焦凤萍 作品数:32 被引量:68 H指数:5 供职机构: 泰山医学院公共卫生学院 更多>> 发文基金: 山东省自然科学基金 山东省卫生厅科技基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
一个跖骨短小症家系全基因组测序研究 2018年 目的对一个跖骨短小症家系的成员进行全基因组测序,探究其可能的致病因素。方法应用Illumina Hi Seq X ten测序平台对一个跖骨短小症家系中2例病例和3例正常人进行测序,测序数据经过1 000 Genomes Project和db SNP数据库过滤,筛选出突变基因。结果跖骨短小症呈X染色体隐性遗传。在X染色体上得到1 527个特异性单核苷酸多态性位点(single nucleotide polymorphism,SNP)。没有筛选到符合条件的特异性小片段的插入/缺失(insertion/deletion,In/del)。经过1 000 Genomes Project和db SNP数据库比对后,得到位于11个基因上的39个特异性SNP位点,包括CCNB3、CYSLTR1、GK、NR0B1、PCYT1B、PRPS2、SHROOM4、SMS、TBL1X、TLR7、TLR8基因。结论这些基因SNP位点在我国汉族人群中也是存在的,提示本家系疾病并非单纯由遗传因素导致。 邓阳 龚弘强 李宝华 侯海峰 焦凤萍 李群伟关键词:全基因组测序 致病因素 家系 肱骨短小症致病相关基因及其变异的筛选与验证 被引量:2 2016年 目的寻找肱骨短小症的特异致病基因及其变异。方法利用全基因组重测序技术,采用Illumina Hi Seq X ten测序系统检测3例肱骨短小症患者和3例正常对照者全基因组,测序数据经过1000 Genomes Project和db SNP数据库过滤,将测序所得的特异性单核苷酸多态性位点(SNP)在全部患者和对照者中验证,并通过GO和KEGG Pathway分析,筛选致病相关的重要候选基因及变异。结果肱骨短小症患者没有特异致病基因,但具有31个特异性SNP,其中PLCB4rs6077510和PLAU rs2227564变异与肱骨短小症发病密切相关。结论肱骨短小症不是遗传病。但其发病与PLCB4和PLAU基因多态性有关,可能是本病发病的重要机制。 邓阳 李宝华 侯海峰 焦凤萍 龚弘强 李群伟关键词:单核苷酸多态性 致病基因 HSV-2gD、HBsAg和IL18多表位基因疫苗构建方法的研究 目的:研究多表位串联重组核酸疫苗中IL18与HBsAg (S)抗原、P6 (NP6)抗原在质粒中所处位置的差异对抗原表达是否有影响.P6序列是我们前期筛选出的HSV-2gD的模拟抗原表位,NP6为与HSV-2gD模拟抗原... 焦凤萍 郑绮涵 王玉 于广福 于爱莲关键词:多表位基因 IL-18 HBSAG DNA疫苗 IL-18与HSV-2gD模拟抗原表位DNA疫苗的免疫效果观察 被引量:3 2011年 目的:研究串联重组核酸疫苗pcDNA3.1-IL-18-HSVP6和pcDNA3.1-IL-18-HSVNP6对机体的免疫效果。NP6为与HSV-2gD模拟抗原P6最相似的天然抗原表位序列(Accession Number:E00394)。方法:将构建的真核表达质粒pcDNA3.1-IL-18、pcDNA3.1-IL-18-HSVP6和pcDNA3.1-IL-18-HSVNP6肌内注射免疫接种BALB/c小鼠3次,每次间隔1周。末次免疫后1周眼眶静脉采血,ELISA法检测小鼠血清特异性抗体滴度、IFN-γ及IL-18含量;末次免疫后一月,处死小鼠,无菌分离脾脏,MTT法测定脾淋巴细胞增殖率。结果:重组核酸疫苗pcDNA3.1-IL-18-HSVP6免疫小鼠后可刺激血清特异性抗体的产生,诱导分泌较高水平的IFN-γ和IL-18。