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去泛素化酶OTUD3调控胆固醇酯化酶SOAT1蛋白稳定性的机制: 2021年; 目的鉴定胆固醇酯化酶甾醇O-酰基转移酶1(SOAT1)的去泛素化酶(DUB),探讨维持SOAT1蛋白稳定性的分子机制。方法采用Western blot方法检测多种肝癌细胞系中SOAT1的表达,在SOAT1表达较低的肝癌细胞系HCCLM3中加入蛋白酶体抑制剂MG132后检测SOAT1蛋白水平的变化,筛选人源卵巢肿瘤相关蛋白酶(OTU)家族中与SOAT1相互作用的DUB分子,通过泛素化实验检测其对SOAT1的去泛素化效应。结果SOAT1蛋白稳定性受到泛素-蛋白酶体系统的调控,对人源OTU家族进行无偏性筛选,显示OTUD3可以与SOAT1特异性结合,通过去除SOAT1的多聚泛素化,维持SOAT1的蛋白稳定性。结论在肝癌细胞中OTUD3是SOAT1的一个DUB,参与调控SOAT1蛋白稳定性。; 盖文彬毕明霞姜宏; 关键词：蛋白质稳定性

帕金森病中α-突触核蛋白对铁转运体DMT1蛋白稳定性的调控机制研究: 帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种常见的中枢神经系统退行性疾病,其主要病理特征是中脑黑质多巴胺能神经元选择性缺失,残存的神经元内出现以α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)异常聚...; 毕明霞; 关键词：帕金森病 Α-突触核蛋白多巴胺能神经元铁沉积; 文献传递

铁对激活的小胶质细胞乳铁蛋白表达影响被引量：1: 2014年; 目的探讨枸橼酸铁铵(FAC)对脂多糖(LPS)激活的大鼠小胶质细胞乳铁蛋白(Lf)表达影响。方法分别使用FAC、LPS、FAC+LPS处理原代培养的大鼠小胶质细胞,应用酶联免疫吸附试验方法检测细胞上清液中Lf的含量;采用实时荧光定量PCR方法检测细胞Lf mRNA的表达。结果与对照组相比较,LPS处理组Lf蛋白和mRNA表达水平均明显增高,差异有显著性(F=458.153、78.884,q=18.786、10.683,P<0.05);FAC+LPS组Lf蛋白表达水平较LPS组明显增高,差异有显著性(q=12.831,P<0.05),但Lf mRNA水平未见明显升高;FAC处理组与对照组相比较,Lf蛋白和mRNA表达水平差异无显著性(P>0.05)。结论单独FAC不能引起小胶质细胞Lf的表达增高;LPS激活的小胶质细胞合成和释放Lf增多;高铁状态提高激活的小胶质细胞Lf蛋白的释放,但不影响其mRNA合成。; 毕明霞宋宁谢俊霞王俊; 关键词：枸橼酸铁铵脂多糖类乳铁蛋白帕金森病

咯利普兰在制备帕金森病药物中的应用: 本发明属于帕金森病药物研究领域，首次公开了咯利普兰在制备帕金森病药物中的应用，帕金森病药物是用于治疗α‑突触核蛋白诱导的帕金森病。咯利普兰可显著拮抗α‑突触核蛋白诱导的细胞存活率降低以及线粒体损伤，可能通过增强蛋白酶体的...; 姜宏毕明霞杜希恂焦倩; 文献传递

大鼠帕金森病模型中α-突触核蛋白对干扰素调节因子1的调控及其机制被引量：2: 2021年; 目的研究α-突触核蛋白(α-Syn)对干扰素调节因子1(IRF-1)表达的影响及其分子机制。方法选用α-Syn过表达的SHSY5Y细胞以及3月龄、6月龄A53Tα-Syn转基因小鼠,应用Real-time PCR和Western blot技术检测IRF-1表达的变化,免疫荧光染色和核浆蛋白分离技术观察IRF-1亚细胞定位情况。不同浓度的蛋白酶体抑制剂MG132(0、0.01、0.05、0.1、0.2、0.5、1、2μmol/L)以及溶酶体抑制剂氯喹(0、5、10、30、50、100、150、200μmol/L)处理SH-SY5Y细胞24 h,检测细胞存活率。选用不引起细胞损伤的最大浓度0.2μmol/LMG132和30μmol/L氯喹处理SH-SY5Y细胞24 h,检测IRF-1蛋白水平的变化。观察α-Syn对MDM2蛋白水平的影响,并进一步通过泛素化实验检测IRF-1泛素化水平的变化。结果α-Syn过表达不影响IRF-1 mRNA水平,却可显著上调其蛋白水平(P<0.01),并且IRF-1在胞核表达的比例升高,发生核移位现象(P<0.001)。不同浓度的MG132和氯喹处理后细胞存活率随浓度升高而逐渐降低,不引起细胞损伤的最大浓度分别为0.2μmol/L和30μmol/L。0.2μmol/L MG132处理后可加剧α-Syn引起的IRF-1蛋白水平的升高(P<0.01),而30μmol/L氯喹处理后IRF-1蛋白表达无明显变化。α-Syn过表达导致MDM2蛋白水平降低(P<0.01),进而抑制IRF-1的泛素化修饰。结论α-Syn通过泛素-蛋白酶体途径,抑制MDM2介导的IRF-1泛素化修饰,进而上调IRF-1蛋白表达。; 牟斐斐陈曦杜希恂焦倩毕明霞姜宏; 关键词：帕金森病 Α-突触核蛋白神经免疫

