张继晓
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：吉林农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目博士后科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 利用BiFC技术探究多酶复合物调控玉米淀粉合成机理的研究
- 玉米淀粉广泛应用到人类生产生活中,对于玉米淀粉代谢调控的研究一直受到广泛关注。淀粉代谢是复杂的调控网络,由多个酶参与完成,早起研究主要集中在植物体外条件下单一代谢关键酶的催化反应机理的研究。近年来研究表明玉米胚乳中淀粉代...
- 张继晓
- 关键词：BIFC烟草
- 文献传递
- 双分子荧光互补技术(BiFC)分析玉米SSⅠ与PPDK1之间的蛋白互作被引量：5
- 2013年
- 【目的】分析玉米胚乳可溶性淀粉合成酶(SSⅠ)与质体型糖酵解途径关键催化酶丙酮酸磷酸双激酶(PPDK1)的蛋白互作关系,揭示可能发生互作的亚细胞位置。【方法】采用酶切连接的方法构建326-CYCHA-ss1和326-CYNEE-ppdk1双分子荧光互补表达载体,转化农杆菌EHA105,瞬时浸染烟草叶片组织,激光共聚焦显微镜下观察SSⅠ和PPDK1相互作用产生的荧光信号。【结果】双酶切试验鉴定表明,326-CYCHA-ss1和326-CYNEE-ppdk1重组载体构建正确;PCR结果证实,植物表达载体成功转化到农杆菌EHA105中;双分子荧光互补试验中,可观测到SSⅠ和PP-DK1相互结合而产生的黄色荧光信号。【结论】证实SSⅠ和PPDK1能够在植物活体细胞内发生真实的蛋白互作。
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- 玉米质体型AGPase小亚基和糖酵解关键酶PPDK1互作关系的研究
- 2014年
- 【目的】利用双分子荧光互补(BiFC)技术,在烟草叶肉细胞中分析玉米ADP-葡萄糖焦磷酸化酶质体型小亚基(AGPase-bt2)与丙酮酸磷酸双激酶(PPDK1)之间的相互作用。【方法】构建326-CYCHA-AGPase-bt2和326-CYNEE-PPDK1双分子荧光表达载体,转化农杆菌EHA105,瞬时浸染烟草叶肉细胞,激光共聚焦显微镜下观察AGPase-bt2和PPDK1的相互作用。【结果】双酶切试验表明,326-CYCHA-AGPase-bt2、326-CYNEE-PPDK1载体构建正确;PCR结果证实,植物表达载体成功转化到农杆菌EHA105中;浸染烟草叶片后,AGPase-bt2和PPDK1在叶肉细胞中高效表达,出现BiFC荧光信号。【结论】AGPase-bt2和PPDK1在植物细胞内存在真实互作关系。
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