杨军
- 作品数：47 被引量：97H指数：6
- 供职机构：南京大学医学院附属鼓楼医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金南京市医学科技发展项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 克隆性基因重排检测BIOMED-2系统中内对照体系的改进
- 2017年
- 目的 监测克隆性基因重排各检测管中PCR反应体系的完整性及反应条件的稳定性，避免基因重排的假阴性结果。方法 利用多重PCR方法，检测免疫球蛋白（Ig）中IgH-FR1、IgH-FR2、IgH-FR3、IgK-VJ、IgK-V/i克隆性基因重排和T细胞受体（TCR）中TCRβ-VJ1、TCRβ-VJ2、TCRβ-DJ、TCRγ-VJ1和TCRγ-VJ2克隆性基因重排。①选择GC100和GC300作为管内对照，在各反应管中加入适当的内对照引物，浓度分别为0.625 μmol/L、1.25 μmol/L、2.5 μmol/L、5 μmol/L和10 μmol/L，PCR扩增后行聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE），分析结果。②根据①的实验结果，在各反应管中加入最适浓度内对照，以制备好的突变浓度为20%、10%、7.5%、5%、2.5%的基因重排样本为模板，PCR扩增后行PAGE，分析结果。结果 克隆性重排检测引物工作液浓度均为10 μmol/L；检测IgH-FR1、IgH-FR2、IgK-VJ、IgK-V/i、TCRβ-VJ1、TCRβ-VJ2、TCRβ-DJ和TCRγ-VJ1各管中，加入管内对照基因的扩增片段大小均为100 bp，引物浓度均为5 μmol/L；检测IgH-FR3管中，管内对照基因的扩增片段大小为300 bp，引物浓度为5 μmol/L；检测TCRγ-VJ2管中，管内对照基因的扩增片段大小为300 bp，引物浓度为1.25 μmol/L。改进后体系检测敏感度在2.5%～5.0%之间。结论 在BIOMED-2系统中增加合适的管内对照，能够监测每个检测管中PCR反应体系的完整性及反应条件的稳定性。
- 杨军叶庆张标
- 关键词：基因重排聚丙烯酰胺凝胶电泳假阴性
- 靶向纳米载体包封西地那非对肺高压大鼠肺血管重构的影响被引量：1
- 2018年
- 目的观察包封西地那非的靶向纳米载体对野百合碱肺高压大鼠肺动脉压力、肺小血管中膜增殖以及右心室心肌肥厚的治疗作用。方法雄性SD大鼠42只,随机分为六组,每组7只。除对照组(CON组)外,其余各组皮下注射野百合碱60mg/kg,4周后分别经尾静脉注射西地那非8mg/kg(SIL组)、靶向纳米空载体(GL组)、普通纳米载体包封西地那非(L-SIL组)和靶向纳米载体包封西地那非(GL-SIL组)干预2周,CON组与模型组(MCT组)则给予等体积的生理盐水。2周后,开胸测量大鼠平均肺动脉压(mPAP)并处死动物取心肺组织,进行HE染色,测定肺小血管中膜厚度比例(WT),右心室心肌细胞的面积。采用免疫组织化学法检测肺血管中膜α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)含量。采用活体荧光示踪观察靶向纳米载体的组织分布。结果与CON组比较,MCT组、GL组、SIL组和L-SIL组mPAP明显升高(P<0.05)。与MCT组比较,GL-SIL组mPAP明显降低(P<0.05)。与CON组比较,MCT组、SIL组、GL组和L-SIL组WT明显增加(P<0.05),α-SMA表达明显增高(P<0.05)。与MCT组比较,GL-SIL组WT和α-SMA的表达明显降低(P<0.05)。与CON组比较,MCT组、SIL组、GL组和L-SIL组心肌细胞面积明显增大(P<0.05)。但GL-SIL组明显小于MCT组(P<0.05)。结论靶向纳米载体包封西地那非可明显降低肺动脉高压大鼠的平均肺动脉压力,改善肺血管中膜增殖和右心室肥大,与其具有良好的肺组织靶向性相关。
