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王振东: 作品数：79 被引量：288H指数：9; 供职机构：沈阳农业大学农学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金质检公益性行业科研专项项目国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>

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产纳他霉素生防菌A01和A02与已知产生菌的RAPD比较被引量：3: 2010年; 为了明确自主分离的天然抗真菌活性产物——纳他霉素产生菌A01和A02与已知纳他霉素产生菌的遗传相似性,采用RAPD技术对这2株菌和3个产纳他霉素的标准菌株进行了比较分析。利用筛选出的7个随机引物对5个菌株的PCR扩增共得到154条清晰稳定的DNA条带,其中同源性条带86条,多态性条带68条,分别占总条带数的55.8%和44.2%,平均每个引物扩增出9.7个多态性条带,得到了丰富的DNA指纹图谱。所得数据经NTSYS pc 2.10e软件聚类分析,表明5个菌株间的遗传距离为0.0991~0.4738,其中A02与其它菌株间的遗传距离均较远。结合前期的分类研究结果,确证了菌株A02为新的纳他霉素产生菌。; 王振东亓芳卢彩鸽刘霆刘伟成; 关键词：纳他霉素生防链霉菌 RAPD

多重荧光定量PCR检测鼠感染3种病原体的方法被引量：1: 2011年; 目的建立多重荧光定量PCR快速检测以鼠为宿主伯氏疏螺旋体、弓形虫和恶性疟原虫的方法,对预防3种病原体引发的疫情具有重要意义。方法通过设计特异性引物和探针,扩增伯氏疏螺旋体23S rRNA基因,弓形虫的B1基因和恶性疟原虫的SSU基因,采用倍比梯度稀释法检测该体系的灵敏度,以另外8种以鼠为宿主的致病菌评价检测体系的特异性;建立了同时感染3种病原体的鼠全血模拟样本检测试验,以验证方法的适用性。结果建立自鼠血液模拟样本中同时检测伯氏疏螺旋体、弓形虫和恶性疟原虫的多重荧光定量PCR方法,检测3种病原体的灵敏度分别为5.5、12.8、17.2拷贝/μl,特异性强。结论建立了多重荧光定量PCR检测伯氏疏螺旋体、弓形虫和恶性疟原虫方法,缩短了检测时间,在疾病防控等方面有很好的应用前景。; 吉尚志杨宇王静王振东纪海波; 关键词：伯氏疏螺旋体弓形虫恶性疟原虫鼠传疾病

甘薯褪绿矮化病毒西非株系实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：12: 2014年; 依据Gen Bank中登录的甘薯褪绿矮化病毒(Sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV)西非株系(WA)的核苷酸序列,分别设计两对特异性引物和一条Taq Man探针。以SPCSV-WA外壳蛋白(cp)基因的重组质粒为阳性标准质粒绘制标准曲线,通过优化反应体系和反应条件,建立了SPCSV-WA的实时荧光定量PCR检测方法。试验结果表明,该方法只能检测到目的病毒,标准曲线的斜率和相关系数分别为-3.239和1,扩增效率为103.568%。最低可检测到约3.31 copies/μL的阳性质粒,灵敏度比常规PCR高1 000倍。本研究建立的SPCSV实时荧光定量PCR方法可用于田间样品的检测,为SPCSV的早期预警和流行学研究提供了技术手段。; 王丽王振东乔奇秦艳红张德胜田雨婷王爽张立军张振臣; 关键词：实时荧光定量PCR

检测土拉弗朗西斯菌的生物素—亲和素ELISA法的建立被引量：1: 2010年; 〔目的〕建立一种快速、敏感、特异检测土拉弗朗西斯菌的免疫学方法。〔方法〕应用生物素-亲和素标记系统,建立双抗体夹心ELISA方法,检测土拉弗朗西斯菌,并进行"模拟样品"的检测判定其定量检测能力。〔结果〕建立的生物素—亲和素ELISA检测土拉弗朗西斯菌的方法具有很好的敏感性和特异性,检测FopA蛋白的灵敏度达到6ng/ml;批内变异系数1.96%～6.64%,批间变异系数8.94%～10.02%,重复性好;检测不同浓度马秋波GP2蛋白、天花M1R蛋白、黄热YF-E-D3蛋白、禽流感NP蛋白、登革病毒Deng-E-D3蛋白和普氏立克次体120N蛋白,未发现交叉反应;对"模拟样品"中土拉弗朗西斯菌FopA蛋白的检测回收率为91.7%～125.0%。〔结论〕应用生物化的FopA多抗与酶标亲合素结合,建立了检测土拉弗朗西斯菌的生物素—亲和素放大酶联免疫吸附法(BSA-ELISA),具有较好的灵敏度和特异性,在病原菌的识别、快速检测、应对生物恐怖威胁中具有广阔的应用前景。; 景滢滢杨宇王静杨永莉孙肖红胡孔新王振东; 关键词：土拉弗朗西斯菌多克隆抗体

