组(P<0.01),B、C组间差异无统计学意义(P>0.05)。术后12周骨密度检测显示A组骨缺损修复良好,骨密度值高于B、C组(P<0.01),B、C组间差异无统计学意义(P>0.05)。术后12周组织工程骨成骨局部的免疫组织化学染色显示,S-100在A组表达量较高,B组表达量较少,C组偶见表达;降钙素基因相关肽在A组表达量高,B�; 江汕刘勇王秋实赵培冉穆天旺王簕覃俊君陈思圆裴国献; 关键词：组织工程骨骨缺损神经植入 BMSCS

感觉、运动神经匀浆对兔成骨细胞增殖与成骨功能的影响被引量：5: 2008年; 目的研究兔周围感觉、运动神经匀浆对兔骨髓间充质干细胞来源的成骨细胞增殖与成骨能力的影响,探讨周围神经影响成骨的可能原因。方法提取大隐神经、坐骨神经肌支分别作为感觉、运动神经组织,制备匀浆。体外培养兔骨髓间充质干细胞,常规成骨诱导后鉴定备用。以含感觉、运动神经匀浆的诱导培养基、成骨诱导培养基、无地米诱导培养基及对照培养基作用于干细胞来源的成骨细胞,观察其增殖、分化及矿化情况。结果感觉神经组较其他各组显著促进成骨细胞增殖(P<0.01),成骨诱导组及对照组抑制细胞增殖(P≤0.001);感觉神经匀浆显著促进成骨细胞总蛋白及碱性磷酸酶(ALP)的合成(P<0.05),成骨诱导组及对照组ALP蛋白比活性显著高于运动神经组及无地米组(P<0.05);感觉神经组、成骨诱导组及对照组茜素红结合量显著高于无地米组及运动神经组(P<0.001),前三组之间无显著性差异。结论感觉神经成分能显著促进成骨细胞的增殖、分化与矿化,运动神经成分未见促成骨作用。; 王秋实裴国献江汕赵培冉梁双武戴金良崔建德; 关键词：隐神经坐骨神经成骨细胞增殖感觉神经运动神经

神经植入对大段组织工程骨成骨效果的一年观察: 2008年; 目的观察在组织工程骨内植入神经束后大段组织工程骨的长期成骨效果。方法新西兰大白兔64只，随机分为四组：A组，单纯组织工程骨组；B组，运动神经束植入组（股神经肌支）；C组，感觉神经束植入组（隐神经）；D组，感觉、运动神经束联合植入组。每只动物均在左侧股骨制作长1．5cm的段缺性骨与骨膜缺损，钢板固定后在骨缺损处分别植入四种方法制备的组织工程骨。术后1、3、6、12个月行大体观察、X线和组织学定量观察成骨情况。结果术后1、3、6个月时，在组织工程骨内植入感觉神经或联合植入两种神经后，比单纯组织工程骨和运动神经束植入的修复效果均有明显提高。术后12个月时，各组骨再生情况基本一致，但新生骨组织出现一定程度的吸收，其外观较正常股骨细，新生骨组织与兔股骨牢固愈合，并开始塑形且出现髓腔再通。结论在组织工程骨内植入感觉神经可促进成骨，而植入运动神经未见促进作用；组织工程骨可以修复兔大段骨缺损；该实验新生骨组织的吸收可能与模型的制作方法有关。; 戴金良裴国献刘勇崔建德王秋实姚旺祥江汕赵培冉梁双武; 关键词：神经化成骨

硅胶膜管联合组织工程骨修复兔桡骨缺损实验研究被引量：1: 2008年; 目的:探讨硅胶膜复合组织工程骨修复兔桡骨缺损的效果。方法:在新西兰大白兔左、右侧桡骨中段制作长1.5cm的骨与骨膜缺损,左侧采用硅胶膜包裹组织工程骨修复缺损为实验组,右侧单纯用组织工程骨修复缺损为对照组;术后3、6、9个月通过肉眼观察,组织学观察和生物力学检测,评价硅胶膜复合组织工程骨修复兔桡骨缺损的效果。结果:术后3个月实验组可见局部成熟的成骨区域,优于对照组;实验组6个月成熟成骨区域增大,可见明显血管;实验组9个月成骨区域基本上都是成熟胶原纤维,且结构排列规则,血管明显;生物力学检测发现实验组的压缩刚度、抗扭转刚度、三点弯曲最大载荷、抗折弯刚度都明显优于对照组。结论:硅胶膜包裹组织工程骨修复骨缺损效果良好,不但能促进骨组织的生长和成熟,并且能明显提高骨组织的力学性能;硅胶膜除了可以限制纤维组织的长入,还可以引导血管的长入和其他营养物质聚集在组织工程骨内,很好地发挥屏障和引导作用。; 崔建德裴国献江汕戴金良王秋实赵培冉梁双武; 关键词：骨缺损硅胶膜组织工程骨引导性组织再生

单纯血管束、神经束分别植入组织工程骨修复兔骨缺损对降钙素基因相关肽和神经肽Y表达的影响被引量：7: 2008年; 目的比较单纯血管、神经束分别植入组织工程骨修复兔骨缺损对神经肽降钙素基因相关肽（calcitonin gene related peptide，CGRP）和神经肽Y（neuropeptide Y，NPY）表达影响。方法36只新西兰大白兔，随机平均分为3组：A组为组织工程骨＋股血管束植入，B组为组织工程骨＋感觉神经束植入，C组为单纯组织工程骨。每只动物均在右侧股骨制作长1．5cm的段缺性骨与骨膜缺损，钢板固定后分别用以上方法修复大段骨缺损。术后3、6、12个月行免疫组化染色检测修复骨段内的CGRP和NPY的表达，并采用图像分析软件行半定量分析。结果CGRP和NPY的表达量在A、B、C3组均随时间推移而增多（P=0．000），在3个月时A组较B组多（P=0．000），但在6个月和12个月时A组和B组的表达量无明显差异（P〉0．05）。A、B两组在3、6、12个月时的表达量均较C组多（P=0．000）。结论与单纯神经束植入组相比，单纯血管束植入组织工程骨修复兔骨缺损在术后3个月可以明显促进CGRP和NPY表达，但后期两组对神经肽表达的影响作用无明显差异。; 崔建德裴国献江汕戴金良刘勇姚旺祥黄爱文王秋实赵培冉梁双武; 关键词：血管束降钙素基因相关肽

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王秋实

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