可促进小鼠脾淋巴细胞的增殖。结论:重组核酸疫苗pcDNA3.1-IL-18-HSVP6能诱导较强的细胞免疫和体液免疫,从而为构建更加有效的HSV-2DNA疫苗奠定了良好的基础。 焦凤萍 刘莉 于爱莲 王玉 于广福关键词:DNA疫苗 IL-18 模拟抗原表位 HSV-2gD、gBCTL表位及Hsp70融合DNA疫苗的免疫效果观察 被引量:4 2013年 目的研究多表位重组DNA疫苗pc(pcDNA3.1-)-P6-gBCTL-Hsp70的免疫原性。方法将构建的真核表达质粒pcP6-gBCTL-Hsp70转染CHO细胞表达,采用间接免疫荧光和Western blotting检测P6抗原的表达情况。将重组质粒肌肉注射免疫接种Balb/c小鼠3次,每次间隔2周。末次免疫后1周采集眼眶静脉血,末次免疫后1月无菌分离小鼠脾脏。采用ELISA法检测小鼠血清特异性抗体滴度、IFN-γ及IL-18含量,MTT法测定脾淋巴细胞增殖率,LDH法检测CTL活性。结果重组质粒pc-P6-gBCTL-Hsp70具有一定的免疫原性,可刺激机体产生特异性抗体,诱导分泌较高水平的IFN-γ和IL-18,促进小鼠脾淋巴细胞的增殖,CTL杀伤病毒感染细胞活性增强。结论重组核酸疫苗pc-P6-gBCTL-Hsp70能诱导较强的细胞免疫和体液免疫。 焦凤萍 王玉 于爱莲 田兆菊 李冬 赵兴民关键词:DNA疫苗 HSP70 单纯疱疹病毒II型 单纯疱疹病毒2型DNA疫苗在小鼠体内分布及安全性的初步分析 2017年 目的初步研究单纯疱疹病毒2型(HSV-2)DNA疫苗pc(pc DNA3.1-)-P6-g BCTL-TBK-1在小鼠体内的分布及安全性。方法将前期构建的HSV-2 DNA质粒pc-P6-g BCTL-TBK-1肌内注射免疫接种BALB/c小鼠,每只100μg,分别于第0、2、4周免疫接种3次,于末次免疫后的第24小时及7、21、35、49 d采集小鼠的心、肝、脾、肾、肺、脑、血液和注射部位的肌肉组织,提取各组织DNA,采用PCR法检测质粒DNA在小鼠体内的分布情况及其与宿主基因组发生整合的可能性。结果末次免疫后24 h及7、21、35 d,在小鼠的心、肝、脾、肾、肺、脑、血液和注射部位的肌肉组织中均可检测到质粒,随着时间的延长,在末次免疫后第49天,仅在小鼠注射部位的肌肉组织中能检测到质粒。纯化后的基因组DNA经PCR扩增后均为阴性。结论质粒pc-P6-g BCTL-TBK-1经肌内注射免疫小鼠后,质粒DNA可快速地分布到小鼠的心、肝、脾、肾、肺、脑、血液和肌肉组织中;随着时间的延长,质粒DNA仅分布于接种的肌肉部位,且该DNA疫苗未与宿主的基因组整合,具有一定的安全性。 焦凤萍 张海涛 赵英会 田兆菊 杨树林关键词:DNA疫苗 单纯疱疹病毒2型 安全性 乙型肝炎病毒感染孕妇血液中IL-12和IL-18检测的临床意义 被引量:3 2011年 目的探讨孕妇外周血HBV-DNA含量、IL-12和IL-18水平与发生宫内感染的关系。方法研究对象为HBsAg阳性孕妇39例,正常对照组为HBsAg阴性孕妇8例。将HBsAg阳性孕妇按HBV-DNA含量分成三组:105copy/m l组、106copy/m l组、107copy/m l组,采用ELISA法检测各组IL-12、IL-18含量。新生儿脐静脉血用荧光定量PCR法检测HBV-DNA,用ELISA法检测其HBsAg。结果 HBsAg阳性孕妇的三组中IL-12、IL-18含量分别为:105copy/m l组为759.6±30.3,950.1±83.4;106copy/m l组为403.1±23.3,800.1±80.9;107copy/m l组为356.3±43.4,708.7±89.7;IL-12、IL-18水平均明显高于HBsAg阴性组,差异有统计学意义(P<0.05);106copy/m l组和107copy/m l组IL-12、IL-18水平明显低于105copy/m l组,差异有统计学意义(P<0.05)。