李志强
- 作品数：12 被引量：40H指数：5
- 供职机构：长春生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 应用生物反应器建立人用冻干狂犬病疫苗(Vero细胞)生产工艺的研究
- 目的：应用5L生物反应器，采用片状载体对Vero细胞进行高密度培养制备高毒力滴度的狂犬病毒收获液，经纯化后生产人用冻干狂犬病疫苗。
方法：采用5L生物反应器对培养方法(批次培养和连续灌流培养)进行试验，收获高毒...
- 李志强袁延宝郑淑媛代长海张夫坤顾丹阳戚凤春
- 关键词：狂犬病生物反应器冻干疫苗生产工艺
- 文献传递
- CHO细胞分泌rHBsAg中氨基酸消耗规律的分析被引量：3
- 1995年
- 用氨基酸测试仪分析重组CHO细胞分泌rHBsAg过程中氨基酸的浓度，发现氨基酸的消耗有一定的规律性，其中以丝氨酸、脯氨酸、组氨酸、谷氨酸、亮氨酸、赖氨酸、异亮氨酸消耗较快。
- 王妍李志强官桂范罗璇叶世德
- 关键词：重组CHO细胞乙型肝炎
- 30L生物反应器连续灌注培养重组CHO-C_(28)细胞表达HBsAg的研究被引量：5
- 1999年
- 应用３０ Ｌ生物反应器和微载体悬浮 培养技术，通过电脑全自动控制，连续灌注培养分泌ＨＢｓＡｇ 的重组ＣＨＯ－Ｃ２８细胞。试验了培养方式、连续灌流速度，反应器转速和细胞对葡萄糖消耗等工艺条件。观察培养６０ 天，细胞的生长形态、ＨＢｓＡｇ 分泌动态和染色体数。研究结果表明，连续培养６０ 天，细胞密度可达７．０×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍ ｌ，平均维持在（５．０～６．０）×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍ ｌ，收液的ＲＰＨＡ 滴度可达１∶５１２，ＨＢｓＡｇ 每天平均产量为３０ ｍ ｇ。
- 官桂范李志强王妍李云富耿星涛陈万革叶世德
- 关键词：CHO-C28细胞表面抗原乙型肝炎生物反应器
- 血源乙肝疫苗与基因工程乙肝疫苗联合免疫的效果观察被引量：2
- 1998年
- 应用血源乙肝疫苗和基因工程乙肝疫苗，对婴幼儿和小学生按0、1、6免疫程序进行联合免疫的效果观察。结果第1、2针用血源苗，第3外用基因苗免疫的阳转率（82．9％）明显低于3针均用血源苗的阳转率；第1、2针用血源苗，第3针用基因苗与3针均用基因苗免疫的阳转率均达100％；用血源苗基础免疫，5年后用基因苗加强免疫的阳转率（98．2％）与用血源苗加强免疫的阳转率（100％）差异无显著意义，但加强免疫后的GMT值，基因苗（515．2）明显高于血源苗（31．6）。表明基因苗同样具有良好的免疫效果。
- 李志强王立成叶世德梅春岭文青王光祥邱凤芹乔亚茹崔延顺
- 关键词：联合免疫乙肝疫苗基因工程血源性
- 应用生物反应器建立人用冻干狂犬病疫苗(Vero细胞)生产工艺的研究被引量：6
- 2010年
- 应用15L生物反应器,采用片状载体对Vero细胞进行高密度培养、制备高毒力滴度的狂犬病毒收获液,经纯化后生产人用冻干狂犬病疫苗。采用15L生物反应器对培养方法(批次培养和连续灌流培养)进行试验,收获高毒力滴度的狂犬病毒收获液并制备人用冻干狂犬病疫苗。结果表明:Vero细胞在接种狂犬病毒后可以连续收获病毒液达到25d以上,冻干狂犬病疫苗的效价可以达到5.54IU/剂。本工艺可以用于进行大规模的人用冻干狂犬疫苗的生产。
- 李志强袁延宝郑淑媛代长海张夫坤顾丹阳戚凤春
- 关键词：生物反应器
- 应用国产激流式生物反应器培养表达HBsAg的重组CHO细胞被引量：1
- 2012年
- 目的采用国产激流式生物反应器培养表达HBsAg的重组CHO细胞。方法分别应用美国NBS公司的Celligen310型生物反应器和国产AP20SC型激流式生物反应器(单个细胞培养袋和4个细胞培养袋)连续灌流培养重组CHO细胞,连续培养35 d,每24 h收获1次,采用ELISA法测定细胞收获液中HBsAg的滴度。结果 Celligen 310型生物反应器培养重组CHO细胞分泌的HBsAg在2.0μg/ml水平上可持续8 d,至第18天达最高水平(2.16μg/ml),第35天收液中HBsAg含量为1.12μg/ml;国产AP20SC激流式生物反应器单个细胞培养袋培养重组CHO细胞分泌的HBsAg在2.0μg/ml水平上可持续9 d,第18天达最高水平(2.20μg/ml),第35天收液中HBsAg含量为1.08μg/ml,与Celligen 310型生物反应器相比,收液中HBsAg含量在2.0μg/ml水平持续时间无明显差异;国产AP20SC激流式生物反应器4个细胞培养袋培养重组CHO细胞分泌的HBsAg在2.0μg/ml水平上可持续13 d,与该生物反应器单个细胞培养袋相比明显延长,第21天达最高水平(2.14μg/ml),第35天收液中HBsAg含量为1.5μg/ml,明显高于单个细胞培养袋培养的细胞。结论国产AP20SC型激流式生物反应器可代替进口生物反应器对传代细胞进行大规模培养,用于人用疫苗的生产。
