易智谦
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 雷帕霉素与低频电磁场联合应用对大鼠骨髓间充质干细胞成骨效应的影响
- 2013年
- 目的观察雷帕霉素与低频电磁场联合运用对大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨效应的影响。方法选取成年SD大鼠15只，采用体外分离法培养大鼠BMSCs，传代3次后接种至细胞培养板中，将其分为对照组、雷帕霉素组、电磁场刺激组和联合应用组。对照组应用达尔伯改良伊格尔培养基（DMEM）进行培养；雷帕霉素组在DMEM中加入浓度为5nM的雷帕霉素；电磁场刺激组则在DMEM基础上给予频率为15Hz、强度为1mT的脉冲电磁场刺激；联合应用组在加入浓度为5nM雷帕霉素的DMEM基础上给予频率为15Hz、强度为1mT，每天1h的脉冲电磁场刺激。分别于干预后7d、14d和21d，提取细胞的总RNA和总蛋白，采用茜素红染色后置于显微镜下观察，分析比较不同时间点各组的成骨效应。
- 易智谦宋明宇虞冀哲刘阳韦盛杨勇李峰吴华
- 关键词：雷帕霉素电磁场
- 雷帕霉素促成骨及与成骨诱导剂和电磁场联合作用的研究
- 目的:研究不同浓度间雷帕霉素促成骨效率及探讨雷帕霉素与成骨诱导剂及电磁场联合作用的效果
方法：1取60~80g雄性SD大鼠的骨髓间充质干细胞，分离培养，3代后接种六孔板，分为三个时间段研究7天，14天，21天：其...
- 易智谦
- 关键词：雷帕霉素成骨效应电磁场
- 文献传递
- 探讨电磁场影响骨髓间充质干细胞增殖分化的时间依赖性被引量：1
- 2012年
- 目的探究正弦波电磁场诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨方向分化、促进其增殖的时间依赖性。方法用差速贴壁法分离培养(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs),取用生长状态良好的第三代细胞进行实验。将细胞按照1×105个/孔接种于3.5 cm细胞培养皿中。将细胞培养皿按照完全随机分组的原则分为实验组与对照组,每组分别设有1 d组、4 d组、7 d组、10 d组、14 d组共五个亚组。将实验组置于15 Hz 1 mT正弦波电磁场中每天暴磁1 h,对照组在同条件无磁场的细胞培养箱中培养。暴磁结束后提取各组细胞总RNA,用荧光定量PCR方法检测比较各组中成骨指标:RUNX2、碱性磷酸酶(ALP)、骨唾液酸蛋白(BSP)、骨桥蛋白(OPN)基因相对表达量的变化趋势。另有一批细胞按照1×103个/孔接种于96孔细胞培养板中,每块细胞培养板设7个副孔,共接种10块细胞培养板。按照完全随机分组原则,随机分组为实验组与对照组,每组分别设有1 d组、4 d组、7 d组、10 d组、14 d组共五个亚组。将实验组置于15 Hz 1mT正弦波电磁场中每天暴磁1 h,对照组在同条件无磁场的细胞培养箱中培养。用CCK8法检测比较各组细胞增殖情况。结果电磁场作用骨髓间充质干细胞的早期阶段(1 d、4 d)可以诱导其向成骨方向分化,而在其作用的晚期阶段则抑制其进一步成骨方向分化;相应的电磁场作用初期抑制大鼠骨髓间充质干细胞增殖,电磁场作用后期可促进其增殖,尤其在7 d、10 d时效应明显。结论电磁场可以影响大鼠骨髓间充质干细胞增殖和成骨方向分化,并且这种影响具有时间依赖效应。
- 宋明宇李峰杨勇虞冀哲易智谦刘阳吴华
- 关键词：电磁场成骨
- 不同作用时间下正弦波电磁场对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的效应被引量：4
- 2012年
- 目的探究15Hz正弦波电磁场体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨方向分化的最佳时间窗。方法体外分离培养SD大鼠BMSCs，将长势良好的第三代细胞，按照1×10^5个／孔接种细胞于3．5cm细胞培养皿中，接种后第2天将所有培养皿编号。按随机数字表法随机分为对照组和暴磁组，再按暴磁总天数分为A组（7d）、B组（14d）、C组（28d），A组包括A0组（对照组）、A1组（暴磁每日1h）、A2组（暴磁每日4h）、A3组（暴磁每日8h）；B组包括B0组（对照组）、B1组（暴磁每日1h）、B2组（暴磁每日4h）、B3组（暴磁每日8h）；C组包括C0组（对照组）、C1组（暴磁每日1h）、C2组（暴磁每日4h）、C3组（暴磁每日8h）。每批次细胞取自同一只老鼠，暴磁组置于15Hz1mT正弦波电磁场中暴磁。用荧光定量PCR方法检测各组Runt相关转录因子2（RUNX2）、骨唾液酸蛋白（BSP）、骨桥蛋白（OPN）基因表达量的变化；用茜素红染色方法比较各组钙结节分布；用蛋白印迹法（Westernblot）检测比较各组RUNX2蛋白量的变化。结果15Hz正弦波电磁场刺激7d可以体外诱导大鼠BMSCs向成骨方向分化，以A，组的效应最为明显，并且以早期成骨指标RUNX2的效应最为突出；磁场刺激14d后，则以B．组效用明显，并且以晚期成骨指标OPN的效应明显。WesternBlot比较各组RUNX2蛋白量的变化，趋势相近。电磁场刺激14d和28d后，以B1组和C1组的钙结节量最多。结论15Hz正弦波电磁场诱导BMSCs成骨分化有明显的时间窗口效应；随着暴磁天数的增加．每天短时间（1h）暴磁即可达到较好的诱导效果。
- 宋明宇杨勇虞冀哲易智谦徐西强尚林刘阳吴华
- 关键词：电磁场骨髓间充质干细胞成骨分化