- 祝玉玲俞春芳孙青杨军缪明星何伟李冰冰
- 关键词：肺动脉高压西地那非
- 靶向紫杉醇纳米晶-胱天蛋白酶⁃3复合物对肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响被引量：2
- 2022年
- 目的观察靶向紫杉醇纳米晶-胱天蛋白酶-3(caspase-3)复合物对肺动脉高压大鼠肺血管重构的治疗效果。方法选择SPF级健康成年雄性SD大鼠56只,8周龄,体重220~250 g。随机分为七组:对照组(N组)、模型组(M组)、模型+紫杉醇组(T组)、模型+caspase-3组(C组)、模型+紫杉醇复合caspase-3组(TC组)、模型+靶向紫杉醇纳米晶组(GN1组)和模型+靶向紫杉醇纳米晶-caspase-3复合物组(GN2组),每组8只。N组不建立模型,其余组大鼠颈部皮下注射野百合碱60 mg/kg建立肺动脉高压模型。建模第21、25、29天,T组、C组、TC组、GN1组和GN2组分别经尾静脉注射紫杉醇、caspase-3、紫杉醇复合caspase-3简单混合溶液、靶向紫杉醇纳米晶、靶向紫杉醇纳米晶-caspase-3复合物(紫杉醇所用剂量为0.4 mg/kg,caspase-3为0.04 mg/kg)。于建模第35天测定大鼠平均肺动脉压力(mPAP),分别称取大鼠右心室(RV)、左心室与室间隔(LV+S)的重量,计算右心室肥厚指数[RV/(LV+S)],Western blot法检测肺组织中转录因子叉头框O1(FoxO1)蛋白含量,肺组织HE染色和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组化染色评估肺血管形态,FoxO1和Ki67免疫组化染色分析其在肺血管中膜的阳性细胞百分比。结果与N组比较,M组、T组、C组、TC组、GN1组和GN2组mPAP、右心室肥厚指数、血管中膜厚度百分比和肌化血管百分比均明显升高,FoxO1蛋白含量、FoxO1阳性细胞百分比明显降低(P<0.05)。与M组比较,T组、C组、TC组、GN1组和GN2组mPAP、血管中膜厚度百分比、Ki67阳性细胞百分比明显降低,FoxO1蛋白含量明显升高,GN2组右室肥厚指数明显降低,T组、TC组、GN1组和GN2组肌化血管百分比明显降低,T组、TC组、GN1组和GN2组FoxO1阳性细胞百分比明显升高(P<0.05)。与T组比较,GN2组血管中膜厚度百分比和肌化血管百分比均明显降低;C组、TC组、GN1组和GN2组FoxO1蛋白含量明显升高;GN1组和GN2组Ki67阳性细胞百分比明�
- 徐瑞郁慧玲邱莉华马倩石雪朵陈鲁宁季晶晶杨军何伟李冰冰
- 关键词：肺动脉高压靶向紫杉醇纳米晶肺血管重构
- 超声不同指标评估肺高压大鼠肺动脉压力的实验研究被引量：3
- 2018年
- 目的评价4种超声不同指标预测肺高压大鼠肺动脉压力的准确性。方法选取8周龄雄性大鼠41只,分为对照组11只和野百合碱组30只(MCT组),应用脉冲多普勒测定两组大鼠肺动脉血流加速时间(PAAT)、肺动脉射血时间(PET)及三尖瓣反流峰值流速(TR peak)。受试者工作特征(ROC)曲线分析PAAT、PAAT/PET、PAAT与心率比值(PAAT/HR)及TR peak预测大鼠肺动脉压力的诊断效能。结果两组大鼠PAAT、PAAT/PET、PAAT/HR及TR peak比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。ROC曲线分析显示以PAAT/PET为0.381为截断值,其评估肺动脉压力的敏感性81.8%,特异性90.0%,准确率71.8%,明显高于PAAT和PAAT/HR的诊断效能。结论应用多普勒超声评估大鼠肺动脉压力时,PAAT/PET的预测准确性更高,可为无创诊断大鼠肺动脉高压提供新的手段。
