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朱永烽

作品数：4 被引量：16H指数：2
供职机构：深圳大学生命科学学院过敏反应与免疫学研究所更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划广东省科技计划工业攻关项目更多>>
相关领域：医药卫生理学生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 3篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 3篇医药卫生
  • 1篇生物学
  • 1篇理学

主题

  • 4篇变应原
  • 3篇印迹
  • 3篇粉尘螨
  • 3篇尘螨
  • 2篇免疫
  • 2篇免疫印迹
  • 2篇克隆表达
  • 2篇纯化
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白质
  • 1篇蛋白质印迹
  • 1篇德国小蠊
  • 1篇修饰
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光光谱
  • 1篇螨变应原
  • 1篇哮喘
  • 1篇化学修饰
  • 1篇基因
  • 1篇基因表达

机构

  • 4篇深圳大学
  • 1篇中国科学院

作者

  • 4篇朱永烽
  • 3篇刘志刚
  • 2篇高波
  • 1篇徐宏
  • 1篇朱健琦
  • 1篇黄海珍

传媒

  • 1篇中国寄生虫学...
  • 1篇光谱学与光谱...
  • 1篇寄生虫与医学...

年份

  • 1篇2008
  • 3篇2006
共 4 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
粉尘螨6类变应原(Derf6)的克隆表达、纯化及免疫学特性鉴定被引量：5
2006年
目的构建粉尘螨6类变应原(Dermatophagoides farinae,Derf6)基因的高效原核表达载体,并进行表达、纯化及生物学功能分析。方法根据Derf6基因已知序列,设计1对引物,通过对纯培养的粉尘螨提取总RNA,采用RT-PCR方法扩增出Derf6基因片段,PCR产物克隆入pMD18-T载体,转化大肠埃希菌(E.coliTop10),经PCR和酶切鉴定并测序。将上述所得阳性克隆菌株扩大培养,碱裂解法提取质粒,所得重组质粒pMD18-T-Derf6和空质粒pET-24a同时用限制性内切酶EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,经纯化后连接并转化至E.coliTop10。构建的重组质粒pET24a-Derf6经PCR、酶切和测序鉴定后,再转化至E.coliBL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Westernblotting)鉴定其表达效果,用Ni+离子亲和层析柱纯化重组质粒pET24a-Derf6表达产生的组氨酸重组蛋白。结果构建了重组质粒pMD18-T-Derf6和pET24a-Derf6。SDS-PAGE结果表明Derf6基因在E.coliBl21(DE3)中获得良好的表达,所得重组蛋白相对分子质量(Mr)为31000,与理论值一致,经亲和层析纯化后,SDS-PAGE结果显示单一条带。该蛋白以尘螨过敏患者血清进行Westernblotting,结果表明具有良好的IgE结合活性。结论克隆、表达并纯化了具有良好尘螨致敏患者IgE结合活性的Derf6。
朱永烽刘志刚高波
关键词：粉尘螨基因表达纯化蛋白质印迹
粉尘螨变应原Derf6、Derf18基因的克隆表达及Derf1蛋白的mPEG-Mal化学修饰
近半个世纪以来，变应性鼻炎(Allergicrhinitis，AR)和过敏性哮喘等过敏性疾病的发病率呈明显增加趋势，而且这种趋势是全球性的。这引起了世界卫生组织的高度重视，并将过敏性疾病列为二十一世纪需重点防治的三大疾病...
朱永烽
关键词：粉尘螨变应原免疫印迹化学修饰过敏性哮喘
文献传递
德国小蠊变应原Bla g 2蛋白变复性的荧光光谱研究被引量：2
2006年
包涵体中的重组蛋白经抽提后可以在变性状态下纯化,而纯化后的复性过程是基因工程下游处理的重要环节。通过对变应原Bla g 2蛋白复性前后荧光光谱的比较和分析、变性剂(尿素和SDS)对复性后Blag 2蛋白的荧光滴定实验、以及复性后Bla g 2在不同pH下的荧光光谱分析,推断出Bla g 2蛋白分子在不同环境下构象的变化及其光谱学特征,初步建立了一种新的检测重组变应原蛋白变复性的光谱实验方法。
朱健琦刘志刚黄海珍朱永烽徐宏
关键词：德国小蠊变应原BLA复性荧光光谱
粉尘螨Der f18变应原的克隆表达、纯化及免疫学特性鉴定被引量：10
2008年
通过对纯培养的粉尘螨提取总RNA,采用RT-PCR方法有效地扩增出Der f18片段,将Der f18连接到pET-24a表达载体上并转化到表达菌BL21(DE3)中,得到重组质粒pET-Der f18和重组工程菌。重组工程菌经IPTG诱导培养,高效表达出Der f18蛋白,SDS-PAGE结果显示表达产物约为52kDa。表达产物经亲和层析纯化,用Western blot方法检测免疫学活性,结果表明目的蛋白具有良好的免疫原性。
朱永烽刘志刚高波
关键词：粉尘螨纯化免疫印迹
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