杨健美
- 作品数：67 被引量：94H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 基因芯片技术及其在寄生虫学研究中的应用被引量：1
- 2011年
- 随着人类基因组计划（human genome project，HGP）和一些模式生物基因组计划的完成，基因序列数据正以前所未有的速度迅速增长，对基因组学的研究已从结构基因组学逐步转向了功能基因组学。由于基因芯片技术操作简便，获得的信息高度特异、稳定，在寄生虫学研究领域已广泛应用。随着寄生虫分子遗传学研究的进展和寄生虫基因芯片检测工具的开发应用，这一技术用于筛选寄生虫功能基因，探索寄生虫与宿主相互作用，研究寄生虫发病机制及筛选寄生虫诊断抗原、药物靶标和疫苗分子等，大大推动了寄生虫学领域的研究步伐，该文主要介绍了基因芯片技术的分类，并就近几年来基因芯片技术在寄生虫学研究方面的应用作一综述。
- 杨健美冯新港林矫矫
- 关键词：基因芯片微阵列功能基因寄生虫学
- 蝙蝠流感病毒与H9N2亚型禽流感病毒的重组特性研究被引量：1
- 2022年
- 人类历史上数次流感大流行,都与不同流感病毒之间的基因重组有关,为了研究新发现的蝙蝠流感病毒与禽流感病毒的重组可能性,本研究利用反向遗传操作技术对嵌合蝙蝠流感病毒(Bat09:mH9mN2)与禽流感病毒(A2093/H9N2)进行替换重组,研究发现仅H9病毒的M基因可单向替换Bat病毒的M基因获得重组嵌合蝙蝠流感病毒,命名为Bat09:mH9mN2-A2093(M),其他基因均不能互换拯救。该重组病毒可以在鸡胚上、MDCK细胞上复制良好,但在禽源LMH细胞上几乎不复制。本研究发现蝙蝠流感病毒与H9N2亚型禽流感病毒之间的基因兼容性并不强,仅有禽源病毒M基因可以单向替换重组,这与之前的研究报道一致,关于M基因的重组兼容性及重组病毒生物学特性还有待进一步研究。
- 张培黄敏滕巧泱刘芹防李雪松张志飞崔宏锐李泽君周雨霞杨健美
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒M基因
- 抗H9亚型禽流感病毒的单克隆抗体、杂交瘤细胞株及其应用
- 本发明公开了一种抗H9亚型禽流感病毒的单克隆抗体，其结合H9亚型禽流感病毒的HA蛋白，并具有血凝抑制活性。本发明还公开了检测H9亚型禽流感病毒抗体的试剂盒及上述单克隆抗体在制备诊断禽流感的产品中的应用。本发明检测H9亚型...
- 李泽君杨健美滕巧泱李雪松戴晓光
- 文献传递
- 表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌的构建与免疫保护试验
- 运用PCR技术,分别从大肠杆菌TB1、107/86和C83907菌株中扩增出不含信号肽序列的Stx 2e B亚单位基因(stx 2e B)、F18茵毛的A亚单位基因(fedA)和F4茵毛亚单位基因(faeG),将这3个基...
- 杨健美施慧高崧陈祥刘秀梵
- 关键词：大肠杆菌菌毛毒素重组菌免疫保护
- 文献传递
- 无抗性表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌构建被引量：3
- 2005年
- 利用平衡致死系统成功地将构建表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌BL21(pFSFaeG)中所含氨苄抗性基因敲除,并转化沙门氏菌宿主菌X4550。经过质粒酶切分析和表达产物的SDSPAGE证实,氨苄抗性基因已经成功敲除,并且目的蛋白仍与谷胱甘肽转移酶相融合,得到有效表达,重组融合蛋白的分子质量约为80ku。经体外连续传代试验,重组菌X4550(pFSFaeG)均能在无抗生素压力下大量扩增并稳定传代,质粒稳定性和蛋白表达稳定性良好。无抗性重组菌的成功构建解决了基因工程疫苗抗性基因潜在危险问题,并有望通过沙门氏菌载体的递送作用,为研制口服疫苗奠定了基础。
- 杨健美张小荣高崧韦栋平刘秀梵