- 俞春芳祝玉玲杨军孙青黄瑜琳李冰冰
- 关键词：肺动脉高压多普勒超声
- ISO 15189认可规范在分子病理检测结果质量保证中的应用被引量：3
- 2018年
- 随着精准医疗的发展,分子病理诊断已越来越多地应用于临床。对检测结果质量的管理是确保分子病理检测结果准确性、科学性的基础。笔者根据ISO 15189 CNAS-CL02:2012《医学实验室质量和能力认可准则》中5.6章节《检测结果质量的保证》内容及其在分子诊断领域的应用说明,探讨涉及检测结果质量保证中的应用实践,以期建立完善的质量保证体系,为临床提供优质的分子病理检测服务。
- 管文燕樊祥山陈洁宇杨军叶庆
- 关键词：ISO分子病理
- 荧光原位杂交探针在腺泡状软组织肉瘤诊断中的应用被引量：3
- 2014年
- 腺泡状软组织肉瘤是一种好发于儿童和青年的罕见恶性软组织肉瘤，主要症状为缓慢生长的软组织肿块，多数患者在诊断数年后出现远处转移，预后差。腺泡状软组织肉瘤的肿瘤组织中存在特异性基因非平衡易位：der（17）t（X；17）（p11.2；q25）［1-2］，即Xp11.2处TFE3端粒侧基因经复制后易位至17q25位点，并与该位点着丝粒侧的ASPL基因融合形成ASPL-TFE3基因，同时原X染色体是完整的，而17 q25端粒侧基因丢失。根据腺泡状软组织肉瘤特有的基因改变，我们设计了一种荧光原位杂交（ FISH）多克隆探针，用来判断肿瘤组织内是否存在TFE3基因的非平衡易位，提供了一种诊断腺泡状软组织肉瘤的新方法。
- 陈显成张亚杰甘卫东叶庆杨军郭宏骞李冬梅
- 关键词：腺泡状软组织肉瘤荧光原位杂交特异性基因平衡易位
- 胃EB病毒阳性淋巴上皮瘤样癌伴B淋巴细胞单克隆性增生一例被引量：2
- 2020年
- 报道1例罕见胃EB病毒阳性淋巴上皮瘤样癌合并B淋巴细胞单克隆性增生,并复习相关文献。患者为男性75岁,胃底贲门见一溃疡型肿块。镜下观察:肿瘤以推挤性生长为主,侵及胃壁深肌层。肿瘤组织中淋巴上皮间质明显多于肿瘤细胞,肿瘤细胞间质淋巴细胞背景中部分为B淋巴细胞构成,周围可见淋巴上皮病变。EB病毒原位杂交显示:癌细胞阳性。分子病理显示B细胞IgH-DH克隆性基因重排。最终诊断为:胃EB病毒阳性淋巴上皮瘤样癌伴淋巴样间质内B细胞单克隆性增生。
- 付尧史倩芸李琳杨军王婷樊祥山
- 关键词：克隆性增生淋巴上皮瘤样癌溃疡型克隆性基因重排EB病毒B淋巴细胞
- DLL4在胰腺癌组织中的表达及其与肿瘤血管生成的关系被引量：4
- 2012年
- 目的检测delta—like ligand 4（DLL4）在胰腺癌中的表达，分析其与肿瘤血管生成及临床病理特征的关系。方法采用免疫组化sP法检测60例胰腺癌组织及20例癌旁正常胰腺组织中DLL4的表达；观察微血管内皮细胞CD，。表达，计算微血管密度（MVD）；分析DLL4表达、MVD与胰腺癌临床病理特征之间的关系以及两者的相关性。结果DLL4在胰腺癌组织中的表达明显高于正常胰腺组织（68．3％比20．0％，P〈0．01）；胰腺癌组织DLL4的高表达与肿瘤分化程度、TNM分型、肿瘤转移及浸润等呈正相关（P值均〈0．05），而与肿瘤部位、大小、组织病理分型无关。胰腺癌组织MVD明显高于正常胰腺组织（34．9±13．2比18．9±2．2，P〈0．01）；胰腺癌的MVD与肿瘤分化程度、TNM分期、肿瘤转移及浸润有关（P值均〈0．05），而与肿瘤部位、大小、组织病理分型等无明显相关性。DLL4表达阳性的胰腺癌组织MVD明显高于DLIA表达阴性者（38．8±10．7比29．0±15．2，P〈0．05），且DLL4表达与MVD呈显著正相关（r=0．669，P〈0．05）。结论DLL4表达可促进肿瘤血管生成，且与胰腺癌的转移、浸润相关。