- 李志强张睿王宝忠赵丽剑王宇董海波吕学用李德娟刘瑞
- 关键词：重组CHO细胞
- 应用生物反应器连续培养基因重组CHO细胞的研究被引量：5
- 1993年
- 应用5L生物反应器悬浮培养乙肝重组DNA转化的CHO细胞B_(43)株生产HBsAg。试验了细胞接种量、微载体的加入方式、培养方法(半流加培养和连续灌流培养)对细胞生长形态和HBsAg分泌的影响,初步建立了5L生物反应器的生产工艺,在5L生物反应器最适合连续灌流培养的条件是pH 7.30—7.40,DO 25—35%,T 36.5℃,微载体6—8g/L,灌流速度5.5—7.5L/24h细胞连续培养60天,细胞密度维持在5.0×10~6—1.0×10~7/ml之间,收获细胞液的RPHA效价为1:512—1:1024,HBsAg含量为3—5mg/L。
- 李志强官桂范王妍张兴义叶世德张权一
- 关键词：生物反应器乙型肝炎表面抗原
- 应用篮式生物反应器和新型载体连续培养CHO-C_(28)细胞HBsAg的表达被引量：8
- 1993年
- 应用篮式生物反器,以聚酯纤维为载体连续灌流培养乙肝重组CHO-C_(28)细胞,观察细胞生长和HBsAg的表达。结果灌流速度提高到每天3.5倍工作体积,收液中HBsAg的RPHA效价在维持期为1:256～1:1024。在细胞生长旺盛时,可提高转速使溶解氧(D.O.)控制在20％～30％。在收液中,由于细胞残渣少,既可避免灌流系统堵塞,又有利于提纯。
- 王妍李志强叶世德
- 关键词：生物反应器表面抗原
- 我国研制的乙型肝炎基因重组疫苗近期免疫效果观察被引量：9
- 2002年
- 目的 考察新生儿接种国产乙型肝炎 (乙肝 )中国仓鼠卵巢细胞 (CHO)表达的基因重组疫苗的近期免疫效果。方法 1997年 1月 1日至 1999年 8月 31日 ,在河北省正定县选择 7个乡 ,对2 96 9名新生儿按出生后 2 4h及 1、6个月免疫程序接种 3剂乙肝CHO疫苗 ,每剂 10 μg。每季度对新生儿的乙肝疫苗接种情况进行调查核实。 2 0 0 0年 4月对完成全程免疫的观察对象采集血清 ,检测HBsAg、抗 HBs和抗 HBc三项乙肝病毒标志。结果 新生儿乙肝疫苗全程接种率为 93 74 % (2 783/2 96 9) ,第 1剂在出生 2 4h内接种的及时接种率为 95 4 2 % (2 833/ 2 96 9)。 2 0 0 0年 4月采血率为6 8 4 % (190 6 / 2 783)。新生儿乙肝CHO疫苗全程免疫后第 1年内抗 HBs阳性率 [样本值 /阴性对照值(S/N)≥ 2 1]为 98 2 5 % ,有效抗 HBs阳性率 (S/N≥ 10 0 )为 94 2 6 % ,抗体几何平均滴度 (GMT)为77 6 4 ;其后抗体水平随时间延长逐渐降低 ,第 3年时抗 HBs阳性率为 92 31% ,有效抗 HBs阳转率为6 8 96 % ,GMT为 2 2 86。 3年中HBsAg阳性率均小于 1% ,抗 HBc阳性率和HBV感染率在 1%～ 3%之间 ,未见随年限延长而增加的趋势。
- 刘洪斌马景臣孟宗达张英林韩常全张玉伟赵卉刘玉忠邢占春陈吉朝贾志远夏国良曹惠霖李志强刘崇柏
- 关键词：乙型肝炎预防接种免疫原性
- 狂犬病毒aG株在Vero细胞上传代适应研究被引量：3
- 2009年
- 为研制有效、安全和稳定的Vero细胞狂犬病疫苗提供实验室基础资料。采用狂犬病固定毒4aG株在Vero细胞上进行传代适应,同时对该毒株在Vero细胞上的增殖条件,病毒液的回收方法进行研究。结果显示,狂犬病固定毒4aG株在Vero细胞上多次传代后获得一株Vero细胞适应株(4aG-V株),该毒株的毒力可达8.50 logLD50/ml,且具有很好的抗原性及免疫原性。结果表明,感染Vero细胞最适种毒比例为1∶103,病毒滴度随着时间的延长而增强到第12天后逐渐减弱,且采用低温冻融破碎法回收的病毒液滴度优于直接收液法。4aG-V株在Vero细胞上维持时间长,可连续收液,有望其生产高滴度的狂犬病毒液。
- 袁彦宝郑淑媛李志强代长海顾丹阳赵淑杰
- 关键词：VERO细胞传代适应
