王圆圆
- 作品数：59 被引量：202H指数：8
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- 控制血糖对糖尿病肾脏疾病大鼠肾脏组织Wnt4/β-catenin信号通路及肾脏纤维化的影响被引量：4
- 2019年
- 目的观察降糖治疗对DKD大鼠肾脏组织Wnt4/βcatenin信号通路相关分子表达的影响,探讨降糖治疗延缓DKD肾纤维化的可能机制。方法 24只SD雄性大鼠,分为正常对照组(NC)、DKD组和胰岛素降糖组(INS),每组各8只。微量末梢血检测HbA1c,生化法测血糖、BUN、24 h UAlb。HE、Masson染色观察肾脏病理改变,免疫组织化学检测Wnt4和β连环蛋白(βcatenin)在肾脏组织的表达。Western blot检测Wnt4、βcatenin、磷酸化糖原合成酶激酶3β(pGSK3β)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、上皮型钙黏附蛋白(Ecadherin)、I型胶原(CollagenⅠ)蛋白在大鼠肾脏组织中的表达。RTPCR检测Wnt4、βcatenin和CollagenⅠmRNA表达。结果与NC比较,DKD组Wnt4 mRNA和蛋白表达升高[(0. 27±0. 04)vs(1. 28±0. 42),(0. 03±0. 01)vs(0. 09±0. 03),P<0. 05],pGSK3β、βcatenin和αSMA蛋白表达升高[(0. 13±0. 02)vs(0. 92±0. 35),(0. 11±0. 03)vs(0. 47±0. 12),(0. 02±0. 002)vs(0. 20±0. 04),P<0. 05],CollagenⅠ沉积增加[(0. 01±0. 01)vs(0. 20±0. 07),P<0. 05]。与DKD组比较,INS组Wnt4 mRNA和蛋白表达降低[(1. 28±0. 42)vs(0. 78±0. 12),(0. 09±0. 03)vs(0. 05±0. 01),P<0. 05],pGSK3β、βcatenin和αSMA蛋白表达降低[(0. 92±0. 35)vs(0. 28±0. 02),(0. 47±0. 12)vs(0. 16±0. 03),(0. 20±0. 04)vs(0. 08±0. 01),P<0. 05],CollagenⅠ沉积减少[(0. 20±0. 07)vs(0. 03±0. 01),P<0. 05]。结论控制血糖可抑制Wnt4/βcatenin信号通路的活化,减少ECM沉积,延缓糖尿病大鼠肾纤维化的发展。
- 石明隽田平平刘忠强李圆圆孔静王圆圆肖瑛张帆卢雨微郭兵
- 关键词：血糖糖尿病肾脏疾病肾脏纤维化WNT信号通路
- 吡格列酮改善糖尿病肾脏疾病肾小管间质纤维化病变的动物实验研究被引量：7
- 2019年
- 目的探讨吡格列酮通过影响AMPK/PI3K/mTOR通路抑制糖尿病肾脏纤维化发生发展的分子机制。方法 24只SD大鼠随机分为正常对照组(NC)、糖尿病组(DM)及吡格列酮治疗组(BG),每组各8只。DM组和BG组STZ腹腔注射复制T1DM模型,成模后第9周BG组予吡格列酮10mg/(kg·d)连续灌胃8周。16周末处死大鼠,取血清和处死前24 h尿液检测生化指标,观察肾脏组织病理改变,免疫组织化学法和Western blot检测目的蛋白的表达。结果与NC组比较,DM组FBG、UACR、TG、TC均升高(P<0. 05),与DM组比较,BG组UACR、TG和TC降低(P<0. 05)。与NC组比较,BG组肾小管间质纤维化增加,胶原阳性染色加重,胶原容积分数(CVF)[(17. 48±0. 59)%vs(36. 16±2. 09)%,P<0. 05],肾间质Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)[(0. 08±0. 02)vs(0. 