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甘蓝型油菜BnMAPK1的原核表达、亚细胞定位及酵母双杂交文库筛选被引量：4: 2020年; 植物的丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-Activated Protein Kinases,MAPKs)级联是生长进程中多种信号跨膜传递的共同通路,它可以将外源刺激转入细胞内并引发细胞应答。目前C族MAPKs在甘蓝型油菜中的研究报道还很有限。本研究通过1个甘蓝型油菜的C族BnMAPK1基因的生物学进程聚类分析发现,BnMAPK1可能参与蛋白磷酸化、生长素介导的信号途径、逆境应答、细胞周期及转录等过程。BnMAPK1具有369个氨基酸残基,其相对分子质量约为42.5 kD,其可溶性蛋白可在原核系统中被诱导表达。BnMAPK1的亚细胞定位结果显示,BnMAPK1主要在细胞核内表达。Bait质粒pGBKT7-BnMAPK1在酵母双杂交系统中无毒性及自激活活性。为深入研究BnMAPK1蛋白参与的生物学进程,从甘蓝型油菜中油821苗期根、茎、叶中分别提取总RNA,分离得到mRNA,利用SMART技术合成并纯化双链cDNA后建立甘蓝型油菜混合cDNA文库。以共转化法筛选与BnMAPK1相互作用的蛋白,对其分析与鉴定显示,BnMAPK1在生长发育、非生物及生物逆境、转录、蛋白合成及代谢、翻译及翻译后修饰等过程中起作用。研究结果为MAPKs级联,尤其是C族MAPKs的研究提供了新的视野,为甘蓝型油菜抗性的机理研究及分子育种奠定了重要的理论依据。; 王珍姚梦楠张晓莉曲存民卢坤李加纳梁颖; 关键词：甘蓝型油菜原核表达亚细胞定位酵母双杂交

一种紫红叶观光型多用途甘蓝型油菜选育方法: 本发明属于油菜选育技术领域，公开了一种紫红叶观光型多用途甘蓝型油菜选育方法，以红叶芥菜型油菜(P1)为母本，以早开花或者不同花色的天然甘蓝型油菜(P2)为父本进行种间杂交，获得...; 崔翠周清元徐新福李加纳唐章林卢坤曲存民殷家明林呐

干旱胁迫下甘蓝型油菜籽粒含油量和蛋白质含量变化的全基因组关联分析被引量：3: 2023年; 【目的】干旱是甘蓝型油菜生长发育过程中一种常见的非生物胁迫,严重影响了其产量和品质。联合全基因组关联分析和转录组差异表达分析,筛选干旱胁迫条件下影响甘蓝型油菜籽粒含油量和蛋白质含量变化的候选基因,为解释干旱胁迫下甘蓝型油菜籽粒含油量及蛋白质含量的变化提供理论基础。【方法】利用旱棚盆栽方式模拟干旱胁迫环境,使用183份甘蓝型油菜构成的自然群体,于2019和2020年在模拟干旱胁迫条件下收获2年的籽粒,并进行籽粒含油量以及蛋白质含量的测定,将得到的表型数据与60K芯片的基因型数据(包含34 103个SNP)进行全基因组关联分析,同时,结合相同处理下花后不同干旱时间段(30、40和50 d)的籽粒转录组差异基因数据,筛选共有基因,并利用甘蓝型油菜和拟南芥数据库注释信息、已报道的相关文献和转录组差异基因表达水平鉴定与干旱胁迫下甘蓝型油菜籽粒含油量及蛋白质含量变化相关的候选基因。【结果】通过对2年间籽粒含油量和蛋白质含量的分析,发现材料重复性较好,干旱胁迫造成甘蓝型油菜籽粒的含油量下降,蛋白质含量上升;全基因组关联分析得出的最佳模型主要为一般线性模型下的Q或na?ve模型,共检测出38个显著关联位点(P<1/31597或P<1/31278),主要分布在A03(6个)、A04(8个)和C03(8个)染色体,各位点分别对含油量和蛋白质含量变化的贡献率均超过10%,其中含油量变化位点最大贡献率为23.97%,蛋白质含量变化位点最大贡献率为22.21%。通过整合全基因组关联分析和转录组分析,筛选出256个共有基因,根据基因注释和文献报道鉴定出与干旱胁迫下含油量及蛋白质含量变化相关的25个候选基因,其中包含转录因子(如bZIP transcription factor GBF6、TALE transcription factor ATH1、MYB-like Domain transcription factor MYBD、NAC transcription factor ANAC029和ERF transcription factor; 胡盛李阳阳唐章林李加纳曲存民刘列钊; 关键词：甘蓝型油菜干旱胁迫含油量候选基因

