沈金花
- 作品数：40 被引量：38H指数：4
- 供职机构：中南民族大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- CRISPR/Cas9技术制备S100A9基因编辑小鼠及表型研究被引量：3
- 2021年
- S100钙结合蛋白A9 (S100 calcium binding protein A9, S100A9)参与多种炎症反应及肿瘤细胞的迁移和侵袭调控等生物学过程。本研究目的是利用CRISPR/Cas9技术构建S100A9基因编辑小鼠,为探讨该基因生物学功能提供动物模型。根据S100A9基因序列构建针对外显子2和3的单链小向导RNA(smallguideRNA,sgRNA),体外转录后,通过显微注射将Cas9mRNA和候选sgRNA混合物注射到小鼠受精卵中,体外培养获得早期胚胎并移植到代孕小鼠,所获F0小鼠经PCR鉴定和基因测序鉴定其基因型。F0小鼠进一步与野生型C57BL/6小鼠测交获得F1杂合子小鼠,再通过F1小鼠自交获得纯合子后代,并利用real-timePCR、Western blot及免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)等方法验证S100A9表达和分布情况;构建鸡卵清白蛋白(ovalbumin from chicken egg white, OVA)激发的过敏性哮喘模型,HE染色观察小鼠肺组织病理变化。结果显示,本方法成功敲除S100A9基因2、3外显子2 492 bp,并获得能稳定遗传的S100A9^(-/-)小鼠。S100A9基因在野生型小鼠的肺和脾脏中高表达,而在S100A9^(-/-)小鼠肺和脾脏中未检测到S100A9 mRNA和蛋白的表达;在表型方面,S100A9^(-/-)小鼠在生长、繁殖及发育方面未表现出明显的缺陷,但在OVA处理条件下,相较于野生型小鼠,S100A9^(-/-)小鼠肺部表现出明显加重的炎症表型,且支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)中嗜酸性粒细胞的占比显著升高。以上结果表明,本研究成功构建了S100A9基因编辑小鼠新品系,并初步证实S100A9功能缺失加重哮喘小鼠气道炎症,为研究S100A9基因功能提供了新的小鼠模型。
- 严珮梁大焱许文豪薛璐于孟飞于孟飞刘庆华沈金花
- 关键词：S100A9小鼠
- 双氯芬酸钠在用于舒张预收缩的气管平滑肌及治疗哮喘中的应用
- 本发明涉及双氯芬酸钠(Diclofenac sodium)在用于舒张预收缩的气管平滑肌及用于制备治疗哮喘的药物中的应用，属于医药领域。经试验发现双氯芬酸钠在舒张预收缩的气管平滑肌方面有很大作用。双氯芬酸钠能舒张由高钾引起...
- 沈金花陈春发
- 文献传递
- PP121在制备用于缓解哮喘症状的药物中的应用
- 本发明涉及医药技术领域，尤其涉及PP121在制备用于缓解哮喘症状的药物中的应用。本发明通过对实验小鼠离体气管肌张力的检测，以及对OVA诱导的哮喘小鼠模型支气管和肺部的病理变化进行观察，实验说明PP121对哮喘症状具有较为...
- 沈金花李威
- 干扰素调节因子的研究进展被引量：13
- 2014年
- 指出了干扰素调节因子(IRFs)是一类在干扰素(IFN)信号通路中起重要调控作用的多功能转录因子,目前已经发现10个IRFs成员,它们在IFN的诱导、病毒防御、免疫调节、细胞分化、细胞生长与凋亡和许多疾病的调节中具有重要作用.对IRFs的结构、IRFs在免疫系统、细胞分化、细胞凋亡和相关疾病如肿瘤、系统性红斑狼疮中的功能作了综述.
- 沈金花吕印刘庆华
- 关键词：干扰素调节因子疾病
- 青蒿提取物舒张小鼠气管平滑肌的作用机理被引量：6
- 2017年
- 分别使用L型钙离子通道(VDCCs)激动剂高钾溶液(80 mmol/L KCl)和M受体激动剂乙酰胆碱(ACh)对小鼠离体气管环进行预刺激,研究了青蒿提取物(WEAA)对激动剂诱导的收缩反应的抑制作用.结果表明:WEAA能够抑制高钾和ACh诱导的预收缩,且呈剂量依赖性,浓度为10 mg/m L时完全抑制,而对静息状态下的气管环无作用.此外,WEAA阻断了VDCCs电流,抑制了高钾和ACh引起的胞外钙离子内流.而在ACh诱导的收缩反应中,该抑制效果不仅涉及VDCC通道,还有其他离子通道的参与.WEAA能够抑制ACh引起的内质网中钙离子的释放,且对气管环的收缩能力几乎无影响.结论:WEAA能够通过阻断VDCC通道和ACh激活的其他离子通道抑制外钙内流和细胞内钙释放,从而舒张小鼠气管平滑肌.WEAA有望作为一种潜在的气管扩张剂,用于治疗哮喘病.