高粱靶斑病菌粗毒素对高粱胚根生长及胚根细胞膜透性的影响被引量：2: 2012年; 为了揭示高粱靶斑病菌的致病机理,用不同浓度病原菌粗毒素处理高粱种子L407B和Tx622B,测定其胚根生长抑制率、电导率和丙二醛(MDA)含量,探讨高粱靶斑病菌粗毒素对高粱不同品种胚根生长及胚根细胞膜透性的影响。结果表明,病菌粗毒素对高粱胚根生长有明显的抑制作用。在同一毒素浓度下,处理后2天,处理组胚根的相对电导率和MDA含量均高于对照组;同一处理时间内,不同浓度毒素处理后胚根相对电导率和MDA含量均高于对照组。说明高粱靶斑病菌毒素能降低高粱胚根细胞膜透性,且不同高粱品种间差异显著。; 张园园徐秀德王振东张立军姜钰胡兰董怀玉; 关键词：粗毒素致病力电导率丙二醛

珍稀绢丝昆虫柳蚕的DNA条形编码与系统进化初步分析被引量：10: 2009年; 利用DNA测序技术获得柳蚕(Actias selene)线粒体细胞色素酶C亚基Ⅰ基因(COI)5′端574 bp的片段,作为用于柳蚕种质资源分子鉴定的DNA条形编码(GenBank:FJ358505)。测定的柳蚕COI基因序列与其它大蚕蛾科绢丝昆虫的COI序列一样,均表现出偏好于碱基T的倾向(AT skew=-0.179)。在所分析的蚕类昆虫中,柳蚕与合目大蚕蛾的遗传距离最小(0.120),而与蓖麻蚕之间的遗传距离最大(0.138)。构建的NJ和UPGMA分子树中,大蚕蛾科的柳蚕属、柞蚕属、蓖麻蚕属、大乌桕蚕属、栗蚕属均各自形成一个支系,并且明显形成两个分支:大蚕蛾族(saturni-ini),包括柳蚕、柞蚕和栗蚕;眉纹大蚕蛾族(attacini),包括蓖麻蚕和大乌桕蚕。这一结果与传统分类一致。; 濮佳明武松霍锡敏王欢夏润玺李喜升王振东罗朝斌刘彦群; 关键词：柳蚕系统进化

一种改进的快速高效DNA回收法被引量：6: 1994年; 本文介绍了一种简易、高效、快速的ＤＮＡ回收法。该法回收ＤＮＡ效率可达９０％以上，且省时经济、适用范围广。回收的ＤＮＡ片段稍加纯化处理即可用于酶切、连接等多种分子操作。; 王振东刘玉乐田波; 关键词：DNA 回收

初步建立胶体金免疫层析法快速检测东部马脑炎抗体被引量：2: 2011年; 东部马脑炎病毒（eastern equine encephalitis virus，EEEV，以下简称为东马病毒）是引起东部马脑脊髓炎的病原体。东马病毒主要是通过黑尾脉毛蚊（Culisetamelanura）和环跗库蚊（Culextarsalis）传播，而且可以经含有病毒的气溶胶通过呼吸道感染人类，感染后发病率高，传染性强，致死率高，缺乏有效的预防方法，病愈后多留有后遗症，所以被国际社会列为防制生物恐怖的主要病种之一，备受世界各国关注。; 王林林杨宇王振东胡健萍王静; 关键词：胶体金免疫层析法 ENCEPHALITIS 抗体脑脊髓炎

土拉弗朗西斯菌胶体金免疫层析快速检测方法的建立: 2010年; 目的建立胶体金免疫层析技术快速定量检测土拉弗朗西斯菌。方法利用胶体金标记和双抗体夹心免疫层析技术,建立土拉弗朗西斯菌的快速检测方法,评价其特异性和敏感性,并拟合检测曲线进行定量检测。在面粉、饼干、果冻、梨汁等食品样品中添加土拉弗朗西斯菌的FopA蛋白模拟污染样品,评价该方法对固体、半固体、液体等食品样品的检测能力。结果该法可在10min内完成定性和定量检测,灵敏度为750ng/ml,线性范围750～24000ng/ml、回收率为56.7%～89.2%。结论所建立的检测土拉弗朗西斯菌的胶体金免疫层析方法,能快速、灵敏、特异、准确地检测样品中的土拉弗朗西斯菌,适用于现场快速检测。; 景滢滢杨宇杨永莉谢思嘉孙肖红王静王振东; 关键词：土拉弗朗西斯菌胶体金免疫层析

高粱靶斑病菌侵染对高粱光系统Ⅱ的影响被引量：3: 2012年; 以高粱品种Tx622B为试验材料,通过测定叶片叶绿素含量、叶绿素荧光快速诱导动力学曲线、过氧化氢(H2O2)含量和丙二醛(MDA)含量,来研究高粱靶斑病菌[Bipolaris sorghicola(Lefebvre&Sherwin)Alcorn]侵染高粱叶片后对光系统II(PSII)结构和功能的影响。结果表明,受病原菌侵染的高粱叶片,H2O2和MDA含量均升高,膜脂过氧化的程度加剧;快速叶绿素荧光诱导动力学曲线发生明显变化,进一步的JIP测试分析表明病原菌侵染严重伤害了PSII供体侧,阻断了受体侧QA到QB的电子传递,降低了反应中心的活性。; 张园园徐秀德王振东张立军王丽娟徐婧刘可杰; 关键词：过氧化氢

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