26±0. 02),P<0. 05]沉积增加而上皮钙黏附蛋白(E-cadherin)减少[(0. 44±0. 01)vs(0. 19±0. 01),P<0. 05],肾组织活化的AMPKα减少[(3. 42±0. 57)vs(0. 93±0. 05),P<0. 05],活化的Akt[(0. 27±0. 04)vs(0. 49±0. 06),P<0. 05]、m TOR[(0. 63±0. 15)vs(5. 28±0. 89),P<0. 05]及P70S6K[(0. 63±0. 09)vs(0. 97±0. 13),P<0. 05]增加,E-cadherin减少[(0. 45±0. 09)vs(0. 27±0. 06),P<0. 05],α-SMA表达增加[(0. 21±0. 04)vs(0. 51±0. 12),P<0. 05];与BG组比较,DM组肾脏纤维化病理改变减轻,胶原阳性染色减轻,CVF[(36. 16±2. 09)%vs(25. 24±2. 34)%,P<0. 05],肾间质Col-Ⅲ沉积减少[(0. 26±0. 02)vs(0. 18±0. 03),P=0. 005],E-cadherin增加[(0. 19±0. 01)vs(0. 31±0. 02),P<0. 05],肾组织活化的AMPKα增加[(0. 93±0. 05)vs(2. 64±0. 76),P<0. 05],活化的Akt[(0. 49±0. 06)vs(0. 29±0. 08),P<0. 05]、m TOR[(5. 28±0. 89)vs(1. 63±0. 71),P<0. 05]和P70S6K[(0. 97±0. 13)vs(0. 71±0. 09),P<0. 05]减少,肾组织E-cadherin蛋白表达增加[(0. 27±0. 06)vs(0. 42±0. 03),P<0. 05],α-SMA表达减少[(0. 51±0. 12)vs(0. 24±0. 05),P<0. 05]。结论吡格列酮可能通过增加AMPKα的活化,抑制PI3K/mTOR信号通路,缓解糖尿病大鼠肾脏纤维化病变。
- 刘慧铭刘玲伶周星丞彭伟张小欢毛彦稳任飞燕王圆圆张帆张莹莹石明隽肖瑛桂华珍汤磊郭兵
- 关键词：糖尿病肾脏疾病吡格列酮腺苷酸活化蛋白激酶MTOR信号通路
- SnoN在高糖诱导大鼠原代肾小管上皮细胞转分化中的作用
- 目的：肾小管上皮细胞向间充质细胞转分化(epithelial-to-mesenchymal transition，EMT)在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾小管间质纤维化过程中起着重要作用，...
- 刘瑞霞王圆圆肖瑛石明隽郭兵
- 关键词：肾小管上皮细胞间充质细胞转分化作用
- 文献传递
- 大鼠肾组织PETN表达下调在糖尿病肾病发展中的作用被引量：19
- 2011年
- 转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)激活磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinositide-3-kinase,PI3K)-蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/Akt)通路与糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的发生发展密切相关,而第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)可以负调节PI3K-PKB/Akt通路。本研究旨在观察糖尿病大鼠肾组织PTEN的表达变化及其在DN发生发展中的可能作用。16只Sprague-Dawley大鼠分成正常对照组和糖尿病组(n=8)。