- 关键词：基因敲除蛋白表达
- H3N2禽流感病毒反向遗传操作平台的建立
- 2022年
- 近几年,禽流感病毒(AIV)跨越禽-犬屏障产生新型H3N2犬流感病毒,后者在亚洲多国的犬中广泛流行,造成潜在的公共卫生安全威胁。尽管如此,H3N2 AIV如何跨宿主传播至犬的分子机制尚不清楚。为此,本研究利用早期筛选到的一株不感染犬和鼠,但感染禽的H3N2禽流感病毒A/Duck/Shanghai/01/2009(H3N2)(简称为SH01),通过RT-PCR技术扩增了病毒的8个全基因片段,并分别克隆至PLLB双向表达载体上。将构建成功的8个质粒纯化后共转染293T细胞,转染48 h后加入TPCK胰酶作用2 h,将上清液和细胞一同接种9~11日龄SPF鸡胚,检测其血凝效价。经测序分析,确定获救病毒的8个基因片段序列与亲本毒株的序列完全一致,表明该病毒拯救成功。H3N2禽流感病毒反向遗传操作平台的成功建立为探索该病毒跨宿主传播犬的分子机制提供了工具。
- 石晓娜闫婉婉陈新武潘学李雪松刘芹防杨健美李泽君滕巧泱
- 关键词：H3N2禽流感病毒
- 一种虫卵孵化袋
- 本实用新型公开了一种虫卵孵化袋，包括用于盛装待检物的袋体，所述袋体上具有100～500目孔径的微孔。其中，所述袋体为双层结构包括具有所述微孔的穿孔内层和不透水、不透气的密封外层，所述密封外层套设贴合在所述穿孔内层的外周壁...
- 陆珂李浩石耀军洪炀杨健美林矫矫徐玉梅杨艺朱传刚
- 文献传递
- 抗志贺样毒素Ⅱ型变异体单克隆抗体的制备及特性鉴定被引量：3
- 2006年
- 志贺样毒素Ⅱ变异体(SLT-Ⅱe)是猪水肿病的主要致病因子之一,为了制备SLT-Ⅱe单克隆抗体(mAb),我们从TB1菌中用多粘菌素诱导提取了SLT-Ⅱe蛋白,并且用硫酸铵盐析沉淀法对该蛋白进行了提纯,以提纯蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤细胞技术制备mAb。细胞融合后,培养上清经间接ELISA检测,共得到3株阳性杂交瘤细胞2E11、2H9和4F3,ELISA效价分别为1∶213、1∶213和1∶28,3株杂交瘤细胞培养上清分泌的mAb在Westernblot试验中均与提纯的毒素蛋白反应,在Vero细胞中和试验中均能够中和毒素对Vero细胞的毒性作用,从而为临床分离株SLT-Ⅱe产生的免疫学检测方法奠定了一定的基础。
- 杨健美高崧林矫矫刘金明陈兆国傅志强刘秀梵
- 关键词：单克隆抗体
- 日本血吸虫β-catenin基因、蛋白及用途
- 本发明公开了一种日本血吸虫基因，所述基因具有编码β-catenin蛋白的核苷酸序列，该核苷酸序列包含：编码SEQ ID NO.1氨基酸序列的DNA序列，或编码SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中缺失、添加、插入或取代一...
- 苑纯秀李红飞王孝波冯新港杨健美林矫矫
- 两株H1N1亚型猪流感病毒NS1蛋白抑制Ⅰ型IFN功能比较被引量：2
- 2021年
- 本研究分离得到两株猪源H1N1流感病毒,通过进化树分析发现分别是欧亚类禽H1N1猪流感病毒和类鸭源H1N1猪流感病毒,为了研究两株毒株的NS1蛋白对Ⅰ型IFN产生的抑制能力,分别构建了2个毒株的NS1基因的真核表达载体,将NS1真核表达质粒、Ⅰ型IFN报告质粒与干扰素刺激质粒RIG-I共转染293T细胞,利用双荧光素酶报告基因检测Ⅰ型IFN激活水平。结果显示:欧亚类禽H1N1猪流感病毒NS1蛋白对人源细胞干扰素的拮抗作用明显强于类鸭源H1N1猪流感病毒;2种NS1蛋白对RIG-I与TBK-1激活的IFN-I抑制能力存在显著的差别,但是对IRF-3激活的IFN-I抑制能力没有显著差别。本研究结果初步揭示了欧亚类禽与类鸭源H1N1猪流感病毒抑制IFN-I能力的差异,及H1N1禽流感适应猪群的潜在分子机制。
- 张婷陆晨阳任超超包旦奇陈鸿军李雪松杨健美滕巧泱李泽君刘芹防
- 关键词：猪流感病毒NS1蛋白