脐血检测结果:107copy/m l组宫内感染率为66.7%,明显高于106copy/m l组(31.5%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论检测孕妇外周血IL-12、IL-18可以预测胎儿宫内感染率,IL-12、IL-18水平下调可能是HBV宫内感染的危险因素之一;胎儿HBV宫内感染与Th1/Th2免疫平衡失调有关。 焦凤萍 田兆菊 田景惠 赵兴民关键词:HBV宫内感染 IL-12 HBV-DNA定量 原发性肝细胞癌相关HBV G588C突变的功能研究 被引量:4 2018年 目的探索乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)G588C突变在原发性肝细胞癌(HCC)组织HBV cccDNA中的存在情况及其对HBV复制的影响。方法通过滚环扩增(rolling cycle amplification,RCA)和PCR扩增测序,寻找G588C突变在18对HCC患者癌与癌旁组织中的存在情况。在HBV 1.2×质粒(HBV C基因型)的基础上构建G588C突变位点,将G588C突变质粒与野生型质粒分别转染HepG2和Huh7肝癌细胞系细胞,检测上清和细胞中HBsAg含量及上清中HBV DNA水平。结果在18对癌与癌旁组织中G588C突变只存在于3例癌组织中;G588C突变组上清中HBsAg 3、4d含量分别为HepG2细胞5.605±1.182,8.270±2.241,Huh细胞2.714±0.371,10.148±2.793,细胞内HBsAg 3、4d含量分别为HepG2细胞4.852±1.024,7.736±1.762,Huh细胞18.349±3.040,34.110±2.129;野生型组上清中HBsAg 3、4d含量分别为HepG2细胞8.083±1.428,13.170±0.938,Huh细胞6.231±0.373,23.971±1.573,细胞内HBsAg 3、4d含量分别为HepG2细胞2.937±0.876,4.270±1.659,Huh细胞13.498±3.06,21.010±3.488。G588C突变组上清中HBsAg含量显著低于野生型组(F=44.88,P<0.01),G588C突变组细胞内HBsAg含量显著高于野生型组(F=34.65,P<0.01);G588C突变组上清和细胞中HBsAg总量与HBV 1.2×野生型组比较差异无统计学意义(F=7.69,P>0.05);G588C突变组上清中HBsAg与细胞内HBsAg的比值显著低于HBV 1.2×野生型组(F=23.59,P<0.05),HBV DNA水平与两组间差异无统计学意义(F=6.23,P>0.05)。结论 G588C突变不影响HBV的复制,但影响HBsAg由细胞内向细胞外的分泌,这可能与HCC的发生发展有关。 孙玮 孙浩 梁敏 敬瑶 焦凤萍关键词:隐匿性HBV感染 HBSAG 肝细胞癌 单纯疱疹病毒DNA疫苗研究进展 被引量:2 2008年 焦凤萍 于爱莲关键词:单纯疱疹病毒 DNA疫苗 糖蛋白 免疫 综合性实验在临床免疫学检验实验教学中的应用及体会 被引量:3 2014年 临床免疫学检验是医学检验专业的一门重要的必修课,它是一门实践操性比较强的课程,为了使学生尽快理解并掌握临床免疫学检验的新知识和新技术,培养学生的动手操作能力及分析问题和解决问题的能力,提高学生的综合素质,研究者对临床免疫学检验的实验教学进行初步改革和大胆尝试,探索出了适应该门课程实验教学特点的综合性实验教学模式和方法。 田兆菊 江新泉 马玉红 焦凤萍 陈强关键词:临床免疫学检验 实验教学模式 动手操作能力 医学检验专业 教学特点 必修课