载脂蛋白D对多巴胺能神经元的保护作用被引量：2: 2020年; 目的探讨载脂蛋白D(Apo D)对多巴胺能神经元保护作用。方法首先观察25~500μmol/L的1-甲基-4-苯基吡啶阳离子(MPP+)对MES23.5细胞存活率的影响,确定最佳造模浓度;在此基础上观察2~32 nmol/L Apo D预处理对200μmol/L的MPP+诱导的MES23.5细胞存活率的影响。结果与MPP+处理组相比,8 nmol/L Apo D预处理可明显拮抗MPP+诱导的MES23.5细胞存活率的降低,差异有显著性(F=85.06,P<0.01)。结论外源性Apo D可拮抗多巴胺能神经元损伤并发挥其保护作用,这为PD的防治提供新的思路。; 戴莹莹阎春玲毕明霞焦倩杜希恂姜宏; 关键词：帕金森病多巴胺能神经元

GHSR1a敲除对小鼠黑质区GABA信号传递影响: 2021年; 目的探讨生长激素促分泌素受体1a(GHSR1a)基因敲除对小鼠黑质区γ-氨基丁酸(GABA)信号传递的影响。方法取3只GHSR1a敲除(Ghsr-/-)小鼠和3只同窝野生型(WT)小鼠的黑质区,应用转录组学测序(RNA-seq)技术筛选出差异表达基因(DEGs),并通过KEGG富集分析神经活性配体受体信号通路的变化,以及对GABA信号传递的影响。结果与WT组相比,Ghsr-/-组神经活性配体受体相互作用信号通路上的12个基因表达发生了显著性变化,其中γ-氨基丁酸受体α2(Gabra2)和γ-氨基丁酸受体α4(Gabra4)分别是GABA-A受体α2亚基和α4亚基的编码基因。在Ghsr-/-小鼠中,Gabra2和Gabra4表达出现明显上调。除此之外,与GABA转运相关的转运蛋白溶质载体家族6成员1(Slc6a1)基因表达出现明显下调。结论GHSR1a基因敲除通过增加GABA受体亚基表达,抑制GABA重摄取,从而调控GABA信号传递。; 肖雪毕明霞焦倩陈曦杜希恂姜宏; 关键词：黑质 Γ氨基丁酸转录组测序小鼠

小胶质细胞乳铁蛋白的表达及其对腹侧中脑神经元的作用研究: 帕金森病(Parkinson's disease，PD)是一种常见的中枢神经系统退行性疾病，临床表现主要有静止性震颤、肌僵直、运动减少和姿势反射障碍等症状。PD的神经病理学基础是黑质致密带（substantia nigr...; 毕明霞; 关键词：帕金森病小胶质细胞乳铁蛋白神经保护作用动物模型; 文献传递

Cx43及其磷酸化蛋白在帕金森病细胞表达: 2019年; 目的探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)及其磷酸化蛋白在过表达α-突触核蛋白(α-Syn)的帕金森病细胞模型表达及其意义。方法分别在SH-SY5Y细胞中过表达空载(空载组)、野生型α-Syn(WTα-Syn组)以及人突变型A53Tα-Syn(A53Tα-Syn组),应用Western Blot技术检测各组Cx43蛋白及磷酸化Cx43蛋白(p-Cx43)的表达。结果与空载组相比较,WTα-Syn组以及A53Tα-Syn组的细胞内Cx43蛋白表达增加(F=6.37,q=4.04、5.76,P<0.05),p-Cx43/Cx43升高,差异有显著性(F=23.43,q=5.73、9.65,P<0.01);与WTα-Syn组相比,A53Tα-Syn组的细胞内p-Cx43/Cx43升高(q=3.61,P<0.05)。结论 Cx43及p-Cx43蛋白表达水平的改变可能参与了帕金森病的发病过程。; 牟斐斐焦倩杜希恂毕明霞姜宏; 关键词：缝隙连接蛋白43 帕金森病 Α突触核蛋白

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