尾静脉注射链脲菌素(streptozotocin,STZ)复制糖尿病大鼠模型;12周处死大鼠,检测相应生化指标并计算肾脏指数;HE染色观察肾组织病理学改变;免疫组化和Western blotting检测PTEN、TGF-β1、PI3Kp110α、Akt1、p-Akt1(Ser473)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和CollagenⅣ的蛋白表达;RT-PCR检测PTEN mRNA的表达。结果显示,糖尿病组大鼠肾脏指数、血糖、血肌酐和24h尿蛋白较对照组显著升高(P<0.05),且肾脏发生病理学改变,表明大鼠已并发DN;与对照组比较,糖尿病组大鼠肾小管上皮细胞中TGF-β1、Akt1、PI3Kp110α和肾间质FN、CollagenⅣ蛋白的表达均显著增加(P<0.05);PTEN主要分布于肾小管上皮细胞中,糖尿病组大鼠PTEN蛋白的表达显著减少(P<0.05),仅为对照组大鼠的49%;而p-Akt1(Ser473)蛋白表达同总Akt1表达趋势一致,在糖尿病组大鼠表达显著增加(P<0.05),且PTEN表达的减少与p-Akt1(Ser473)表达的增多呈显著负相关(P<0.05);PTEN mRNA表达在糖尿病组大鼠较对照组大鼠显著减少(P<0.05)。以上结果提示,糖尿病大鼠肾组织PTEN表达减少,可能使TGF-β1过激活PI3K-PKB/Akt通路,促进DN的发生发展。
- 王圆圆刘瑞霞郭兵肖瑛石明隽皮明婧文箐颍张国忠
- 关键词：糖尿病肾病PTEN磷酸化AKT
- 丹芪合剂和依那普利对糖尿病大鼠肾脏VEGF mRNA的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨丹芪合剂和依那普利对糖尿病大鼠肾脏病理结构和血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤维素连接蛋白(FN)表达的影响。方法:雄性SD大鼠24只随机分成4组,分别为正常对照组(C组)、糖尿病组(D组)、依那普利治疗组(E组)以及丹芪合剂治疗组(Y组)。尾静脉注射链脲菌素(STZ)复制糖尿病大鼠模型,12周处死大鼠,生化方法测血糖、血肌酐、胆固醇、甘油三脂及24h尿蛋白量,计算肾脏指数(KI);HE染色光镜观察肾组织形态;免疫组织化学法检测肾组织TGF-β1、FN的表达;RT-PCR检测肾组织VEGFmRNA表达情况。结果:与C组相比,糖尿病大鼠KI、血糖、血肌酐、胆固醇、甘油三脂、24h尿蛋白量均显著增高并出现蛋白尿,E组和Y组大鼠除血糖、KI外均显著低于D组。免疫组织化学结果显示正常肾组织中TGF-β1几乎没有阳性染色,FN有少量表达,而DN时,TGF-β1和FN表达都显著增加(P<0.01),E组和Y组大鼠,FN和TGF-β1表达下调(P<0.01)。RT-PCR结果提示,与C组相比,D组VEGFmRNA明显上调(P<0.05),而E组和Y组大鼠较D组表达减少。结论:依那普利和丹芪合剂对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用,其机制可能与其下调肾组织中VEGFmRNA有关。
- 王圆圆刘瑞霞肖瑛石明隽郭兵
- 关键词：糖尿病肾病转化生长因子Β血管内皮生长因子丹芪合剂
- α-硫辛酸对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其可能的机制被引量：4
- 2018年
