林长发
- 作品数：7 被引量：96H指数：5
- 供职机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金上海市教育发展基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 盐胁迫下盐藻特异表达基因片段的克隆被引量：11
- 2001年
- 盐碱、干旱、极端温度等逆境条件是影响植物生长的重要因素．以抑制消减杂交及差式库的筛选对盐藻（Ｄｕｎａｌｉｅｌｌａ ｓａｌｉｎａ）在高渗胁迫下特异表达基因片段进行了克隆．比较长期（１周，ＬＳ）及短期（１６ ｈ，ＳＳ）ＮａＣＩ胁迫条件下基因表达情况，前者克隆到２个特异表达片段，后者也为２个．通过测序及ＧｅｎｅＢａｎｋ中进行同源搜索，均未有可靠的同源性结果．可以初步认为，以上得到的４个。ＤＮＡ可能是新基因或此片段不在保守区内．
- 张晓宁万由衷林长发张亚兰李彦舫沈大棱
- 关键词：盐藻盐胁迫抑制消减杂交特异表达基因
- 水稻蔗糖转化酶基因的克隆及其功能的初步探讨被引量：10
- 2003年
- 根据抑制消减杂交(suppressionsubtractivehybridization,SSH)方法分离到在水稻叶片中高表达的蔗糖转化酶基因片段,根据水稻基因组顺序设计引物分离到全长cDNA.测序结果表明该cDNA长度为1937bp,推测编码一个627个氨基酸的中性/碱性蔗糖转化酶.Alignment分析显示该推测蛋白质与已知的多个蔗糖转化酶具有很高的同源性.半定量PCR检测证实它在叶中的表达强于在根、花药和幼穗等组织中的表达,胁迫处理(盐和低温)使其表达上调.
- 姜立智林长发梁宗锁卫春杨金水
- 关键词：抑制消减杂交蔗糖转化酶基因克隆RT-PCR水稻
- 水稻苹果酸脱氢酶基因的克隆及其在E.coli中的表达被引量：5
- 2002年
- 以玉米苹果酸脱氢酶的基因为探针 ,从水稻幼苗cDNA文库筛选得到一条水稻新基因 .它与玉米ZHO2序列的一致性高达 87% ,被命名为RcMDH(ricecytoplasmicmalicdehydrogenasegene) .分析发现RcMDH具有完整的读码框 ,编码 332个氨基酸 ,预计分子质量为 36 .5ku .导入大肠杆菌中表达 。
- 姜瑞华林长发申国安钱旻王东杜喜玲黄骥杨金水
- 关键词：水稻细胞质脱氢酶基因
- 水稻叶特异表达基因及苹果酸脱氢酶基因的克隆和功能分析
- 为了研究水稻叶组织特异基因及其表达,利用抑制消减杂交法(SSH)建立了水稻叶对根的差减文库.经筛选,获得171个差异克隆.其插入片段分别输入GenBank中进行同源搜索,发现其中水稻中已克隆基因有85个,未克隆的功能基因...
- 林长发
- 关键词：磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶抑制消减杂交蔗糖转化酶
- 受NaCl诱导的盐藻果糖-1,6-二磷酸醛缩酶cDNA的克隆及其在烟草中的表达被引量：25
- 2002年
- 采用快速扩增 cDNA末端（RACE）技术,获得了盐藻（Dunaliella salina）受诱导表达的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶全长CDNA（DsALDP）.蛋白质序列分析发现,DSALDP与许多植物叶绿体的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶（AldP）具有较高的同源性（66％～73％）.系统进化分析进一步证明DsALDP与藻类的AldP亲缘关系最近.就表达谱而言,DsALDP是NaCl诱导下新表达的转录本,其表达水平随诱导时间的不同而呈显著变化.筛选的DsALDP cDNA构建到双元载体pBI121并导入农杆菌用以转化烟草,对4个T1代转基因植株进行Southern检测,证明DsALDP已整合入转基因植株的基因组.RT-PCR分析显示DsALDP在这些植株中均得到有效表达.生物测试表明,T1-1,T1-2和T1-3植株在100～200 mmol/L NaCl下仍保持醛缩酶活性,且其脯氨酸含量均有不同程度的升高.
- 张晓宁林长发王昊曲志才张宏伟姚剑虹沈大棱陈火英
- 关键词：盐藻土壤盐渍化绿藻门
- 水稻LON基因可变剪接和细胞质雄性不育(CMS)的相关性研究
- 水稻野败型细胞质雄性不育系花粉败育发生于单核靠边期。早先在菜豆的研究中发现CMS和orf239基因产物的积累直接相关,而orf239产物的降解以一种未知方式被蛋白酶LON所调控。本实验室以RT-PCR的方法,首先在水稻叶...
- 林长发钱晓茵杨金水
- 关键词：细胞质雄性不育可变剪接LONCMS
- 水稻葡萄糖-6-磷酸脱氢酶cDNA的电子克隆被引量：45
- 2002年
- 电子克隆是基因克隆的新策略。以小麦胞质葡萄糖 6 磷酸脱氢酶cDNA (Tagpdl克隆 )序列为信息探针 ,在GenBank水稻nr数据库中找到高度同源的水稻基因组序列 ,通过人工序列拼接及RT PCR确认得到了水稻该基因的全长cDNA序列 ,命名为OsG6PDH。OsG6PDH与小麦Tagpdl克隆的DNA一致率为 88% ,推导的氨基酸序列与小麦、番茄、烟草的胞质葡萄糖 6 磷酸脱氢酶基因的一致率分别为 89%、79%、80 %。经RT PCR表达谱分析 ,OsG6PDH在水稻幼穗、胚、根、叶中都有表达 ,在幼穗与根中表达略高。另外 。
- 黄骥王建飞张红生曹雅君林长发王东杨金水
- 关键词：水稻葡萄糖-6-磷酸脱氢酶CDNA电子克隆