一种调控甘蓝型油菜粒色的转基因表达载体及其构建方法和应用: 本发明属于基因工程领域，具体涉及一种调控甘蓝型油菜粒色的转基因表达载体及其构建方法和应用,所述甘蓝型油菜粒色的转基因表达载体为RNAi‑BnMYB47转基因表达载体，所述RNAi‑BnMYB47转基因表达载体的RNAi片...; 曲存民李加纳卢坤徐新福王瑞唐章林梁颖刘列钊

甘蓝型油菜BnKAT2基因及其启动子和应用: 本发明涉及甘蓝型油菜BnKAT2基因及其启动子和应用，其中BnKAT2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，该基因能显著增加植株株高，增加主花序有效长度和主花序角果数，同时显著增多植株单株总角果数，从而增加单株产...; 梁颖张崟董世青钱伟曲存民万华方

下调表达Bna-miR168a在改良油菜性状中应用: 本发明公开了一种下调表达Bna‑miR168a在改良油菜性状中应用。本发明揭示了Bna‑miR168a与油菜的籽粒产量、生物产量、粒果比、收获指数、角果数、二次有效分支数形状密切相关，下调Bna‑miR168a的表达量可...; 张立源卢坤曲存民万媛媛张超李加纳

高校分析测试中心建设与发展对策的探索被引量：7: 2019年; 分析测试中心是高校进行科学研究、高素质人才培养和社会服务的重要平台之一。分析测试中心的建设和发展离不开仪器设备的使用效益,而测试中心的管理制度、仪器共享程度和测试队伍的建设等与仪器使用效益息息相关。本文从提高仪器设备共享程度和优化测试队伍两方面,对高校分析测试中心的建设与发展进行了探讨。; 周燕周建如曲存民文婧宋小梅; 关键词：高校分析测试中心仪器共享

调控植物种子大小的基因、过表达载体、农杆菌及应用: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种调控植物种子大小的基因、过表达载体、农杆菌及应用。该基因为BnaA03.MKK6基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，编码序列如SEQ ID NO:2所示，蛋白序列如SE...; 卢坤余世杰魏丝雨常玮魏丽娟曲存民

鉴定半矮化甘蓝型油菜的分子标记和引物及其应用: 本发明属于植物基因工程技术领域，提供鉴定半矮化甘蓝型油菜的分子标记SWU‑sdA03和引物及其应用，所述分子标记位于甘蓝型油菜A03染色体上的BnaA03.IAA7基因，所述分子标记的序列如SEQ ID NO.1所示，所...; 平小科刘列钊阎星颖王嘉周清元曲存民

一种选育甘蓝型黄籽油菜隐性核不育临保系的方法: 本发明提供了一种选育甘蓝型黄籽油菜隐性核不育临保系的方法，包括：a)以黑籽隐性全不育品系为母本，甘蓝型黄籽品系为父本进行杂交，获得F1代；b)采用甘蓝型油菜小孢子培养技术对F1...; 王瑞殷家明李加纳徐新福樊晋华曲存民卢坤唐章林

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曲存民

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