杨冬青
- 作品数：4 被引量：109H指数：2
- 供职机构：安徽农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 茶树不同器官组织总RNA提取方法的研究被引量：4
- 2011年
- 从茶树组织中提取高质量的总RNA,是开展茶树基因组学、功能基因组学研究的重要前提,而RNase、多酚类物质严重干扰茶树总RNA的分离提取。鉴于茶树组织总RNA提取过程难易不一、总RNA提取质量良莠不齐的现状,现对材料用量、提取液、DNA和蛋白质抽提液、RNA沉淀试剂、多酚氧化抑制剂等进行了比较研究,建立了一种适合茶树各器官组织总RNA提取的简单高效的方法(简易CTAB-LiCl法),并与实验室常用的改良Tri-Reagent法、改良CTAB法进行了比较。核酸定量和琼脂糖凝胶电泳检测结果显示,简易CTAB-LiCl法从茶树各器官组织中提取到的总RNA质量高、得率高。总RNA的得率是改良CTAB法的1.6-5倍。因此,简易CTAB-LiCl法具有效率高、适用范围广,且操作简单、实验成本低的特点。RT-PCR和cDNA-AFLP实验表明,提取的总RNA能够用于后续的分子生物学研究。
- 杨冬青王云生孙美莲单育骆洋韦朝领高丽萍夏涛
- 关键词：茶树总RNA器官
- 茶树愈伤诱导及不同儿茶素含量细胞系筛选被引量：2
- 2014年
- 茶树组织培养是开展茶树次生代谢及调控研究重要的研究平台。在建立茶树愈伤组织培养体系的基础上,开展了茶树含不同儿茶素含量的细胞系筛选方法的研究。结果表明,在H、S和B 3种诱导培养基中,只有B培养基适合于诱导生长迅速、组织疏松、质地均一且具有一定儿茶素合成能力的愈伤组织。从外植体方面考虑,种子诱导出的愈伤组织具有较强的植株再生能力;幼茎和叶片诱导出的愈伤组织,其生长速度快、组织疏松,但再生能力弱。在此基础上,采用目视法和二分法,结合HPLC分析,对B培养基诱导的细胞系"yunjing63Y"进行了筛选,得到含不同儿茶素含量的细胞系"yunjing63Y"和"yunjing63X"。分析结果显示,细胞系"yunjing63Y"和"yunjing63X"的儿茶素组分与鲜叶相似,且二者儿茶素含量(干重)差异较大,前者为7.77 mg·g-1,后者为0.13 mg·g-1。
- 刘亚军王正荣王婕杨冬青郭丽丽孙美莲王云生高丽萍夏涛
- 关键词：茶树儿茶素细胞系
- 不同儿茶素含量茶树愈伤组织差异表达基因的cDNA-AFLP分析
- 儿茶素类是茶叶最重要的特征代谢成分,也是构成茶叶品质的主要化学成分。研究儿茶素类生物合成途径中的基因表达,对改良茶树品种、提高茶叶品质具有重要的应用价值。
本文利用cDNA-AFLP技术,建立了不同儿茶素含量的愈伤...
- 杨冬青
- 关键词：茶树基因表达差异CDNA-AFLP技术儿茶素愈伤组织
- 茶树实时荧光定量PCR分析中内参基因的选择被引量：103
- 2010年
- 选择合适的内参基因是提高实时荧光定量PCR分析(qRT-PCR)准确性的先决条件。该文以茶树(Camellia sinensis)芽、叶、幼根、嫩茎、花瓣、种子和愈伤组织为材料,应用实时荧光定量PCR技术,分析了18S rRNA、GAPDH、β-actin和α-tubulin4个常用内参基因在茶树不同器官组织中的表达情况。经GeNorm和NormFinder软件分析发现,当利用荧光定量PCR分析比较茶树不同器官组织中的基因表达差异时,可选择β-actin作为校正内参基因;而比较不同成熟度的叶片和愈伤组织时,可以选择GAPDH作为校正内参基因。
- 孙美莲王云生杨冬青韦朝领高丽萍夏涛单育骆洋
- 关键词：茶树实时荧光定量PCR内参基因
