栾婧婧 作品数:13 被引量:76 H指数:6 供职机构: 山东省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 科技部科技攻关项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
半巢式RT-PCR快速检测犊牛轮状病毒方法的建立 根据牛轮状病毒的VP7基因设计了一对可以检测牛轮状病毒G6血清型的引物,成功地检测了牛轮状病毒G6血清型..对扩增出来的G6血清型特异性片段的序列分析结果表明与NCDV株的同源性为94.2﹪.结果表明该实验方法准确快捷,... 栾婧婧 高运东 仲跻峰 赵宏坤关键词:牛轮状病毒 RT-PCR检测 VP7基因 利用半套式PCR扩增16S rRNA基因检测牛和猪附红细胞体 被引量:10 2006年 根据GenBank收录的猪和牛附红细胞体16SrRNA基因序列设计1对通用引物,在其上游引物内侧又设计1条分别针对猪和牛附红细胞体的特异性引物。以这4条引物对出现附红细胞体病典型症状及疑似症状的猪和牛的血样DNA进行半套式-PCR扩增。结果显示,该反应阳性率为58.3%,低于临床解剖和镜检结果。对该基因的序列测定结果进行分析,表明不同动物附红细胞体的16SrRNA基因同源性在80%以上。从该基因来看,附红细胞体与立克次氏体没有同源性,而与肺炎支原体和穿透支原体亲缘关系较近。 刘文强 胡敬东 梁成彪 栾婧婧 赵宏坤 高运东 仲跻峰关键词:附红细胞体 RRNA 直接从粪便中检测致犊牛腹泻产肠毒素大肠杆菌的双重PCR方法的建立与应用 被引量:14 2006年 目的产肠毒素大肠杆菌(Enterototxigenic,Escherichia Coli,ETEC)是造成人和动物腹泻的主要病原之一,也是造成新生乳用犊牛腹泻的主要原因,一株ETEC可能产生一种或者多种肠毒素。根据产肠毒素大肠杆菌产生的两种主要毒素的基因序列,设计了两对引物,建立多重PCR方法。该方法仅用4.5小时即可检测出导致犊牛腹泻的产肠毒素大肠杆菌菌株,具有敏感度高、特异性强和检测速度快等特点。本试验的目的是用所建立的多重PCR方法来确定ETEC在导致犊牛腹泻中的作用。采用该方法对乳用犊牛的203个腹泻样品进行了检测,结果,用传统的分离培养方法得到的203株典型大肠杆菌中有135株为ETEC;其中LT阳性为105株,ST阳性为126株,LT+ST阳性的为96株,阳性率为66.5%。而采用直接从粪样中提取PCR模板的方法进行PCR,检测到146个犊牛粪样为ETEC阳性,其中LT阳性为112株,ST阳性为137株,LT+ST阳性为103株,阳性率为71.9%,明显高于传统的检测方法;并且所检测到的146个ETEC阳性的犊牛粪样完全包含用传统的分离培养方法得到的135个阳性粪样,且基因分型结果相同。 马广强 张维军 栾婧婧 林树乾 杨少华 刘文强 高运东 仲跻峰 赵宏坤关键词:ETEC 毒素基因 半巢式RT-PCR快速检测犊牛轮状病毒方法的建立 被引量:11 2006年 目的根据牛轮状病毒的VP7基因设计了一对可以检测牛轮状病毒G6血清型的引物,成功地检测了牛轮状病毒G6血清型。使用该方法检测牛病毒性腹泻-粘膜病病毒,检测结果为阴性。敏感性试验表明本实验方法可以检测10-4稀释的样品。通过对23份临床样本的检测证实,PCR方法比聚丙烯酰胺凝胶电泳和病毒的分离试验灵敏度高,可以快速诊断轮状病毒病,并且能够同时鉴定轮状病毒主要血清型。 栾婧婧 杨少华 张维军 高运东 仲跻峰 赵宏坤关键词:牛轮状病毒 RT-PCR 产后健康奶牛子宫内细菌动态变化规律的研究 被引量:3 2007年 对4个不同奶牛场20头产后健康状况良好的奶牛每头奶牛采样器采集子宫样品,通过细菌培养、分离、鉴定等常规方法,对其子宫内细菌的动态变化规律进行了研究,以探讨产后健康奶牛子宫内细菌的动态变化规律及不同奶牛场之间的比较差异。