- 徐桂芳张伟杰孙琦杨军周志华赵海滨邹晓平
- 关键词：胰腺肿瘤微血管密度淋巴结
- 超顺磁性氧化铁纳米粒子标记内皮祖细胞靶向肝癌的MR实验研究被引量：6
- 2016年
- 目的采用小动物专用高场MR（7．0T）观察超顺磁性氧化铁纳米粒子（SPIO）标记的骨髓内皮祖细胞（EPCs）归巢至肿瘤局部的情况。方法抽取荷瘤鼠腹腔积液，直接注射法种植于15只裸鼠肝脏，制作小鼠移植性H22HCC模型；取C57BIM6小鼠骨髓分离培养EPCs，用25μg/ml纳米铁复合物（SPIO-PLL）对第三代EPCs进行标记；利用MTT比色实验、流式细胞分析检测磁性标记对细胞生长、凋亡的影响。模型制作第3天将标记细胞经尾静脉移植至模型鼠（n=15）及对照组（n=6）体内，移植后第1、3、7天应用MR观察肿瘤信号改变情况。行铁蓝染色、CD31免疫组织化学检查，并将MR所见与病理切片行对照分析。采用两样本t检验分析数据。结果模型制作3d后。15只裸鼠肝脏均可见肿瘤病灶；MTT比色实验、流式细胞分析示25μg／mlSPIO—PLL标记细胞后，其生长曲线（t=0．281，P〉0．05）、凋亡与未标记细胞间差异未见统计学意义[早期凋亡率：（12．31±1．43）％与（11．57±1．24）％，晚期凋亡率：（0．55±0．07）％与（0．49±0．05）％；t=0．967和1．060，均P〉0．05]；模型组小鼠细胞移植后第3天，MR成像可见信号改变（4／5），低信号呈斑片、条带状，主要位于肿瘤病灶边缘；第7天信号改变程度减低。病理证实标记细胞归巢至肿瘤周围或肿瘤局部。对照组小鼠MR成像未见明显低信号改变。结论EPCs可归巢至肿瘤局部或周围，高场MR可对其进行动态观察。
- 麦筱莉范海健牡丹余德才杨军朱斌
- 关键词：肝肿瘤内皮骨髓超顺磁性氧化铁
- 沉默信息调节因子2相关酶1在贲门癌中表达的意义及相互关系被引量：2
- 2011年
- 目的沉默信息调节因子2相关酶1(silent mating type information regulation 2 homolog 1,SIRT1)是活性依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD)的去乙酰化酶,可能参与某些肿瘤的形成及进展,并对多种肿瘤相关基因的蛋白活性及基因沉默的调控中起重要作用。文中研究SIRT1及上皮钙黏蛋白(epithelial cadherin,E-cadherin)和错配修复蛋白1(Mutl homoolog 1,MLH1)在贲门癌中表达的临床病理学意义及相互关系。方法应用组织芯片技术和免疫组化EnVision二步法检测176例贲门癌患者癌组织中SIRT1、E-cadherin、MLH1蛋白的表达。结果 SIRT1表达阳性率与淋巴结转移数目及TNM分期呈正相关。E-cadherin和MLH1表达与淋巴结转移数目、TNM分期呈负相关。90例有随访资料病例中,SIRT1阳性患者3年生存率及平均生存时间显著低于SIRT1阴性患者。E-cadherin强阳性表达患者3年生存率及平均生存时间显著高于弱阳性表达患者,MLH1阳性表达患者的3年生存率及平均生存时间高于MHL1阴性患者,差异均有统计学意义。结论贲门癌中SIRT1阳性表达与肿瘤恶性程度正相关。E-cadherin表达程度及MLH1阳性表达与肿瘤恶性程度负相关,SIRT1可能通过E-cadherin、MLH1等抑癌基因的沉默作用促进贲门癌的形成,影响其恶性生物学行为。
- 冯安宁樊祥山黄勤章宜芬叶庆吴鸿雁杨军张丽华
- 关键词：贲门癌上皮钙黏蛋白错配修复蛋白生存期预后