- 沈金花黄俊
- 关键词：气管平滑肌哮喘
- 一种敲除PLAC8基因的HEK293T细胞系构建方法
- 本发明提供了一种敲除PLAC8基因的HEK293T细胞系构建方法，步骤如下：(1)、sgRNA设计；(2)、重组质粒构建；(3)、细胞转染；(4)、流式细胞术分选阳性细胞；(5)、单细胞培养；(6)、测序检测。本发明利用...
- 薛璐秦绪慧刘庆华沈金花彭勇波赵平马立群于孟飞陈微微
- 文献传递
- 一种检测人类EGFR基因L861Q位点突变的探针和引物组合
- 本发明适用于生物技术及医学领域，提供了一种检测人类EGFR基因L861Q位点突变的方法，具体而言，本发明将荧光定量PCR技术与ARMS引物及TaqMan荧光探针技术相结合，发明了一种用于人类EGFR基因L861Q位点突变...
- 沈金花黄俊
- 文献传递
- 一种以箬叶或箬叶提取物为活性成分的药物
- 本发明公开了一种以箬叶提取物为活性成分的药物，取箬叶粉，浸泡于乙醇溶液中加热回流；将所得滤液蒸干；用水将箬叶的乙醇浸膏全部溶解，用石油醚萃取；用氯仿萃取，将所得氯仿萃取液蒸干得到浸膏，即箬叶提取物。该箬叶提取物能够舒张由...
- 沈金花谭鸿浩
- 文献传递
- 罗红霉素对小鼠乙酰胆碱预收缩气管环的舒张作用被引量：2
- 2017年
- 目的观察罗红霉素对小鼠气管环的舒张作用,并探讨其作用机制。方法取BALB/c小鼠15只,处死后分离气管环,将气管环置于灌流槽中,经过高钙液平衡后开始实验。使用激动剂乙酰胆碱(Ach)100μmol/L收缩气管环,待气管环张力达到平台期后,分别加入终浓度为10^(-2)、10^(-1.5)、10^(-1)、10^(-0.5)、10~0、10^(0.5)、10^(0.75)、10~1mg/mL的罗红霉素,观察不同浓度罗红霉素作用下的气管环肌张力和舒张比率,将引起气管环最大舒张的最低药物浓度10^(0.75)mg/mL作为罗红霉素最佳药物浓度。向灌流槽中加入100μmol/L Ach预收缩气管环,随后加入L型钙离子通道抑制剂硝苯地平、非选择性阳离子通道抑制剂吡唑盐3(Pyr3),待抑制剂舒张气管作用达到平台期后,加入10^(0.75)mg/mL罗红霉素,观察气管环的肌张力变化和舒张比率。结果 Ach预收缩的气管环的肌张力为(7.03±0.35)mN,加入最佳浓度的罗红霉素后,肌张力降至(3.47±0.29)mN(P<0.05)。加入硝苯地平、Pyr3后气管环的肌张力降低,舒张比率增加(P均<0.05);继续加入罗红霉素后,气管环的肌张力继续降低,舒张比率较前升高(P均<0.05)。结论罗红霉素对小鼠Ach预收缩的气管环具有舒张作用,并可增强硝苯地平、Pyr3对于Ach预收缩气管环的舒张作用,其主要通过调控钙离子通道来发挥作用。
- 于孟飞王倩刘松青沈金花刘庆华
- 关键词：乙酰胆碱罗红霉素钙离子通道哮喘
- 一种青蒿氯仿提取物及其制备方法和用途
- 本发明提供了一种青蒿提取物，所述青蒿提取物采用以下步骤制得：选取干燥的青蒿作为原料，磨成粉末；采用去离子水于50‑60℃加热3h，每15分钟震荡一次，过滤，收集滤液；滤渣重复提取一次；合并滤液；使用旋转蒸发器蒸干，收集残...
- 沈金花黄俊
