暴丽华
- 作品数：17 被引量：77H指数：4
- 供职机构：山东大学医学院更多>>
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- 中脑皮层投射多巴胺神经元的提取及帕潘立酮对其电生理学特性的影响被引量：1
- 2012年
- 目的精确示踪并分离中脑皮层多巴胺(DA)能神经元,检测帕潘立酮对其动作电位的影响。方法采用脑立体定位技术,将荧光逆行性示踪剂注射至鼠脑内嗅皮层区,灌注取脑,行冰冻切片;采用免疫组织化学技术进行酪氨酸羟化酶(TH)染色;依据荧光强度分选示踪标记的神经细胞并培养,采用细胞膜片钳技术对其进行电流注射,并加入抗精神病药物帕潘立酮,检测加药前后动作电位的产生及变化。结果准确标记向脑皮质投射的中脑DA能神经元,呈TH阳性,位于腹侧被盖区;筛选出标记的DA能神经元,电流刺激可诱发出DA神经元典型的动作电位,加入抗精神病药物帕潘立酮后,动作电位幅度降低(P<0.05)、宽度变小(P<0.01)。结论精确分离出向脑额叶投射的中脑皮层DA神经元,帕潘立酮可降低此类细胞动作电位幅度及宽度,从而降低细胞的兴奋性。
- 董海曼高青张静暴丽华李贵宝彭雷冯晓雯岳庆伟刘增训孙晋浩高英茂
- 关键词：多巴胺神经元立体定位技术动作电位
- 地佐环平诱发原代培养脑皮层神经元凋亡的实验研究
- 探讨地佐环平对原代培养胎鼠脑皮层神经元凋亡的影响。地佐环平又名MK-801,是一种非竞争性NMDA受体拮抗剂,广泛应用于精神分裂症动物模型的建立,研究发现高浓度的地佐环平明显损伤体外培养的GABA能神经元,部分GABA能...
- 彭雷高英茂高青张静暴丽华李贵宝董海曼冯晓雯岳庆伟孙晋浩
- 补阳还五汤提取液对Schwann细胞氧化损伤的保护作用被引量：30
- 2006年
- 本实验建立了Schwann细胞的体外氧化损伤模型,从对Schwann细胞的抗氧化损伤作用探讨补阳还五汤的疗效机制。用原代培养的Schwann细胞建立氧化损伤模型,将培养细胞分为氧化损伤组,补阳还五汤处理组及正常组:(1)应用MTT方法检测细胞的活性;(2)应用生化技术检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的含量;(3)采用荧光探针Fluo-3-AM标记细胞,用激光共聚焦显微镜观察H_2O_2对Schwann细胞内游离钙([Ca2+])抗氧化损伤的影响。结果显示:与对照组相比,H2O2处理组细胞活性降低(P<0.01),SOD含量明显减少(P<0.01),而补阳还五汤预处理后细胞内[Ca2+]i升高明显被减弱(P<0.01),细胞存活率明显升高(P<0.01)。以上结果表明补阳还五汤能通过抗过氧化损伤保护Schwann细胞。
- 邢三丽李振华孙晋浩刘岳鹏暴丽华
- 关键词：SCHWANN细胞抗氧化作用补阳还五汤
- 白藜芦醇对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用
- 2012年
- 目的探讨白藜芦醇对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法用不同浓度的Aβ25-35处理PC12细胞,建立细胞毁损模型,然后加入不同浓度的白藜芦醇,在显微镜下观察PC12细胞形态的变化及突起生长情况。采用MTT检测技术观察PC12细胞的生长活性,采用酶标仪检测乳酸脱氢酶(LDH)的活性,采用瑞士-吉姆萨染色和流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果损伤组加入Aβ25-35,24 h后细胞形态不规整,突起出现不同程度的肿胀破裂,48 h后见不到完整的突起结构;保护组加入白藜芦醇预孵育后明显延缓突起损伤,24 h后仍能观察到比较完整的突起结构,48 h后远端发生轻微断裂。保护组细胞突起长度和D(λ)值明显大于损伤组(P<0.01),细胞凋亡数以及LDH活性明显低于损伤组(P<0.01)。结论白藜芦醇对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤具有明显的保护作用。
- 冯晓雯高青董海曼彭雷岳庆伟张静暴丽华李贵宝孙晋浩高英茂
- 关键词：细胞凋亡白藜芦醇淀粉样Β蛋白PC12细胞
- 帕潘立酮对地佐环平损伤脑皮层神经元的保护作用及其机制被引量：1
- 2012年
- 目的探讨帕潘立酮对地佐环平损伤大鼠脑皮层神经元的保护作用及机制。方法取孕15 d胎鼠脑皮层神经元体外培养,应用地佐环平损伤神经元,然后加入不同浓度的帕潘立酮。采用MTT技术检测脑皮层神经元的生长活性,采用酶标仪检测乳酸脱氢酶(LDH)的活性及激光共聚焦技术检测神经元细胞内Ca2+浓度观察神经元凋亡情况,通过神经元突起数目及长度检测神经元生长情况,应用实时定量PCR技术检测Akt1、GSK3β的表达变化。结果与正常对照组相比,地佐环平损伤组神经元活性明显下降,LDH释放增加,细胞内游离钙离子浓度升高(P均<0.01),神经元突起总长度下降,神经突起数目呈现不同程度的减少(P<0.01),RT-PCR结果显示,Akt1及GSK3β表达下降(P<0.01);加入不同浓度的帕潘立酮能明显对抗地佐环平对神经元的损伤,MTT结果显示神经元活性升高(P<0.01),LDH活性明显降低(P<0.001),细胞内游离Ca2+浓度显著下降(P<0.01),神经突起数目和长度增加(P<0.01),Akt1及GSK3β表达上升(P<0.01)。结论帕潘立酮对地佐环平损伤脑皮层神经元具有明显保护作用,可抑制细胞凋亡,并通过Akt1-GSK3β通路促进神经突起的生长。
- 彭雷董海曼张静暴丽华李贵宝宋涛刘增训孙晋浩高英茂
- 关键词：脑皮层神经元地佐环平
- 中脑-皮层多巴胺亚群神经元的提取及帕潘立酮对其电生理学特性的影响
- 精神分裂症是临床上发病率高、治愈率低的精神顽疾,中脑-皮层多巴胺(DA)通路的异常则是导致该病的解剖学基础,但其建立的机制不清。本实验将荧光示踪剂立体定位注射至Wistar新生鼠脑内嗅皮层区,逆行标记中脑皮层DA神经元;...
