王海海
- 作品数：5 被引量：21H指数：2
- 供职机构：南京农业大学农学院作物遗传与种质创新国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划长江学者和创新团队发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 转蚕丝心蛋白基因改良了棉花纤维品质被引量：7
- 2009年
- 利用农杆菌介导法将蚕丝心蛋白基因(fibroin)导入陆地棉品系WC,共获得了9块愈伤组织系的30株再生植株.PCR检测、卡那霉素抗性筛选和GUS组织化学分析均为阳性的有17株.经连续4代的卡那霉素抗性筛选和PCR检测,在T3代获得了6个转化事件的转基因纯系.Southern blot和Northern blot结果表明,fibroin已整合到6个纯合株系基因组,且能稳定遗传和表达.扫描电子显微镜和纤维品质检测结果显示,所有转基因纯合株系棉纤维的转曲数和纤维伸长率比对照明显增加,部分株系比强度提高,说明蚕丝心蛋白基因在棉纤维中特异表达影响了棉纤维的结构和品质,可以获得纤维品质改良的株系,有望在生产上得到应用.
- 李飞飞吴慎杰吕芬妮陈天子琚铭王海海蒋彦婕张洁郭旺珍张天真
- 关键词：陆地棉纤维品质
- 果胶盐裂解酶基因（Ghpel）在棉纤维发育中的功能分析
- ＜正＞果胶盐裂解酶（Pectate lyase,PEL）可以专一的降解去酯化果胶（de-esterified pectins）,对细胞壁的松弛、细胞的伸长和果实成熟起重要作用。
- 王海海吴慎杰李飞飞蒋彦婕张庆虎吕芬妮张天真郭旺珍
- 文献传递
- 35S启动子甲基化引起棉花转基因沉默(英文)被引量：14
- 2008年
- 用带PBI121质粒的农杆菌LBA4404菌株转化泗棉3号胚性愈伤组织,获得的再生植株进一步对gus和nptⅡ基因进行PCR跟踪检测,共得到97株阳性转基因植株。GUS组织化学检测发现,97株转基因幼苗中有10株GUS检测阴性,嫁接后,只成活一株。利用来源于同一愈伤系的GUS检测阳性植株作为对照,对这一GUS检测阴性的植株进行gus基因沉默机理研究。Southern分析表明,该GUS检测阴性植株与GUS检测阳性植株有相同拷贝数。GUS组织化学检测和RT-PCR分析显示,gus基因在GUS检测阴性植株中没有表达,而nptⅡ基因在这两株转基因棉花中都表达。用限制性内切酶-PCR法分析35S启动子区甲基化发现:GUS检测阴性植株35S启动子区TATA box的HapII/MspI酶切位点发生甲基化,而GUS检测阳性植株该位点没有甲基化。以上研究表明,这株gus沉默的转基因棉花可能是由于其35S启动子区甲基化引起的。
- 王海海吴慎杰李飞飞陈天子蒋彦婕琚铭赵君吕艳辉张天真郭旺珍
- 关键词：甲基化转基因沉默转基因棉花
- 棉花果胶裂解酶基因(GhPEL)的功能研究及农杆菌介导棉花胚性愈伤组织转化体系的建立
- 大量棉纤维相关基因在棉纤维不同发育时期特异表达，控制着纤维的伸长和发育。单细胞结构的棉纤维为研究纤维相关基因在纤维发育中的功能提供了一个良好的实验系统。棉花纤维发育相关基因的克隆和遗传转化体系的建立为棉花目标性状的遗传改...
- 王海海
- 关键词：棉花农杆菌胚性愈伤组织
- 文献传递
- 对一个新发现的棉纤维突变体的鉴定及特性分析
- 2012年
- 在农杆菌介导的转基因组织培养再生后代中发现了1个无绒有絮的纤维发育突变体,通过自交选择T3代获得其纯合体,命名为CM突变体。尽管CM突变体从转基因后代中发现,但和转基因插入位点无关,推测是在组织培养过程中产生的点突变所致。通过与陆地棉遗传标准系TM-1,海岛棉军海1号,以及新乡小吉无绒有絮(XinFLM),新乡小吉无绒无絮(XinWX),徐州142无绒无絮(XZ142WX),显性光子N1N1,隐性光子n2n2、SL-7-1、MD17及T586等一系列纤维发育突变体分别配制F2组合进行突变基因的遗传及等位性分析,结果表明CM突变体与纤维发育正常的TM-1和军海1号杂交,F1表型均为无绒有絮,F2表现无绒有絮和有绒有絮3:1分离,说明该突变体与纤维发育正常材料相比,在短绒发育方面存在1个位点的差异,该突变性状由单显性基因控制。等位性测验及分子定位均表明,控制该突变体短绒的基因与控制N1N1显性光子的N1基因等位。扫描电镜进一步证明该基因突变会造成纤维起始突起延迟。与N1N1突变体相比,CM突变体的衣分比N1N1显著高,而百粒重比N1N1极显著低。推测CM突变体中的突变基因与显性N1基因为复等位基因。
- 张锐吕芬妮王海海郭旺珍
- 关键词：陆地棉转基因