- 目的观察α-硫辛酸(ALA)对糖尿病大鼠肾脏的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法复制糖尿病大鼠模型,分为糖尿病组(DM组)、糖尿病硫辛酸组(ALA组),并设置正常对照组(NC组)。实验6周后处死全部大鼠,测定相应生化指标和相关氧化应激指标;HE、Masson染色观察肾组织的形态变化;免疫组织化学和Western blot检测大鼠肾组织中核转录共抑制因子(SnoN)、转化生长因子(TGF-β_1)、Collagen I、Collagen IV表达水平。结果 (1)DM组大鼠肾重/体重、血糖、血总胆固醇、三酰甘油、24 h尿蛋白均高于NC组,ALA组除了血糖外以上其余指标均低于DM组。(2)DM组总抗氧化物酶活性(T-AOC)、总超氧化物歧化酶活性(T-SOD)、过氧化氢酶活性(CAT)低于NC组,丙二醛含量(MDA)增多;ALA组T-AOC、T-SOD、CAT活性高于DM组,MDA含量降低。(3)病理检查显示,DM组大鼠出现肾纤维化改变,ALA组肾纤维化病变明显改善。(4)免疫组织化学和Western blot结果显示:与NC组相比,DM组大鼠SnoN蛋白水平降低,TGF-β_1、Collagen I和Collagen IV增高;与DM组相比,ALA组SnoN蛋白水平升高,TGF-β_1、Collagen I和Collagen IV降低。结论α-硫辛酸可以增强DM大鼠肾脏的抗氧化能力,上调SnoN蛋白的表达,从而抑制TGF-β_1信号通路而减少细胞外基质沉积,对糖尿病大鼠肾脏起到保护作用。
- 张小欢毛彦稳彭伟王圆圆刘丽荣刘玲伶石明隽肖瑛汤磊郭兵
- 关键词：糖尿病肾病SNON氧化应激Α-硫辛酸
- PPARγ通过PTEN调控AKT/FAK通路影响高糖条件下肾小管上皮细胞转分化
- 2020年
- 目的:探讨在高糖培养的肾小管上皮细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)对PTEN/AKT/FAK通路的调控机制及对肾小管上皮细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法:以高糖培养的肾小管上皮细胞NRK52E为研究对象,采用过表达及shRNA干扰技术分别上调和下调肾小管上皮细胞中PPARγ的表达,并培养48 h,应用细胞免疫荧光、Western blot和RT-qPCR方法检测PTEN及EMT相关蛋白的表达变化;然后,在过表达及敲减PTEN的情况下,分别给予PPARγ抑制剂GW9662及激动剂罗格列酮干预,进一步观察PPARγ对AKT/FAK通路的调节是否通过PTEN实现的。结果:过表达PPARγ组PPARγ和PTEN的mRNA及蛋白表达增加,E-cad⁃herin的表达明显上调,而vimentin和α-SMA蛋白表达显著下调(P<0.05);PPARγ敲减组PPARγ及PTEN的mRNA及蛋白表达水平明显降低,E-cadherin的表达也明显下调,而vimentin和α-SMA蛋白表达显著升高(P<0.05)。GW9662干预组PTEN的表达减少,而p-AKT(Thr308)、FAK及p-FAK(Tyr397)蛋白水平均明显升高(P<0.05);与GW9662组相比,GW9662+过表达PTEN组PTEN表达明显增加,并伴随p-AKT(Thr308)、FAK及p-FAK(Tyr397)蛋白水平的降低(P<0.05);罗格列酮干预组PTEN的表达增多,而p-AKT(Thr308)、FAK和p-FAK(Tyr397)蛋白水平降低(P<0.05);与罗格列酮组相比,罗格列酮+PTEN shRNA组PTEN的表达减少,相应的p-AKT(Thr308)、FAK和p-FAK(Tyr397)蛋白水平升高(P<0.05)。结论:PPARγ能调节肾小管上皮细胞PTEN的mRNA及蛋白表达水平,并影响肾小管上皮细胞的EMT;PPARγ对AKT及FAK通路的调节及对细胞EMT的影响主要是通过PTEN实现的。
- 严瑞杨雨星刘玲伶王圆圆陈烨郭兵
- 关键词：高糖过氧化物酶体增殖物激活受体ΓPTEN蛋白肾小管上皮细胞上皮-间充质转化
- 一种小鼠代谢笼
- 一种小鼠代谢笼，包括实验笼、集液斗、支架、喂水装置和集液瓶，所述实验笼包括笼体、食槽、喂水装置放置槽、透气孔和能够阻挡鼠粪漏下的隔离网，所述食槽、喂水装置放置槽、透气孔设置在笼体侧壁上，所述隔离网设置在笼体底部，所述隔离...