结果表明,本试验还对产后不同阶段所分离到的细菌的种类和数量进行了详细的比较分析,在产后第2天,子宫内呈污染状态,细菌数量迅速增加,四组试验的计数结果分别达到了8.34×105、2.15×105、1.90×105、2.97×105,此后细菌数量呈缓慢增长趋势,在产后第8天时子宫内细菌计数达到最高,四组试验技术结果的平均数分别为:4.25×107、4.01×107、3.95×107、3.05×107。 张维军 杨少华 高运东 王洪梅 林树乾 马广强 栾婧婧 赵宏坤 仲跻峰关键词:子宫 细菌 来源于羊痘病毒的白介素-18结合蛋白基因的表达和活性研究 被引量:8 2005年 Some poxvirus genome of vaccinia subgenus encoded IL-18 binding prolein gene,which could block IL-18 activity but no sequence similarity to membrane IL-18 receptors.The sheep poxvirus genome subgenus also had this gene.A pair of primers spanning the ORF of goat IL-18 binding protein gene in sheep poxvirus genome were designed.This gene was cloned and expressed in E.coliwith pGEX-5X-3 plasmid.After being purified,the recombinant fusion protein could inhibit goat PBMC IFN- production induced by IL-18 in goat PBMC. 刘文强 杨少华 栾婧婧 高运东 仲跻峰 赵宏坤关键词:羊痘病毒 活性 奶牛腹泻主要病原菌多重PCR快速检测方法的建立与应用 本试验根据ETEC的热敏感毒素基因(LT)、沙门氏菌外膜蛋白基因(OMPC)和产气荚膜梭菌的α毒素基因设计了产肠毒素大肠杆菌(Enterototxigenic,Escherichia Coli,ETEC)、沙门氏菌(Sa... 马广强 张维军 栾婧婧 林树乾 杨少华 高运东 仲跻峰 赵宏坤关键词:奶牛 腹泻 病原菌 毒素基因 文献传递 快速检测牛产肠毒素大肠杆菌的多重PCR方法的研究 产肠毒素大肠杆菌(Enterototxigenic,EscherichiaColi,ETEC)是造成人和动物腹泻的主要病原之一,也是造成新生乳用犊牛腹泻的主要原因,一种ETEC可能产生一种或者多种肠毒素.根据产肠毒素大肠... 马广强 杨少华 刘文强 栾婧婧 张维军 宁召峰 高运东 仲跻峰 赵宏坤关键词:大肠杆菌 毒素基因 健康奶牛产道内正常菌群的研究 被引量:7 2006年 本试验从山东省不同奶牛场筛选出60头健康状况良好的奶牛,按试验要求分三组,第一组为20头8~15月龄的未配种的青年奶牛,第二组为20头处于干奶期(围产期)的奶牛,第三组为20头产后一个月的奶牛。采用常规细菌培养、分离、鉴定的方法从产道分离到细菌150株,其中乳酸杆菌46(30.70/4)株、表皮葡萄球菌39(26%)株、无乳链球菌21(14%)株、大肠杆菌23(15.3%)株、芽孢杆菌8(5.3%)株、棒状杆菌5(3.3%)株、念珠菌8(5.3%)株。比较结果显示,乳酸杆菌为正常奶牛产道内的主要寄生菌,其次是表皮葡萄球菌、无乳链球菌和大肠杆菌。但是未配青年奶牛的阴道内,乳酸杆菌的分离率并不高。试验发现,奶牛阴道内的寄生菌一般为2~3种。 张维军 马广强 林树乾 栾婧婧 赵宏坤 杨少华 王洪梅 高运东 仲跻峰关键词:健康奶牛 产道 正常菌群 犊牛轮状病毒的分离鉴定及快速诊断方法的建立 牛轮状病毒是引起犊牛腹泻的主要病原,犊牛感染轮状病毒后,由于胃肠道的功能紊乱而导致生长变缓,而持续性腹泻容易导致机体脱水,甚至休克死亡。自1982年在中国分离到水牛轮状病毒以来,相继在中国分离到猪、兔、鸡的轮状病毒。引起... 栾婧婧关键词:牛轮状病毒 流行病学 预防兽医学 文献传递