- 董海曼高英茂高青张静暴丽华李贵宝彭雷冯晓雯岳庆伟孙晋浩
- 血清对联合培养神经上皮干细胞与Schwann细胞的影响被引量：4
- 2007年
- 目的:探讨血清对联合培养神经上皮干细胞与Schwann细胞的影响,进一步寻求诱导神经上皮干细胞定向分化的影响因素。方法:采用不同浓度血清联合培养神经上皮干细胞与Schwann细胞,收集上清液作为条件培养液,免疫细胞化学染色观察条件培养液诱导神经上皮干细胞分化,统计分析分化为神经元与星形胶质细胞的比例;MTT检测条件培养液促Schwann细胞存活及增殖的作用。结果:Schwann细胞促进神经上皮干细胞存活和分化,随着血清浓度增加,神经上皮干细胞分化形成的神经元比例减少;神经上皮干细胞及血清均促进Schwann细胞存活和增殖,随血清浓度增加,存活及增殖率增加。结论:无血清或较低血清浓度有利于共培养的Schwann细胞存活和增殖,同时也有利于共培养神经上皮干细胞存活和向神经元方向分化。
- 暴丽华李振华孙晋浩丛丽刘文静高英茂
- 关键词：干细胞神经上皮分化雪旺细胞
- 恒定磁场对Schwann细胞氧化损伤的保护作用被引量：6
- 2007年
- 目的:探讨恒定磁场对Schwann细胞氧化损伤保护作用的机制。方法:用体外传代纯化培养的Schwann细胞建立氧化损伤模型,将培养细胞分为氧化损伤组,恒定磁场(4 mT)保护组及正常组。采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞的活性,用生化技术检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的含量,用免疫组织化学方法检测各组半胱氨酸天冬氨酸酶(Caspase-3)的表达。结果:与正常组及保护组相比,HB2BOB2B处理组细胞活性降低(P<0.01),SOD含量明显减少(P<0.01),MDA含量明显增加(P<0.01),Caspase-3表达呈强阳性,恒定磁场保护组细胞存活率明显升高(P<0.01),SOD含量较损伤组高(P<0.01),MDA含量明显减少(P<0.01),Caspase-3表达弱阳性。结论:4 mT恒定磁场能通过抗氧化损伤保护Schwann细胞。
- 张杰李振华孙晋浩暴丽华刘岳鹏
- 关键词：周围神经系统细胞凋亡
- 高温致神经管畸形相关基因CDK109克隆及其致畸相关性分析
- 2012年
- 目的通过筛选高温致畸金黄地鼠胚胎神经管cDNA文库,克隆高温致畸相关基因CDK109。方法利用本室构建的高温致畸胚胎神经管cDNA文库,采用噬菌斑原位杂交方法,用寡核苷酸探针筛选cDNA文库,挑取阳性噬菌斑,将其转化为质粒,再通过限制性酶切鉴定阳性克隆并测序,将该基因标记探针与孕8.5 d高温致畸胚胎神经管组织和正常对照胚胎神经管组织总RNA进行NORTHERN杂交,以便确认该基因在高温致神经管畸形中的异常表达。结果成功地从高温致畸金黄地鼠胚胎神经管cDNA文库中筛选出高温致畸相关基因CDK109全长,其在高温致畸组的表达明显高于对照组。结论 CDK109在神经管中的高表达与高温致神经管畸形密切相关。
- 张静高英茂孙晋浩暴丽华
- 关键词：神经管缺损CDNA文库金仓鼠
- 轴突导向因子EphA5沉默后抑制中脑神经上皮细胞投射
- 2012年
- 目的：探讨轴突导向因子EphA5在中脑神经上皮细胞向纹状体投射中的作用。方法：从孕11d大鼠胚胎取材并培养中脑神经上皮细胞；设计EphA5基因干扰序列，构建RNA干扰载体，采用电转染技术将EphA5干扰载体转入中脑神经上皮细胞，电转后将中脑神经上皮细胞与纹状体共培养，观察转染后中脑神经上皮细胞向纹状体组织的靶向生长情况。结果：中脑神经上皮细胞与纹状体组织块联合培养，神经突起明显朝向组织块生长；EphA5基因干扰载体转染中脑神经上皮细胞可降低EphA5蛋白表达，EphA5基因沉默后神经上皮细胞突起朝向纹状体生长趋势不明显。结论：EphA5基因沉默后中脑神经上皮细胞向纹状体投射减弱，EphA5基因可调控中脑神经上皮细胞向纹状体的靶向投射。
- 房芃高青冯晓雯张静暴丽华董海曼彭雷李振华孙晋浩高英茂
- 关键词：神经上皮细胞中脑RNA干扰