- 赵思琪张莹莹郭兵石明隽肖瑛王圆圆张帆赵俊琳彭灿张兴宝
- 文献传递
- DNA甲基转移酶及分泌型卷曲相关蛋白1在糖尿病肾脏疾病大鼠肾组织中的表达研究被引量：4
- 2018年
- 目的 探讨DKD大鼠肾组织中DNA甲基转移酶(Dnmts)及分泌型卷曲相关蛋白1(Sfrp1)的表达变化及意义。方法 16只雄性SD大鼠随机分为DKD组与正常对照(NC)组,每组8只。造模成功10周后处死,检测相关生化指标并计算肾脏指数(KI);HE、Masson染色观察肾组织病理学改变;Western blot检测Dnmts、Sfrp1、β-catenin、GSK3β、p-GSK3β、col-Ⅲ、col-Ⅳ蛋白表达变化;q-PCR检测Sfrp1mRNA表达水平;分析Sfrp1与Dnmts相关性。结果 与NC组比较,DKD组血糖[(8.51±1.19)vs(21.00±2.24)mmol/L]、24hUAlb[(12.22±4.91)vs(65.31±18.03)mg]、KI[(6.80±0.53)vs(12.15±1.57)mg/g]均增高(P<0.01);Dnmt1、Dnmt2、Dnmt3a、Dnmt3b、β-catenin、p-GSK3β蛋白表达水平上调(P<0.05);Dnmt3l未见明显变化;Sfrp1 mRNA和蛋白表达水平均下调(P<0.05);Dnmt1、Dnmt2、Dnmt3a、Dnmt3b与Sfrp1的蛋白表达呈负相关(r=-0.811、-0.692、-0.855、-0.858;P<0.01);与Dnmt3l无相关性(r=-0.262,P=0.411)。结论 DKD大鼠肾组织Dnmts蛋白表达增加,可能引起sfrp1表达下调,导致对Wnt信号通路的抑制作用减弱,Wnt信号通路异常活化并促进DKD时肾纤维化的发生发展。
- 田平平刘忠强孔静黄靖惠杨梅周星丞张帆王圆圆肖瑛张莹莹石明隽
- 关键词：DNA甲基转移酶WNT信号通路糖尿病肾脏疾病SD大鼠
- α-硫辛酸抑制炎症信号TLR4和NLRP3的活化在糖尿病大鼠肾组织纤维化中的保护作用被引量：16
- 2019年
- 目的观察α-硫辛酸(ALA)对糖尿病(DM)大鼠肾组织Notch2、TLR4、NLRP3及炎性因子表达的影响,探讨ALA在糖尿病肾病(DN)中抗炎、抗纤维化的可能保护机制。方法 STZ复制DM模型,分为DM组和ALA组,同时设对照组。8周后处死大鼠,测定生化指标和氧化应激水平,免疫组化观察肾皮质Notch2、TLR4、NLRP3的表达部位,Western blot检测肾组织中Notch2、TLR4、NLRP3和Col-Ⅳ蛋白的表达,ELISA检测肾组织炎性因子IL-6和TNF-α的含量。结果与对照组相比,DM组大鼠血糖、24 h尿蛋白、总胆固醇和甘油三酯升高,T-AOC水平降低,MDA增多;ALA组除了血糖外,其余生化指标均低于DM组,而T-AOC活性增高,MDA含量降低。DM组肾组织Notch2、TLR4、NLRP3、Col-Ⅳ蛋白表达增多,炎性因子增多,ALA组各指标均降低。结论 ALA可下调DM大鼠肾组织TLR4和NLRP3炎症信号,减少炎性因子的表达和细胞外基质的沉积,从而减轻DN炎症反应和纤维化病变的发生发展,其机制可能与抑制Notch2蛋白的表达有关。
- 肖瑛肖瑛彭灿张小欢张莹莹张小欢石明隽张莹莹孙兰王圆圆
- 关键词：NOTCH2TOLL样受体4NLRP3Α-硫辛酸炎症
